诱导仙茅产生愈伤组织及不定芽的研究

罗春梅，刘爱民

（楚雄技师学院，云南楚雄675000）

仙茅是重要的具有彝族地方特色的药用植物，是国家“十五”科技攻关课题《药材规范化种植技术指导中心建设》中的药材。仙茅为石蒜科多年生草本植物仙茅的根茎，药用历史悠久，历代文献均有记载。目前尚未形成规模种植，主要依靠野生资源，因无序采挖，大量资源濒临枯竭，药材供不应求，价格高 （市场收购价每千克20～25元），市场需求量大。开展仙茅组织培养技术研究，既可以保护仙茅的野生资源量，又可为仙茅的大规模种植提供大量优质种苗，实现仙茅资源的合理开发利用，使其为天然药物产业发挥最大的经济效益。

1 材料与方法

1.1 供试材料

为经过1-2年人工种植的仙茅，来自楚雄州农业学校的药园。培养基为琼脂0.9%，蔗糖3%。灭菌前pH值5.8～6.8，灭菌温度121℃，培养温度（20±2）℃，每天光照时间14 h。

1.2 试验方法

1.2.1 不同激素配比诱导愈伤组织

仙茅叶基部为外植体，经清洗消毒后，分别接种于BA/NAA不同激素配比的培养基上，诱导外植体形成愈伤组织。设BA浓度分别为0.5 mg/L、1.5 mg/L、2.5 mg/L、3.5 mg/L，NAA浓度分别为1.0 mg/L、2.0 mg/L，共8个处理。

培养基均以MS为基本培养基，加活性炭2 mg/L，每个处理接种5瓶，每瓶接种4块，每个处理20块外植体，培养30 d时观察。

1.2.2 不同激素配比诱导愈伤组织分化不定芽

将仙茅的愈伤组织切割成同等大小，分别接种在BA/NAA、KT/IBA4种不同配比的培养基上，诱导愈伤组织分化成不定芽。设BA浓度分别为3.0 mg/L、5.0 mg/L，NAA浓度分别为0.5 mg/L、1.5 mg/L，共2个组合，KT浓度分别为3.0 mg/L、5.0 mg/L，IBA浓度分别为0.5 mg/L、1.5 mg/L，共2个组合。

培养基均以MS为基本培养基，加活性炭2 mg/L，每个处理接种5瓶，每瓶接种4块，每个处理20块外植体，培养30 d时观察。

2 .结果与分析

2.1 BA/NAA不同激素配比诱导愈伤组织形成的影响

由表1知，仙茅的叶基部在BA浓度为1.5～3.5 mg/L，均能诱导出愈伤组织，随着BA和NAA浓度的增加，愈伤组织诱导率也随之升高，出愈时间显著提前。当细胞分裂素BA浓度达3.5 mg/L时，生长素浓度增大对愈伤组织形成有积极作用，以MS+ BA3.5 mg/L+ NAA 2.0 mg/L+活性炭2 mg/L培养基诱导率达80%，出愈量最大。

表1 不同激素配比诱导愈伤组织形成比较（活性炭2 mg/L+MS培养基）

表2 不同激素配比诱导不定芽比较（活性炭2mg/L+MS培养基）

2.2 BA/NAA、KT/IBA不同激素配比形成不定芽的影响

由表2知，BA/NAA、KT/IBA4种激素配比均能使仙茅的愈伤组织分化出不定芽，分化率100%，其中以MS+ BA5 mg/L+ NAA 1.5 mg/L+活性炭2 mg/L的培养基诱导出芽时间最早，苗色浓绿，长势最快。

3 结 论

试验得出，诱导仙茅愈伤组织最佳培养基为MS+ BA3.5 mg/L+ NAA 2.0 mg/L+活性炭2mg/L;不定芽分化最佳培养基为MS+ BA5 mg/L+ NAA 1.5 mg/L +活性炭2 mg/L。

在植物组织培养中，细胞分裂素KT、BA具有促进芽生长的作用，生长素NAA、IBA具有促进根生长的作用，细胞分裂素与生长素的比值高低对外植体的发展方向起着决定性作用。

在本试验中发现，使用BA与KT诱导仙茅叶基部愈伤组织分化不定芽，仙茅对2种细胞分裂素的敏感程度差异不明显，均能100%分化形成不定芽，只是BA更有利于促进叶绿素的合成，苗色更浓绿。