紫杉醇联合卡铂放疗对宫颈癌患者血管生成及侵袭能力的影响

2020-09-02张燕

中外医疗 2020年16期

张燕

[摘要] 目的探討紫杉醇联合卡铂同期放疗对宫颈癌患者血管生成及侵袭能力的影响。方法方便选取2017年1月—2019年1月该院收治的宫颈癌患者82例，按随机数字表法分为研究组（n=41，采取紫杉醇联合卡铂同期放射治疗）和对照组（n=41，单纯采取放射治疗），共治疗3个疗程，观察两组临床疗效，治疗前后取病理组织，经免疫组织化学SP法后，在高倍显微镜下观察两组患者治疗前后的微血管密度（MVD）及微淋巴管密度（LVD）变化，采取Western blot法检测两组宫颈癌细胞株Hela细胞中Rock-1、p-cofilin表达，并开展采取Transwell迁移和侵袭实验，读取OD值，观察两组患者细胞体外侵袭能力的变化。结果研究组有效缓解率60.98%高于对照组39.02%，组间比较差异有统计学意义（χ2=9.644，P<0.05）;研究组治疗后MVD、LVD值分别为（9.83±1.14）个/高倍视野、（2.24±0.29）个/高倍视野，均低于对照组，组间比较差异有统计学意义（t=12.678、23.549，P<0.05）;研究组Rock-1、p-codinlin蛋白表达及OD值均低于对照组，组间比较差异有统计学意义（t=9.545、5.587，P<0.05）。结论对宫颈癌患者采取紫杉醇联合卡铂同期放疗治疗可取得良好效果，抑制肿瘤血管的生成，同时减少细胞侵袭能力。

[关键词] 宫颈癌;紫杉醇;卡铂;血管生成;侵袭能力

[中图分类号] R71 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2020）06（a）-0013-04

Effect of Paclitaxel Combined with Carboplatin on Angiogenesis and Invasive Ability in Patients with Cervical Cancer

ZHANG Yan

Department of Gynecology， Hedong District People's Hospital， Linyi， Shandong Province， 276000 China

[Abstract] Objective To investigate the effect of concurrent radiotherapy with paclitaxel and carboplatin on angiogenesis and invasive ability in patients with cervical cancer. Methods Eighty-two patients with cervical cancer treated in our hospital from January 2017 to January 2019 were convenient randomly divided into a study group（n=41， paclitaxel combined with carboplatin concurrent radiation therapy） and a control group （n=41， taking radiotherapy alone）， a total of 3 courses of treatment， to observe the clinical efficacy of the two groups， pathological tissues were taken before and after treatment， and after treatment with immunohistochemical SP method， the microvessel density before and after treatment was observed under high power microscope （MVD） and microlymphatic vessel density （LVD） changes. Western blot was used to detect the expression of Rock-1 and p-cofilin in two groups of cervical cancer cell lines Hela cells. Transwell migration and invasion experiments were performed to read the OD value and observe changes of invasion ability of cells in two groups of patients in vitro. Results The effective response rate of the study group was 60.98% higher than that of the control group 39.02%. There was a statistical difference between the groups （χ2=9.644， P<0.05）. The MVD and LVD values of the observation group after treatment were （9.83±1.14）/high visual fields，（2.24±0.29）/high magnification fields were lower than those in the control group. There was a statistical signifant difference between the groups （t=12.678， 23.549， P<0.05）; Rock-1， p-codinlin protein expression and OD values in the study group were lower than those in the control group， and there were statistical differences between the groups （t=9.545， 5.587， P<0.05）. Conclusion Concurrent radiotherapy of paclitaxel combined with carboplatin for cervical cancer patients can achieve good results， inhibit tumor angiogenesis， and reduce cell invasion.

[Key words] Cervical cancer; Paclitaxel; Carboplatin; Angiogenesis; Invasive capacity

宫颈癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤，发病率较高，仅次于乳腺癌。近年来，随着宫颈癌筛查的普及，宫颈癌诊断率明显提高[1]。临床治疗宫颈癌的方法有手术、放疗、化疗，参照美国国立综合癌症网络（National Comprehensive Cancer Network，NCCN）宫颈癌诊治指南，对中晚期宫颈癌患者而言，肿瘤组织较大，单纯采取手术治疗易复发或发生转移，推荐采取根治性同步放化疗治疗手段[2]。紫杉醇、卡铂是临床常用的化疗药物，具有杀伤肿瘤细胞的作用。为探讨紫杉醇联合卡铂同期放疗对宫颈癌患者血管生成及侵袭能力的影响，该文方便选取2017年1月—2019年1月该院收治的82例宫颈癌患者进行分析，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

方便选取上述时期该院收治的82例宫颈癌患者，纳入标准[3]：经病理组织学检查确诊，经CT或MRI检查未发现淋巴结转移;按国际妇产科联盟（FIGO）分期IIb～IIIb期;经心电图、尿常规、肝肾功能检查未见异常。排除标准：既往有盆腔手术史;合并糖尿病、高血压、冠心病等基础疾病者;认知功能障碍者;妊娠妇女。按随机数字表法分为两组，对照组41例，年龄35～68岁，平均（45.32±2.45）岁;肿瘤直径4～10 cm，平均（5.48±1.23）cm;按FIGO分期：IIb期15例，IIIa期17例，IIIb期9例;病理分型：宫颈癌鳞癌27例，腺癌9例，鳞腺癌5例。研究组41例，年龄36～68岁，平均（45.46±2.51）岁;肿瘤直径5～10 cm，平均（5.52±1.27）cm;按FIGO分期：IIb期17例，IIIa期16例，IIIb期8例;病理分型：宫颈癌鳞癌25例，腺癌10例，鳞腺癌6例。两组年龄、肿瘤直径、FIGO分期及病理分型比较差异无统计学意义（P>0.05）。所选患者及其家属均签署知情同意书，且经医院伦理学委员会批准。

1.2 方法

对照组：采用6MV-X直线加速器，对盆腔前后野进行照射，每周放疗5次，每次剂量为2.0 Gy，总剂量为50 Gy;后程给予盆腔中心40 mm×10 mm铅挡，继而补充腔内后装治疗，每周1次，治疗3周为1个疗程，共治疗3～4个疗程。

研究组：治疗第1天，静脉滴注紫杉醇（国药准字H20063787）135 mg/m2，静脉滴注卡铂（国药准字H20020181），该药物用药剂量按AUC=5静滴进行计算，用药3周/次，治疗3周为1个疗程，共治疗3～4个疗程，静脉滴注紫杉醇药物6 h、12 h前，均静脉注射地塞米松（国药准字H35021170）10 mg，同时化疗前给予止吐处理。化疗后第5天，开始给予放射治疗，其方法同对照组。

1.3 观察指标

①观察两组临床疗效，参WHO的相关标准，完全缓解：病灶完全消失;部分缓解：病灶缩小>50%;稳定：病灶缩小25%～50%，未见新病灶;进展：病灶缩小<25%，且出现新病灶，有效缓解率=（完全缓解+部分缓解）/总例数×100.00%。②治疗前后取病理组织，经石蜡处理后，连续切片，经免疫组织化学SP法后，在高倍显微镜下观察患者微血管密度（Microvascular dengsity，MVD）及微淋巴管密度（Lymphatic vesed density，LVD）变化。③采取Transwell迁移和侵袭实验检测宫颈癌患者细胞体外侵袭能力的变化，取宫颈癌细胞株Hela，将其置于含有10%胎牛血清的RPMI 1640培养基中进行培养，细胞常规传代贴壁后，在培养基中加入紫杉醇、卡铂药物，作用1 h后取细胞。提取细胞及宫颈组织总RNA，经逆转录酶链反应（PCR反应条件为94℃，30 s;54℃，40 s;72℃，60 s），随后采取Western blot法测定Rock-1、p-codinlin蛋白表达。开展Transwell迁移和侵袭实验，将ECMatric胶平铺于小室底部，取出小室，将无血清RPMI 1640培养基置于上室内，在37℃条件下放置2 h，水化ECM膜后，移除培养基。将含有10%胎牛血清的RPMI 1640培养基填充室的下室每孔，上室孔加入细胞浓度为1×106个/mL的细胞悬液，培养24 h后，取出上室，膜上层胶用棉签擦拭。将小室置于500 μL染液中处理20 min，使底膜上侵袭的细胞染色，随后用水漂洗3～4次，空气中干燥。染色的细胞用10%乙酸溶解，随后转移至96孔板，在560 nm处读取OD值。

1.4 统计方法

数据SPSS 19.0统计学软件中完成处理，计数资料以[n（%）]表示，采用χ2检验;计量资料用（x±s）表示，采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 临床疗效

研究组有效缓解率比对照组升高，组间比较差异有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.2 治疗前后血管生成情况

两组治疗后MVD、LVD值较治疗前均有所下降，但观察组MVD、LVD值较对照组下降更为明显，差异有統计学意义（P<0.05）;两组治疗前MVD、LVD值比较差异无统计学意义（P>0.05），见表2。

注：与治疗前相比，*P<0.05

2.3 侵袭能力

研究组Rock-1、p-codinlin蛋白表达均低于对照组，组间比较差异有统计学意义（P<0.05）;对照组OD值为（4.64±0.15），研究组OD值为（3.01±0.09），组间比较差异有统计学意义（t=54.333，P=0.000），见表3、图1。

3 讨论

紫杉醇是一种新型抗肿瘤药物，其作用机制是通过可逆性结合肿瘤细胞微管，促进微管聚合，抑制DNA有丝分裂，使肿瘤细胞的功能发生障碍，可诱导肿瘤细胞凋亡[4-5]。卡铂作为细胞周期非特异性的铂类化合物，通过诱导DNA链间与链内交联，扰乱细胞内DNA分子，并干扰DNA合成，可起到杀灭肿瘤细胞的作用。卡铂的生化物与顺铂基本相似，但其所产生的毒副反应明显低于顺铂，其是目前临床治疗宫颈癌的主要化疗药物，与紫杉醇化疗药物联合应用，可明显增强其抗肿瘤作用[6-7]。目前，临床主张同步放化疗治疗宫颈癌，其作用机制是通过化疗药物，改善肿瘤细胞的乏氧状态，同时让放化疗的敏感期与肿瘤细胞同步，不仅可起到放疗增敏作用，也可缓解病灶进展。汤艳祥等[8]研究报道，中晚期宫颈癌患者采取放疗联合紫杉醇、卡铂同步化疗可取得良好效果，有效缓解率高达60%以上，且耐受性好。该研究显示，研究组治疗有效缓解率60.98%高于对照组39.02%，这与宋丹等[9]报道结果相似。由此可见，在宫颈癌治疗中，采取紫杉醇联合卡铂同步放疗治疗手段，可取得一定效果，能控制患者病情进展。

近年，MVD、LVD在宫颈癌化疗中的作用已成为临床研究的热点。有研究报道[10]，肿瘤的发生、发展以及术后病灶转移与血管生成密切相关，且在宫颈癌发病过程中均伴有肿瘤血管的生成。因此，MVD常被作为评价肿瘤血管生成的关键指标。有研究报道[11-12]，LVD与肿瘤临床分期密切相关，同时在癌旁组织中该指标明显升高。故LVD可作为反映宫颈癌病情进展的一个独立预后指标。该研究显示，两组治疗后MVD、LVD值均有所下降，但研究组MVD、LVD值的下降幅度更为明显（P<0.05）。这进一步证实，紫杉醇联合卡铂同步化疗可控制患者病情进展，抑制肿瘤血管的生成。针对恶性肿瘤细胞的侵袭和转移，其主要是通过改变细胞骨架来影响肿瘤细胞的运动。有研究报道[13-14]，Rock-1蛋白活性的提高，可改变细胞骨架，进而影响细胞运动。其中Cofilin蛋白是一种肌动蛋白结合蛋白，主要存在于真核细胞中，其活性主要依赖于Ser-3位点的磷酸化，从而参与调解肌动蛋白骨架的重组，进而影响细胞运动。该研究显示，研究组Rock-1、p-cofilin蛋白表达均低于对照组，且OD值下降，这与张立等[15]报道结果相似。由此可见，通过药物抑制Rock-1的作用及p-cofilin蛋白活性，可减少细胞侵袭能力。

综上所述，宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤，发病率较高，早诊断、早发现、早治疗，对控制患者病情进展有着非常重要的意义。而紫杉醇联合卡铂同步放疗是现阶段临床治疗宫颈癌的主要手段，通过杀伤肿瘤细胞，抑制肿瘤生长、转移，不仅可减少肿瘤血管的生成，同时可降低细胞侵袭能力，具有良好的应用效果。

[参考文献]

[1] 王兰.新辅助化疗治疗宫颈癌的疗效评价[J].实用药物与临床，2016，19（8）：952-955.

[2] 王静，罗小琼，陈升才.紫杉醇联合奈达铂动脉介入栓塞治疗宫颈鳞癌的疗效及其对微血管和微淋巴管密度的影响[J].实用药物与临床，2016，19（3）：287-291.

[3] 陈艳辉.紫杉醇联合卡铂化疗并同步放疗治疗中晚期宫颈癌近期及远期疗效[J].中国现代医生，2015，53（4）：52-54.

[4] 王骁，徐晓婷，李莉，等.不同放化疗方案治疗宫颈癌患者的临床疗效[J].肿瘤，2015，35（6）：653-659.

[5] 赵静，张晓彤，胡克，等.紫杉醇联合卡铂三周方案同步胸部放疗治疗不宜手术的局部晚期非小细胞肺癌疗效和安全性研究：一项来自单中心的回顾性研究[J].中国肺癌杂志，2016，19（11）：731-737.

[6] 陆英华，吴亦波. TC化疗联合放疗治疗术后高危子宫内膜癌的疗效观察[J].现代药物与临床，2014，29（11）：1253-1256.

[7] 袁秀英，刘燕燕，刘小媚，等.紫杉醇、卡铂化疗联合放疗在中晚期宫颈癌患者中的效果[J]. 广东医学，2017，38（1）：242-243.

[8] 汤艳祥，陈亦乐，唐洁，等.放疗联合紫杉醇、卡铂同步化疗治疗中晚期宫颈癌的临床疗效[J]. 热带医学杂志， 2015，15（10）：1359-1361.

[9] 宋丹，孔为民.紫杉醇联合卡铂治疗晚期及复发性宫颈癌的可行性研究[J].实用癌症杂志， 2016， 31（3）：421-424.

[10] 李雪，孔为民，韩超，等.Ⅰb2和Ⅱa2期子宫颈癌患者以手术为主的不同治疗方案的前瞻性随机对照研究[J].中华妇产科杂志，2016，51（7）：524-529.