慢性阻塞性肺疾病合并肺动脉高压患者血清miR-130a、miR-204水平及其临床意义探讨

李伟坚 林常青 陈中红

慢阻肺中较为常见的并发症为肺动脉高压(PH)，这会对患者的预后与生活质量造成严重的影响，且会提高患者住院风险，延长住院时间[1]。以往临床上认为慢阻肺患者由于缺氧而出现肺动脉重塑与肺动脉痉挛是最终引发肺动脉高压的原因。近年临床上认为慢阻肺患者发生肺动脉高压的原因不仅与缺氧有关，还与其他原因有关。近年临床上开始对患者慢性肺部炎性反应在肺动脉高压发生、发展过程中的重要作用进行了研究[2]。慢阻肺属于慢性呼吸道炎性疾病，它的发生、发展均与氧化应激反应、蛋白酶失衡、炎性反应有关[3]。当慢阻肺患者发生肺动脉高压后会导致心力衰竭、肺心病等的发生。在患者发生肺动脉高压期间，血清miR-130a、miR-204水平会发生明显的异常，说明在慢阻肺合并肺动脉高压发生中，血清miR-130a、miR-204发挥着一定的作用。我们在慢阻肺合并肺动脉高压患者血清miR-130a、miR-204水平及其临床意义研究中，认为血清miR-130a、miR-204水平与肺动脉高压的发生存在紧密的联系，通过对miR-130a、miR-204水平进行检测，可为临床治疗提供一定的依据，现报道如下。

资料与方法

一、一般资料

选取2016年9月-2018年9月我院收治的慢阻肺合并肺动脉高压患者210例作为研究组，同期选取单纯慢阻肺患者210例作为对照组。

对照组210例，男125，女85例，年龄58～76岁，平均年龄(64.5±3.4)岁；病程4～18年，平均病程(15.5±2.2)年；平均肺动脉压(28.6±3.2)mmHg；研究组210例，年龄60～77岁，平均年龄(65.7±3.8)岁；病程3～19年，平均病程(16.3±2.5)年；平均肺动脉压(50.3±4.3)mmHg；患者资料有可比性(P>0.05)，研究得到了我院伦理委员会处批准。

二、纳入排除标准

1 纳入标准：

(1)所有患者均符合慢阻肺合并肺动脉高压诊断标准；(2)无其他呼吸系统疾病的患者；(3)肺动脉高压：肺动脉收缩压≥40mmHg；(4)无免疫性疾病的患者；(5)选取的患者均为急性加重期患者；(6)均知晓同意此次研究。

2 排除标准：

(1)存在肝肾功能异常的患者；(2)存在内分泌紊乱的患者；(3)近期存在手术史的患者；(4)存在恶性肿瘤的患者；(5)心室功能异常的患者；(6)存在呼吸系统疾病的患者。

三、治疗方法

生化指标检查：所有患者均在入院后的第二天清晨空腹抽取静脉血5mL，将其装入到抗凝管中放置到-70℃条件下保存。同时抽取患者的外周静脉血送到检验处，检验仪器(全自动生化分析仪)由日本奥林巴斯公司提供，生化指标均正常[4]。

血清miR-130a(血清中微小RNA-130a)、miR-204(血清中微小RNA-204)水平检测：应用rizol一步法对血液样本中的总RNA进行检测。逆转录反应：应用Taqman@MicroRNAAssay、Taqman0Micro RNA Reverse Transerio-tionKit试剂盒中的特异性茎一环状反转录引物进行逆转录。在进行此操作时严格按照说明书进行，反应体系：15μl，条件：85℃5min、42℃30min、16℃30min[5]。同时应用PCR引物探针混合液(Taqman8MicroR-NAAssays试剂盒)进行荧光与扩增检测。通过荧光定量PCR仪反应，在进行此操作时严格按照说明书进行。反应体系：20μl，条件：60℃1min、95℃15s、95℃10min，前两个步骤共40个循环。为了消除误差，每个反应均进行3次[6]。

血清标志物检测：所有患者均在入院后的第二天清晨空腹抽取静脉血5mL，离心分取上清液，后应用免疫比浊法对CRP(超敏C反应蛋白)水平进行检测(试剂盒由美国宝洁公司提供)，同时对患者的VEGF(血管内皮生长因子)、ET-1(内皮素)水平进行检测[7]。另外采集患者空腹外周血4mL，离心分取血浆，后应用化学发光微粒子免疫检测法对NT-proBNP(N末端B型钠尿肽原)水平进行检测。

四、观察指标

比较两组患者肺功能。应用肺功能检测仪器对患者的肺功能进行检测，指标主要包括用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼吸量(FEV1)[8]。

比较两组患者VEGF(血管生长因子)、NT-proNBP(N末端B型钠尿肽原)、ET-1(内皮素)、CRP(超敏C反应蛋白)血清标志物水平[9]。

比较两组患者血清miR-130a、miR-204水平。

分析血清miR-130a(血清中微小RNA-130a)、miR-204(血清中微小RNA-204)水平与慢阻肺合并肺动脉高压相关性[10]。

比较两组患者血气指标变化情况。

使用血气分析仪对两组患者血气指标进行检测，指标主要有血氧饱和度(SPO2)、血氧分压(PaO2)、二氧化碳分压(PaCO2)、pH等。PaO2正常值：60～90mmHg，PaCO2正常值：35～45mmHg，pH正常值：7.35～7.45。SPO2动脉血:约98%、静脉血:约75%。

五、统计学方法

结 果

一、两组肺功能对比

研究组FEV1低于对照组(P=0.003)，研究组FEV1%低于对照组(P=0.014)，研究组FEV1%/FVC低于对照组(P=0.045)(见表1)。

表1 肺功能对比

二、两组VEGF、NT-proNBP、ET-1、CRP血清标志物水平对比

研究组VEGF高于对照组(P=0.011)，研究组NT-proNBP高于对照组(P=0.047)，研究组ET-1高于对照组(P=0.040)，研究组CRP高于对照组(P=0.002)(见表2)。

表2 VEGF、NT-proNBP、ET-1、CRP血清标志物水平对比

三、两组血清miR-130a、miR-204水平对比

研究组血清miR-130a水平高于对照组(P=0.008)；研究组miR-204水平低于对照组(P=0.003)(见表3)。

表3 血清miR-130a、miR-204水平对比

四、血清miR-130a、miR-204水平与慢阻肺合并肺动脉高压相关性分析

血清miR-130a水平与肺动脉压水平呈正相关(P=0.017)；miR-204水平与肺动脉压水平呈负相关(P=0.020)(见表4)。

表4 血清miR-130a、miR-204水平与慢阻肺合并肺动脉高压相关性分析

五、血气指标对比

研究组SPO2、PaO2水平低于对照组(P=0.005)；研究组PaCO2水平高于对照组(P=0.012)；研究组pH与对照组相比无明显差别(P=0.127)(见表5)。

表5 血气指标对比

讨 论

慢阻肺是一种慢性呼吸系统疾病，在慢阻肺发生期间，可能会发生肺动脉高压等并发症，它是导致患者逐渐发展为肺心病的关键因素[11]。及时发现并对患者进行治疗，有利于降低慢阻肺合并肺动脉高压的发生。

慢阻肺患者一般存在炎性反应与慢性缺氧症状，缺氧会进一步提高患者发生肺动脉高压的概率[12]。对患者的缺氧症状进行缓解是治疗慢阻肺合并肺动脉高压的重要手段。在慢阻肺合并肺动脉高压的发生发展期间，炎性反应发挥了非常重要的作用[13]。研究显示，研究组VEGF高于对照组(P=0.011)，研究组NT-proNBP高于对照组(P=0.047)，研究组ET-1高于对照组(P=0.040)，研究组CRP高于对照组(P=0.002)，这就说明，对患者的各项标志物水平进行检测，有利于判断患者病情，提出治疗措施。

MiRNA属于内源性单链小分子，一般是由核苷酸构成(21～25个)，它的组织特异性、时序性、保守性较高，主要是通过与特异mRNA进行结合来促进mRNA的降解或者是抑制mRNA翻译，最终有利于对基因表达情况进行调控[14]。临床上发现，在慢阻肺合并肺动脉高压患者中，血清miR-130a、miR-204水平明显异常，miR-130a显著升高，miR-204显著降低。通过给予患者合成miR-204可以降低肺动脉压[15]。这些均说明，血清miR-130a、miR-204水平与慢阻肺合并肺动脉高压的发生存在紧密的联系。研究显示，研究组血清miR-130a水平高于对照组(P=0.008)；研究组miR-204水平低于对照组(P=0.003)，血清miR-130a水平与肺动脉压水平呈正相关(P=0.017)；miR-204水平与肺动脉压水平呈负相关(P=0.020)，这就说明，可以将血清miR-130a、miR-204水平作为判断慢阻肺合并肺动脉高压的临床指标，临床利用价值较高。

研究显示，研究组SPO2、PaO2水平低于对照组(P=0.005)；研究组PaCO2水平高于对照组(P=0.012)；研究组pH与对照组相比无明显差别(P=0.127)，这就说明，慢性阻塞性肺疾病合并肺动脉高压患者各项指标均比单纯的慢性阻塞性肺疾病患者差，慢性阻塞性肺疾病合并肺动脉高压患者的呼吸功能更差，心肌耗氧量明显增加，呼吸肌疲劳感严重，更容易发生呼吸衰竭，肺动脉高压。因此，慢性阻塞性肺疾病合并肺动脉高压患者的血气各指标更差。

综上所述，慢阻肺合并肺动脉高压患者血清miR-130a、miR-204水平及其临床意义研究中，血清miR-130a水平与肺动脉压呈正相关，miR-204水平与肺动脉压呈负相关，通过对慢阻肺合并肺动脉高压患者血清miR-130a、miR-204水平进行检测，有利于判断患者病情，值得在临床上多加推广与应用。