彝族药物朵基诺(铁扫把)抗烟碱急性毒性作用研究

赵有亮，李蓉

(楚雄医药高等专科学校，云南 楚雄 675000)

朵基诺为彝族药物名称，其汉译意为“马蜂叮的药”，为楚雄地区民间广泛使用的一种民族药物，汉药名为：铁扫把，又叫“大夜关门”“地肤”，为蝶形花科胡枝子属(LespedezacuneataG.Don)植物，以根和全株入药，夏秋季采收[1]。近年来，研究者们对本药在止咳、化痰、平喘作用及对子宫平滑肌的影响、胃肠活动影响、免疫系统影响、体外抗菌作用方面进行了一定的研究，提出了一些药用价值。除了以上药用价值外，楚雄地区彝族居民长期以来用水煎煮后内服用于食物药物中毒的解救。现通过动物实验研究，进一步确定药物有效性，为民族药物资源开发提供一定理论基础。

1 材料

1.1 药材 从云南省楚雄市区域内采集，经生药学鉴定为彝族药物朵基诺，汉药名为铁扫把的全草(包括根、径、叶)，晾干，阴凉处保存。

1.2 动物 普通级昆明种小鼠200只，雌雄不限，6～7周龄，体重(19.7±2.2)g，昆明医科大学实验动物学部提供，许可证号：SCXK(滇)K2015-0002。饲养于楚雄医药高等专科学校实验动物室，室温(23±1)℃，自由饮水摄食。

2 方法

2.1 供试品的制备 取备好的朵基诺干燥药材，切成小段，称取200 g，加纯化水适量浸泡30 min，加热煎煮两次，第一次30 min，第二次20 min，过滤，合并两次滤液，浓缩至400 mL(每毫升药液相当于原药材0.5 g)。

2.2 烟碱液的制备 自制吸烟装置，准备某烟草企业生产的香烟2盒(烟碱含量：1.0 mg，焦油含量：10 mg)，点燃香烟抽取烟雾，将烟雾通入生理盐水溶液让其充分溶解(每3只香烟烟雾通入10 mL生理盐水液)，得到烟碱溶液，以供实验造模使用。

2.3 实验方法

2.3.1 常规剂量下朵基诺药液的解毒效果研究 随机选取小鼠80只，分为两组，每组40只。

①甲组(对照组)：以0.2 mL·(10 g)-1的剂量灌服生理盐水，30 min后以0.2 mL·(10 g)-1剂量腹腔注射烟碱溶液，观察小鼠的活动及存活情况。

②乙组(实验组)：以0.2 mL·(10 g)-1的剂量灌服朵基诺药液，30 min后以0.2 mL·(10 g)-1剂量腹腔注射烟碱溶液，观察小鼠的反应和生存情况。

2.3.2 不同剂量朵基诺的解毒效果研究随机选取小鼠60只，分为3组，每组20只。

①甲组(高剂量组)：将朵基诺供试药液浓缩至原体积一半后，以0.2 mL·(10 g)-1的剂量对小鼠灌服给药，30 min后以0.2 mL·(10 g)-1剂量腹腔注射烟碱溶液，观察小鼠的反应和生存情况。

②乙组(中剂量组)：以0.2 mL·(10 g)-1的剂量灌服朵基诺供试药液，30 min后以0.2 mL·(10 g)-1剂量腹腔注射烟碱溶液，观察小鼠的反应和生存情况。

③丙组(低剂量组)：将朵基诺供试药液稀释1倍后，以0.2 mL·(10 g)-1的剂量对小鼠灌服给药，30 min后以0.2 mL·(10 g)-1剂量腹腔注射烟碱溶液，观察小鼠的反应和生存情况。

2.3.3 不同剂量烟碱下朵基诺的解毒效果研究将烟碱液浓度分别增加到1.5倍、2倍、2.5倍量，以供实验用。随机选取小鼠60只，分为3组，每组20只。

①甲组(烟碱高剂量一组)：以0.2 mL·(10 g)-1的剂量灌服朵基诺药液，30 min后腹腔注射烟碱液(2.5倍致死量)，观察小鼠的反应和生存情况。

②乙组(烟碱高剂量二组)：以0.2 mL·(10 g)-1的剂量灌朵基诺药液，30 min后腹腔注射烟碱液(2倍致死量)，观察小鼠的反应和生存情况。

③丙组(烟碱高剂量三组)：以0.2 mL·(10 g)-1的剂量灌服朵基诺药液，30 min后腹腔注射烟碱液(1.5倍致死量)，观察小鼠的反应和生存情况。

3 结果

3.1 常规剂量下朵基诺解毒作用 用药后2 min后，甲组动物出现不同程度烦躁、兴奋、抽搐、扭体反应，5 min出现死亡，1 h后34只小鼠死亡，72 h后存活6只；乙组动物出现烦躁、兴奋、抽搐等反应，用药10 h后7只小鼠死亡，33只小鼠存活，之后72 h内未见其他小鼠死亡(见表1)。

表1 常规剂量下朵基诺的解毒情况统计表

实验结果显示，两组动物用药后中毒程度有较大的差别，存活情况有显著性差异(P<0.001)，实验组生存率明显高于阳性对照组。朵基诺水煎液对烟碱液所致急性中毒有一定的对抗作用，可明显缓解中毒症状、提高实验动物的生存率。

3.2 不同剂量朵基诺的解毒作用 用药后2 min后，甲组动物出现轻度烦躁、兴奋、扭体反应，20 min后镇静，未出现死亡情况；乙组动物出现一定程度兴奋、抽搐等反应，用药后10 h有4只小鼠死亡，16只存活，之后72 h内未见其他小鼠死亡；丙组动物出现烦躁、兴奋、抽搐、扭体反应，10 min后9只死亡,4只出现强烈惊厥，11只小鼠存活，之后48 h内未新增小鼠死亡(见表2)。

表2 不同剂量下朵基诺的解毒情况统计表

实验结果显示，3组动物的中毒程度、存活率与剂量呈现一定的依赖关系，高剂量组小鼠的中毒程度较轻，且存活率高；低剂量组的中毒程度重，且存活率降低，提示在临床用药中需确保一定的剂量。

3.3 不同剂量烟碱下朵基诺的解毒作用 用药2 min后，甲、乙、丙3组动物出现明显的烦躁、兴奋、抽搐、扭体反应，10 min出现死亡，30 min后甲乙2组40只小鼠全部死亡。丙组动物14只小鼠死亡，之后48 h内仅有6只存活(见表3)。

表3 不同剂量烟碱条件下朵基诺的解毒情况统计表

实验结果显示，朵基诺缓解烟碱急性中毒过程中，实验动物的存活率与中毒程度成反比关系，甲乙两组动物烟碱的用量过大，中毒程度过深，无解救的机会，实验动物全部死亡；丙组动物中毒程度相对较浅，有30%的动物存活。朵基诺解救急性中毒与用药对象中毒程度有关，中毒程度在一定范围内方可发挥其解毒功效，中毒程度过深药物作用无法发挥。

4 讨论

通过香烟烟雾制备烟碱液所含化学成分复杂，包括尼古丁、焦油、糖醛、酚类、烯类化合物等[2]，可经皮肤、黏膜、消化道等多途径快速吸收，对神经细胞、肺纤维细胞、肝细胞、视网膜细胞等具有广泛的细胞毒作用，可引起急性中毒反应，表现出神经系统、心血管系统、消化系统、呼吸系统复杂的症状，致死机制主要是中枢神经和N胆碱能神经兴奋性改变、呼吸麻痹或呼吸衰竭[3]，也可能与广泛的细胞毒和氧化损伤有关。机体长期接触烟碱可引起细胞DNA、RNA、蛋白质损伤，产生致癌、致畸等特殊毒性[4]，对多个脏器表现出不同程度损害作用。朵基诺抗烟碱急性毒性作用可能与改变中枢神经系统、胆碱能神经兴奋性和儿茶酚胺、内源性前列腺素有关，也可能与稳定细胞膜，减少烟碱的细胞毒性有关，具体作用机理有待于进一步研究。

朵基诺(铁扫把)性甘、微苦、凉，具有清热利湿、消食除积、行气止痛、祛痰止咳等功效[1]，主要含有萜类、皂苷、挥发油等化学成分[5-7]，可用于小儿疳积、消化不良、胃肠炎、细菌性痢疾、胃痛、黄疸型肝炎、糖尿病、肾炎水肿、尿路感染、口腔炎、咳嗽、支气管炎；外用治疗湿疹、皮肤瘙痒、带状疱疹、滴虫病、毒蛇咬伤等[8]。朵基诺(铁扫把)药用价值广，对生长环境要求不高，可进行大面积栽培，具有广阔的发展前景和开发价值，但其解毒机理至今尚未清楚，有待于进一步深入研究。