ER、HER-2 在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

任艳鑫，廖曼各，杨 洁，王晓莉，李晓江

（1） 昆明医科大学第三附属医院头颈外一科；2） 放疗中心，云南昆明 650118）

甲状腺癌是最常见的内分泌恶性肿瘤，发病率在全世界逐年上升。甲状腺乳头状癌（papillary thyroid cancer，PTC） 是最常见的类型，约占总体的80%～85%，甲状腺癌在青春期前的男孩和女孩的发病率无差异，但是青春期女性发病率是男性的14 倍。绝经后，女性甲状腺癌患病率逐渐下降，因此，甲状腺癌也被称为激素依耐性肿瘤[1]。

雌激素受体（estrogen receptor，ER） 和人表皮生长因子受体2（human epidermalgrowth factor receptor-2，HER-2） 作为乳腺癌的肿瘤标记物，可指导乳腺癌的治疗方式以及预后。研究发现ER和HER-2 同样会促进甲状腺恶性肿瘤的发生、发展。本文章初步探讨ER 和HER-2 在甲状腺乳头状癌中的表达，为进一步研究其机制奠定基础。

1 资料与方法

1.1 病例资料

选取2010 年1 月至2010 年6 月昆明医科大学第三附属医院甲状腺乳头状癌和甲状腺良性肿瘤患者。所有患者由同一组医生进行手术治疗，手术切除标本由两位有经验的病理科医生确诊，同时排除其他恶性肿瘤。收集病例中甲状腺乳头状癌76 例，男10 例，女性66 例；年龄16～75岁，平均43.5 岁，按2017 年AJCC 联合提出的分化型甲状腺癌TNM分期法进行临床分期：Ⅰ期38例，Ⅱ期18 例，Ⅲ期19 例，Ⅳ期1 例，有淋巴结转移的25 例，无淋巴结转移的51 例。甲状腺良性肿瘤19 例，男5 例，女14 例；年龄20～63岁，平均40.7 岁，其中甲状腺腺瘤8 例，结节性甲状腺肿10 例，甲状腺囊肿1 例。

1.2 免疫组化检测组织中ER、HER-2 的表达

石蜡切片脱蜡，微波炉抗原修复，3%H2O2-甲醛浸泡10 min 后加入10%山羊血清置室温20 min。分别加入一抗（ER、HER-2 兔抗人单抗，福州迈新生物技术开发有限公司），工作浓度1：100，4℃过夜。滴加二抗（ER、HER-2 鼠抗兔单抗，福州迈新生物技术开发有限公司），室温孵育15 min，PBS 冲洗后加HRP 标记链霉卵白素工作液，37℃孵育10 min。DAB 显色剂显色，苏木素复染，中性树胶封固。所有切片均有两位经验丰富的病理医师盲法阅片。

1.3 统计学处理

采用SPSS11.5 软件包分析，计数资料采用卡方检验或Fisher 确切概率法，甲状腺乳头状癌局部复发、转移差异用Kaplan-Meier 分析，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 ER、HER-2 在甲状腺乳头状癌组织中高表达

ER 在甲状腺乳头状癌组织中主要表达于细胞核，少量在细胞膜和细胞浆（图1）；HER-2 在甲状腺乳头状癌组织中主要表达于细胞膜，少量在细胞浆，色棕黄，呈灶状或弥漫状分布（图2）。ER 在甲状腺乳头状癌阳性表达率为65.8%，在良性肿瘤中阳性表达率为5.3%，差异具有统计学意义（P＜0.05）。HER-2 在甲状腺乳头状癌阳性表达率为93.4%，在良性肿瘤中阳性表达率为10.5%，差异具有统计学意义（P＜0.05），见表1。

图1 甲状腺组织的ER 表达情况Fig.1 ER expression in thyroid tissue

表1 各组ER、HER-2 的表达率［n（%）］Tab.1 The positive rate of ER and HER-2in each group［n（%）］

2.2 甲状腺乳头状癌组织中ER、HER-2 与临床因素的关系

甲状腺乳头状癌中ER 表达与肿瘤侵犯周围组织相关，与年龄、性别、肿块大小、是否为多灶、淋巴结转移及分期无关（P＞0.05）。HER-2 表达与淋巴结转移相关（P＜0.05），与年龄、性别、肿块大小、包膜侵犯、是否为多灶及分期无关（P＞0.05），见表2、表3。

表2 甲状腺乳头状癌ER 表达率与临床特征的相关性Tab.2 Correlation between ER expression and clinical features in papillary thyroid carcinoma

表3 甲状腺乳头状癌HER-2 表达率与临床特征的相关性Tab.3 Correlation between HER-2 expression and clinical features in papillary thyroid carcinoma

2.3 ER、HER-2 表达与甲状腺乳头状癌局部复发、转移的关系

所有甲状腺癌患者按照指南进行手术治疗后接受规范内分泌治疗，部分患者按照指南接受I131治疗，定期随访。发现ER 阳性表达的甲状腺乳头状癌患者5 a 局部复发、转移率远高于ER 阴性表达患者（15.0% vs 2.1%，P＜0.05）。HER-2 阳性表达的甲状腺乳头状癌患者5 a 局部复发、转移率也高于HER-2 阴性表达患者（13.5%vs 3.2%，P＜0.05），见图3。

图3 甲状腺乳头状癌单因素Kaplan-Meier 分析Fig.3 The cumulative local recurrence and metastasis rates of papillary

3 讨论

ER 属于类固醇激素受体家族，雌激素通过与ER 结合调节生殖系统的生长与分化，同时也影响肝、骨、脑及心血管、内分泌等系统的生理功能。同时，雌激素与ER 相互作用促进靶器官肿瘤的发生、发展。谢辛慈等[3]发现ER 在多种实体肿瘤中存在过表达，多项研究发现胃癌患者ER 表达高于正常胃组织，并且ER 表达与肿瘤分化程度相关，ER 是胃癌负性预后指标[4]，Magri F 等[5]发现甲状腺癌组织中ER 的表达率显著高于正常甲状腺组织。Chen D 等[6]采用免疫组化检测甲状腺乳头状癌患者ERα 的表达，发现ERα 的高表达与肿瘤大小相关，作者认为ERα 可作为是甲状腺乳头状癌的预后指标。Liu J 等[7]发现甲状腺癌组织ER 高表达，而且与肿瘤分化程度相关，而与患者性别、年龄、淋巴结转移和肿瘤大小无相关性。Ahmed RA[8]发现甲状腺乳头状癌ERα 表达与淋巴结转移、临床分期、腺体外侵犯、是否多灶以及复发相关，并且肿瘤大小、腺体外侵犯及ER 表达是甲状腺乳头状癌无进展生存的独立预后因素。目前认为，ER 可以激活下游靶基因：血管内皮生长因子（vessel endothelial growth factor，VEGF）、E-钙黏蛋白、波形蛋白、基质金属蛋白酶-9、CyclinD-1、NF-κB 等，进而促进肿瘤发生、发展及转移[9]。本研究发现甲状腺乳头状癌高表达ER 与肿瘤侵犯相关，间接说明ER 可能通过信号通路促进肿瘤组织的生长。

HER-2 是人表皮生长因子受体家族的一员，HER-2 可以形成同源或者异源二聚体，磷酸化酪氨酸激酶激活下游信号通路（包括MAPK、Akt 和JNK） 调节肿瘤的增殖、分化和抗凋亡，HER-2可作为恶性肿瘤的预后指标[10-11]。目前研究发现大约有20%的乳腺癌存在HER-2 的过表达，这提示患者容易出现淋巴结和远处器官转移[12]。胃癌中HER-2 过表达预示患者预后不佳，HER-2 表达与患者的性别、肿瘤大小、肿瘤分期、有无远处转移及分型、分级相关[13]。Sugishita Y 等[14]研究发现HER-2 高表达的甲状腺癌更易出现转移，预示不良预后，与本次研究结果一致。HER-2 的过度表达与甲状腺癌患者端粒长度的缩短以及基因RET/PTC1-3、ETV6-NTRK3、AGK-BRAF 和BRAFV600E 突变相关，HER-2 的过度扩增代表肿瘤侵袭性增加[15-16]。

甲状腺乳头状癌作为一种内分泌恶性肿瘤，ER 和HER-2 的高表达均与甲状腺癌的不良预后相关，两者之间可能存在相互作用信号通路，尚需进一步研究揭示其中机制，为甲状腺乳头状癌的治疗提供新的方法。