TLR2 与TLR4 在慢性化脓性中耳炎与中耳胆脂瘤中的表达差异

阿不拉江·托合提 程秀琴 阿布利克木·依明 卡衣赛尔·卡哈尔

（新疆维吾尔自治区人民医院耳鼻咽喉科 新疆 乌鲁木齐 830001）

慢性化脓性中耳炎、中耳胆脂瘤属于常见慢性炎性疾病，与病毒、细菌等感染具有密切联系，对患者生活质量造成一定影响[1]。研究表示，中耳黏膜具有一定免疫系统，可引起炎症反应，且中耳炎的发生与机体免疫调节不平衡相关。Toll 样受体2（TLR2）及Toll 样受体4（TLR4）与中耳免疫调节具有一定关系，其可维持中耳正常功能，当基因突变可能加重中耳炎症状[2]。研究表示，明确TLR2、TLR4 在中耳炎及中耳胆脂瘤中的表达，可为临床诊治提供重要基础，但目前临床对其研究并不多见。本研究旨在探讨TLR2 及TLR4 在慢性化脓性中耳炎与中耳胆脂瘤中的表达差异。

1.资料与方法

1.1 一般资料

回顾性收集2018 年1 月—2019 年6 月本院接收的45 例慢性化脓性中耳炎患者、37 例中耳胆脂瘤患者，分为将其设为中耳炎组、中耳胆脂瘤组；另收集同期本院体检中心接收的43 例健康体检者，将其设为对照组。患者临床资料均完整。3 组一般资料，差异无显著意义（P＞0.05）。

1.2 免疫组化染色定位分析法

同一医师钳取所有受检者肉芽组织，将所取标本液氮冷冻，手术结束后放入冰箱中备用。取标本组织进行固定，常规石蜡包埋及切片，进行常规脱蜡及水化，采用枸橼酸钠缓冲液修复抗原，用0.01mol/L PBS 漂洗3 次，3min/次；滴加一抗，30～40uL/片，孵育过夜；取出湿盒，于室温放置30min；滴加二抗，30 ～40uL/片，维持30min，吸去封闭液。阴性对照加同种型抗人酶结合物（IgG），检测切片分别滴加兔抗人TLR2抗体、兔抗人TLR4 抗体，孵育过夜，PBS 漂洗3 次。免疫组化试剂盒均由武汉博士德公司提供；任选5 个200 倍视野，计数TLR2 与TLR4 阳性细胞数。对比TLR2、TLR4 在三组受检者中耳肉芽组织中的表达差异。

1.3 统计学方法

采用SPSS20.0 统计学软件，三组间比较采用单因素方差分析检验，两两比较采用LSD-t 检验，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2.结果

三组标本中TLR2、TLR4 阳性细胞数对比 三组中中耳胆脂瘤组TLR2、TLR4 阳性细胞数最高，其次是中耳炎组，对照组最低，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 三组标本中TLR2、TLR4 阳性细胞数（±s，个/200 倍视野）

表1 三组标本中TLR2、TLR4 阳性细胞数（±s，个/200 倍视野）

注：与对照组比，aP ＜0.05；与中耳炎组比，bP ＜0.05。

组别 例数 TLR2 TLR4中耳炎组 45 110.12±11.32a 98.14±11.01a中耳胆脂瘤组 37 158.64±18.65ab 116.01±7.42ab对照组 43 22.31±7.13 16.29±3.50 P 0.000 0.000

3.讨论

中耳胆脂瘤及肉芽组织是慢性化脓性中耳炎的两种病理变化，具有较高致残率及致死率[3-4]，可能会发生颞骨溶骨性破坏等严重并发症；胆脂瘤主要病理特征为中耳腔存在大量鳞状上皮及程序性角化细胞凋亡等，其发病机制尚不明确[5]。研究表明，分析TLR2 与TLR4 在胆脂瘤及慢性化脓性中耳炎肉芽组织中的表达，可为临床诊治提供参考，但目前对其研究甚少。

T o l l 样受体主要分布在免疫细胞以及与外界相通的上皮细胞，且在巨噬细胞等专职抗原细胞表面十分丰富，其通过识别病原体相关分子模式，将相应信号转至细胞内，进而促进炎性细胞的合成及释放，最终引起免疫反应。中耳炎及中耳胆脂瘤均属于慢性炎症疾病，肉芽组织的形成是其最为显著特征，研究表示，在这两种疾病肉芽组织中TLR2、TLR4表达均显著高于健康人群，相关学者分析其原因可能为，TLR2、TLR4 信号通路处于一种过度活化的状态，进而易导致过度炎性反应，产生炎性损害。研究表明，TLR4 在启动机体炎性反应中起到至关重要作用；TLR2 在促进慢性炎症的炎性细胞消除中起到一定作用。本研究结果显示，三组中中耳胆脂瘤组T L R2、T L R4 阳性细胞数最高，其次是中耳炎组，对照组最低，分析其原因在于，慢性化脓性中耳炎及中耳胆脂瘤均属于慢性炎症疾病，且中耳胆脂瘤肉芽组织存在更多的炎性细胞浸润，具有较强炎症反应，故T L R2、T L R4 具有较高表达。

综上所述，TLR2 与TLR4 在慢性化脓性中耳炎与中耳胆脂瘤中均有较高表达，且在中耳胆脂瘤中表达更高，可为临床诊治提供参考。