清热化毒丸薄层色谱的研究

于远洋，周 凌，鄢长余，姜范成，胡景莲

（大连市检验检测认证技术服务中心，辽宁 大连 116021）

清热化毒丸是由连翘；青黛等16味药材组成的复方制剂。收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第二册，具有消火化毒、消肿止痛之功效，临床上可用于治疗小儿身热烦躁，咽喉肿痛等，原质量标准仅有显微鉴别及盐酸小檗碱、靛蓝及靛玉红的TLC定性鉴别，不够全面。基于2015版《中国药典》要求[1]，本实验通过TLC法鉴别黄连、青黛、菊花、玄参，为该制剂质量的全面控制提供依据[2-3]。

1 材 料

薄层扫描仪（CAMAG）；Sartorius LE244S (赛多利斯)电子天平；双频数控超声波清洗器。药材购自亳州市中正中药材饮片有限公司，经大连市药品检验所胡景莲主任中药师鉴定，均为2015版《中国药典》项下规定品种。对照药材及对照品购自中国食品药品检定研究院。试剂为分析纯；水为超纯水。清热化毒丸（某（辽宁）制药有限责任公司；某股份有限公司制药厂；本溪某制药有限责任公司；吉林某制药股份有限责任公司；丸重3g )

2 方法与结果

2.1 TLC定性鉴别：

（1）阴性对照溶液制备根据处方去除药味，按工艺制成相应阴性对照，并按各自供试品溶液制备方法制成相应溶液。

（2）黄连

取本品3 丸，剪碎，加乙醇2 0 m L，超声处理3 0分钟，滤过，作为供试品溶液。取盐酸小檗碱对照品，加乙醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液，另取黄连对照药材0.25 g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2 μL，分别点于同一硅胶G板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨溶液（6：3：1.5：1.5：0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视，结果见图1。

图1 黄连TLC色谱图

（3）青黛

取本品1丸，剪碎，加氯仿10 mL，超声处理30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。取青黛对照药材50 mg，加三氯甲烷5 mL，充分搅拌，滤过，滤液作为对照药材溶液。另取靛蓝与靛玉红对照品加氯仿制成每1 mL各含0.5 mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，分别吸取上述四种溶液各8；10；15；0.3 μL，分别点于同一硅胶G板上，以甲苯-氯仿-丙酮（5：4：1）为展开剂，展开，取出，晾干。置日光灯下检视。结果见图2。

图2 青黛TLC色谱图

（4）菊花

取本品3丸，剪碎，加石油醚（30～60℃）20 mL，超声处理10分钟，弃去石油醚液，药渣挥干，加稀盐酸1 mL与乙酸乙酯50 mL，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。取菊花对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。再取绿原酸对照品，加乙醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各0.5 μL，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(1:15:1:1:2)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，绪果见图3。

图3 菊花TLC色谱图

2.5 取本品3丸

剪碎，加甲醇2 5 m L，浸泡1 小时，超声处理3 0分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水25 mL使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次30 mL，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取玄参对照药材2 g，同法制成对照药材溶液。再取哈巴俄苷对照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述三种溶液各4 μL，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（12:4:1）10℃以下放置的下层溶液为展开剂，置用展开剂预饱和15分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰。结果见图4。

图4 玄参TLC色谱图

3 讨 论

中药质量标准的规范化是现代中药发展的瓶颈之一，我国现行中成药标准中药味鉴别数较少，且含量测定指标较少。清热化毒丸由16味药材组成的复方制剂，原标准中仅对9味药进行鉴别；TLC鉴别中，原标准中仅将黄连、青黛2味药材的部分TLC鉴别作为其质量控制依据，故本实验修订了原标准中黄连、青黛的鉴别方法，新建了玄参、菊花的鉴别方法。