两个野生蜜环菌菌株鉴定及菌丝体培养研究

杜忠伟，胡志强，亢学平，李健，王旭，王鑫

(延边朝鲜族自治州农业科学院，吉林 延边 133000)

蜜环菌(Arimillariamellea)，属于担子菌亚门，伞菌亚纲，伞菌目，白蘑科，蜜环菌属，是一种可以食用菌的大型真菌，广泛分布于北半球的温带地区。菌丝体是蜜环菌的营养器官，在不良的环境条件下形成菌索，人工培养主要是对菌索的培养。蜜环菌与天麻存在共生关系，通过菌索入侵天麻，并为天麻的无性繁殖提供营养物质。因此蜜环菌的质量对天麻产品质量和产量产生重要的影响。目前全世界己鉴定的蜜环菌生物种近40 种，选育优良的蜜环菌菌株是发展天麻产业的前提和基础，我们针对东北地区的常见蜜环菌进行采集，对其中两种进行了比较试验，为蜜环菌菌种选育提供基础资料。

1 材料和方法

1.1 研究材料

将采集到的两个蜜环菌菌株编号为AM1和AM2。

AM1采集地：吉林省延边和龙市八家子泉水洞林场，采集时间：2019年9月3日，阔叶林树根部。

AM2采集地：吉林省延边和龙市八家子泉水洞林场，采集时间：2019年9月12日，针叶林树根部。

母种培养基：选择使用PDA加富培养基进行菌种培养，培养温度为25 ℃。

图1 野生采集的蜜环菌子实体(注：A,C:AM1;B,D:AM2)

1.2 试验方法

1.2.1 培养基制作及接种。制作PDA加富培养基：先称取木屑6 g，麸皮20 g，用适量水调匀，再加入1000 mL水煮制，待煮沸时开始记时，保持30 min后过滤，将过滤好的溶液加入到制作好的PDA培养基中，混合加热后，倒入试管中，高温高压(121 ℃，30 min)灭菌，摆斜面、冷却，将等量的菌种在超净工作台上接种至培养基中间位置。

1.2.2 菌丝体培养。将接完种的试管标记好后放入25 ℃的恒温培养箱培养，萌发后测量菌索生长速度，观察培养基的颜色变化，及两个菌株的长势。

2 试验结果

2.1 形态学鉴定

通过形态学的描述比较，利用显微镜观察孢子的形态特征，检索真菌志和相关资料进行鉴定。

AM1:子实体簇生，菌盖直径3～8 cm，初期成半球形，后期平展，颜色深棕色，表面有毛状鳞片，菌肉白色，菌褶初期白色后期黄棕色，延生。菌柄长5～10 cm，圆柱形，顶部至基部颜色由白色变为灰白色，在基部有黄色菌丝，具有菌环。担孢子呈椭圆形，无色，(8～10) μm ×(5～7) μm,非淀粉质。

经形态学鉴定AM1为奥氏蜜环菌(Arimillariaostoyae)。

AM2:子实体生于阔叶林树干根部或有树根的地上，簇生，菌盖直径3～8 cm，扁球形至平展，黄白色至黄色，中间部位有鳞片，菌肉白色，菌褶黄白色，延生，稀疏，不等长。菌柄细长，长度3～10 cm，直径3～10 mm，中空，延生，从上至下颜色变深成黄褐色，担孢子呈椭圆形至卵圆形，(8～10) μm×(5～7) μm，光滑，无色，非淀粉质。至混合均匀鉴定AM2为假蜜环菌(Arimillariatabescens)。

经形态学鉴定两株蜜环菌为不同种。

2.2 菌丝体培养

两种蜜环菌在PDA加富培养基中的生长状态存在明显的差别，AM1菌索生长较快，长势好，菌索粗壮，产生的黑色色素较多。AM2菌索生长较慢，长势差，菌索较细，培养基表面白色菌丝较多。

图2 菌丝体(菌索)培养

表1 两株蜜环菌在相同培养基下生长情况比较

3 结论与讨论

目前，蜜环菌主要用于种植天麻、猪苓等药材，人工培养蜜环菌菌材为天麻及猪苓等提供营养。天麻、猪苓种植是个灵活、实用、投入低、效益高的产业，适宜于城镇居民下岗、失业者、打工回乡创业者等不同社会群体生产发展，天麻、猪苓等种植可利用废弃资源、闲置空地，有利于生态环境的保护，创造了良好的经济效益和社会生态效益。而蜜环菌菌种质量直接影响天麻、猪苓等的质量和产量，蜜环菌菌索粗壮，长速快说明蜜环菌活力及侵染能力强，能够很好的为猪苓及天麻提供营养，在选择蜜环菌时主要看其菌索的活力，活力强则天麻、猪苓产量高，品质好。通过对两种蜜环菌AM1和AM2的鉴定及培养验证，能够选择出菌索粗壮，生长快速的蜜环菌。AM1和AM2用来作为天麻、猪苓栽培的菌材制作种源，需要进一步的试验研究。