蒙脱石影响泥鳅肝脏内盐酸左旋氧氟沙星分布的研究

姚俊涛 姜萱 李财进 梅富琪 钱坤

摘要：目的研究蒙脱石对泥鳅肝脏中盐酸左氧氟沙星分布的影响。方法选取30克左右的泥鳅，分成7组，分别为空白组，高、中、低浓度的盐酸左氧氟沙星组，高、中、低浓度蒙脱石与中盐酸左氧氟沙星组合组，灌胃给药，在30min、45min、60min、75min、1.5h、4.5h、6h、7.5h、9h、54h、72h時间点各取样6个，处理后高效液相检测浓度。结果蒙脱石不改变泥鳅体内肝脏的盐酸左氧氟沙星达峰时间，但是改变了药峰浓度。结论蒙脱石盐酸左氧氟沙星的吸附作用，增大了泥鳅肝脏体内的药峰浓度。

关键词：泥鳅;肝脏;盐酸左氧氟沙星;蒙脱石

泥鳅是一种肉质较为鲜美、口感细嫩小型鱼类，具有杂食的特点【1】，营养价值较高。盐酸左氧氟沙星为氧氟沙星的左旋体，属于三代喹诺酮抗菌药物，比氧氟沙星高一倍左右的抗菌活性【2】，在肝脏部位的代谢率低，血药浓度较高【3】，不良反应少【4】，抗菌活力强【5-6】，通常用于敏感菌引起的系统感染，包括枸橼酸杆菌、大肠埃希菌、沙门菌属等活性较强的革兰氏阴性菌。常用于鱼类的烂鳃病、肠炎、烂尾症等疾病防治。蒙脱石是一种特殊的火山岩在碱性环境下变成的硅铝酸盐粘土矿石【7】，对致病菌有很强的吸附、固定、灭活以及排出的能力【8】对消化道的粘膜可以起到覆盖作用，临床上可用于治疗腹泻和其他一些胃肠道疾病。蒙脱石具有吸附性能【9】和凝胶特性，因而常常与喹诺酮类药物共用【10】。

一、材料与方法

（一）实验动物

泥鳅其质量为30±3克，购于湖州养殖场，太阳暴晒的水中养殖十日。

（二）试剂和仪器

盐酸左氧氟沙星原料药，湖北鑫润德化工有限公司生产，蒙脱石，湖北金细蒙脱石科技有限公司生产，高效液相色谱分析仪LC-20AT，岛津公司生产。

（三）给药剂量与分组

按照每克泥鳅活重计，高、中、低剂量盐酸左氧氟沙星分别为0.0025mg、0.0075mg、0.0225mg，蒙脱石高、中、低剂量分别为0.005mg、0.015mg、0.045mg。

实验共设7组：高、中、低盐酸左氧氟沙星组，中剂量盐酸左氧氟沙星+高、中、低蒙脱石组，空白组。

（四）取样与样品处理

灌胃给药后，根据预实验，分别在15min、30min、45min、60min、75min、3h、6h、9h、12h、16h、24h、48h、60h、72h时间点取样，每组取样6条，处死后取肝脏，称重后离心管内零下10℃保存。

取出保存的肝脏样品，置于室温下自然解冻，加入1mL超纯水和3mL丙酮，漩涡振荡仪振荡3分钟，4℃，10000r/min离心8分钟;上清液转移到新的10mL离心管中，加入1mL0.040g/mL的NaC，100μL氨水和3mL二氯甲烷，漩涡振荡1分钟，4℃，6000r/min离心6分钟;有机相转移到新的离心管，剩余液体再加入3mL二氯甲烷，漩涡振荡1分钟，4℃，6000r/min离心6分钟，取有机相，合并2次的有机相，恒温干燥;加入1mL10%乙腈和3mL正己烷，漩涡振荡2分钟，4℃，6000r/min离心6分钟，弃有机相，重复一次此步骤;流动相定容至2ml。

色谱条件：C18柱，柱温32℃，0.8mL/min流速，流动相：10%乙腈与0.04mol/L柠檬酸（pH4.0）等体积混合，进样量20μL。

二、结果与讨论

（一）标准曲线

将段盐酸左氧氟沙星的实测浓度设为横坐标，将所得峰面积设为纵坐标，回归后的方程为y=361.09x+366，R2=0.9988.

（二）精密度

上午高、中、低浓度的相对标准偏差分别为17.54%、14.08%、13.35%，下午分别为17.39%、13.25%、16.28%;日间高、中、低浓度的相对标准偏差分别为16.37%、13.77%、13.05%。

（三）回收率

5mg/L、10mg/L、20mg/L浓度的回收率分别为：108.07%、96.08%、98.26%。

（四）无蒙脱石的药物残留规律

不同时间点，高、中、低浓度的盐酸左氧氟沙星在肝脏中残留变化见图1，由图可知，肝脏中药物在4.5h可以达到峰值。从30min至4.5h阶段肝脏中的药物浓度随时间的增加而上升，随着时间的推移泥鳅肝脏中的盐酸左氧氟沙星药物浓度逐渐降低，并最终趋向于0。

图1 盐酸左氧氟沙星在肝脏中残留变化图

（五）蒙脱石对药物残的影响

不同浓度蒙脱石条件下，肝脏中盐酸左氧氟沙星达峰时间仍然在4.5h左右，但是药峰浓度明显增高，增高量与蒙脱石浓度呈正相关。

蒙脱石是一种含水铝硅酸盐构成的矿物，颗粒细小，粒径约在0.2～1微米之间，有胶体分散特征，对喹诺酮类药物包括盐酸左旋氧氟沙星在内的一系列药物具有很好的吸附作用。本实验中在加入蒙脱石后，泥鳅肝脏中的药物峰值高于不加蒙脱石，特别是高浓度和中浓度的蒙脱石，明显增加了药峰浓度，这也验证了蒙脱石对盐酸左旋氧氟沙星的吸附作用，促进了肝脏中药物浓度的增高。

参考文献：

[1]侬科.泥鳅养殖技术汇总[N].东方城乡报，2019（7）：1-2.

[2]刘一曦.盐酸左氧氟沙星替代标准三联中的阿莫西林或克拉霉素治疗幽门螺旋杆菌感染的疗效比较分析[J].中外医疗，2019（21）：115-117.

[3]王秋华.眼镜蛇肌肉注射盐酸左氧氟沙星血药浓度变化规律的初步研究[J].兽医杂志，2016（11）：110-112.

[4]刘燕.抗菌药物致3例不良反应的分析[R].苏州大学附属张家港医院药学论文，2019，9（2）：146-148.

作者简介：

姚俊涛（1998—），男，汉族，浙江杭州人，学历：本科，从事药学研究;

李财进（1998—），男，汉族，安徽安庆人，学历：本科，从事药学研究;

姜萱（1999—），女，汉族，内蒙古赤峰人，学历：本科，从事药学研究;

梅富琪（2000—），男，汉族，浙江温州人，学历：本科，从事药学研究;

钱坤（1969—），男，汉族，安徽省铜陵人，湖州师范学院，药学博士，副教授，从事生物技术药物研究。