胸苷激酶1在结肠癌患者血清中的表达

薛鸣 耿超

【摘 要】目的：探讨胸苷激酶1在结肠癌患者血清中的表达，为患者诊断、治疗提供参考。方法：2016年5月-2017年4月北大医疗鲁中医院初诊结肠癌病人94例，设为观察组。取相同时期入院的健康体检者70例，设为对照组。采用化学发光联合斑点杂交的技术检测两组TK1水平;对于观察组患者中的远处转移患者给予化学治疗，治疗后再次完成TK1水平测定;对观察组中的手术治疗患者分析血清TK1与其病理的相关性。结果：观察组TK1、CEA、CA199水平，均高于对照组（P<0.05）;远处转移患者血清TK1高于局部可手术患者（P<0.05）。不同肿瘤标志物联合诊断优于单一肿瘤标志物诊断。PR患者治疗后TK1水平，均低于SD及PD患者，PR患者治疗后TK1较化疗前显著降低（P<0.05）。提示TK1早于CEA、CA199提前预测肿瘤复发转移。结论：TK1评估结肠癌患者化疗疗效显著，建议联合影像学检查综合判定;TK1可作为结肠癌患者手术效果的判定及复发转移的预测指标之一。

【关键词】胸苷激酶1;结肠癌;癌胚抗原

Abstract：Objective To investigate the expression of thymidine kinase 1 in serum of patients with colon cancer， and to provide a reference method for diagnosis and treatment of patients.Methods： 94 patients with colon cancer newly diagnosed in PKUCare Luzhong Hospital from May 2016 to April 2017 were set as observation group. 70 healthy patients admitted to the hospital in the same period were selected as the control group. The TK1 levels of the two groups were detected by chemiluminescence combined spot hybridization. Chemotherapy was given to patients with distant metastasis in the observation group， and TR1 level was measured again after treatment. The correlation between serum TK1 and pathology was analyzed in the observation group. Results： the levels of TK1， CEA and CA199 in the observation group were higher than those in the control group （P<0.05）. The serum TK1 of patients with distant metastasis was higher than that of patients with local surgery （P<0.05）， and the combined diagnosis of different tumor markers was better than that of single tumor marker. The TK1 level of PR patients after treatment was lower than that of SD patients and PD patients， and the TK1 level of PR patients after treatment was significantly lower than that before chemotherapy （P<0.05）， suggesting that TK1 was earlier than CEA and CA199 in predicting tumor recurrence and metastasis.Conclusion： TKL evaluation of colon cancer patients with significant curative effect of chemotherapy， it is recommended to combine imaging examination comprehensive judgment; TK1 can be used as a predictor of recurrence and metastasis in patients with colon cancer

Key words： thymidine kinase 1;colon cancer;cancer embryo antigen

隨着基因检测及病理技术的进展，靶向药物在结肠癌患者中得到应用，提高了治疗的有效率。而肿瘤标志物在诊断和判断预后，肿瘤分类以及制定最佳治疗方案方面发挥重要作用[1]。胸苷激酶1（Thymidine Kinase，TK1）是人体内重要的生物酶，能促进胸苷嘧啶磷酸化，参与DNA复制和细胞增殖。正常细胞分裂后体液中不存在TK1。多项大样本临床调查结果均显示，癌症患者血清TK1活性是明显升高的[2]。通过观察TK1水平变化，以早期筛查肿瘤，评价患者预后及监控患者治疗效果。

1 材料和方法

1.1 资料

2016年5月-2017年4月在北大医疗鲁中医院初诊的结肠癌患者94例，年龄（60.74±10.91）岁，设为观察组，其中21例因出现远处转移，未行手术治疗。余73例患者均行结肠癌根治术。术后肿瘤TNM分期：I期5例，II期27例，III期41例。术后行规范辅助治疗及定期复查，中位随诊时间1.5年，共随访70例患者。取同期入院健康体检者70例，设为对照组，男42例，女28例，年龄（35-86）岁，平均（61.91±7.54）岁。

1.2 方法

对照组清晨空腹采集静脉血6ml;观察组术前、术后1月、术后3月均清晨空腹采集静脉血6ml，注入一次性真空采血管中，静置30分钟后以3000r/min的速度离心20分钟，血清置于-20°冰箱中保存备用，检测前2-8°解冻，严禁反复冻融。采用点印迹免疫酶化学法测定。血清CEA、CA199水平测定：采用全自动电化学发光免疫分析仪，配套试剂，采用电化学发光法。严格按规则执行，该工作由我院检验科完成。

1.3 资料归纳整理

临床资料主要包括患者性别、年龄（≥60岁及<60岁）、术后病理、是否远处转移、肿瘤形态、肿瘤大小（≥4cm及<4cm）、肿瘤分化程度、淋巴结转移情况、HER-2及Ki67表达情况。观察组与对照组肿瘤标志物水平。观察TK1、CEA、CA199不同指标在结肠癌患者诊断中的特异性、敏感性。血清TK1浓度与术后病理特征及患者一般情况的关系。

1.4 统计分析

运用SPSS 22.0统计软件包进行统计学分析。

2 结果

2.1 临床特征：94例结肠癌患者中男性56例，女性38例，平均年龄（60.74±10.91）岁，其中低分化腺癌51例，中高分化腺癌43例，I期5例，II期27例，III期41例，IV期21例。观察组TK1、CEA、CA199水平，均高于对照组（P<0.05），观察组中远处转患者的TK1、CEA、CA199水平均高于局部可手术患者（P<0.05）。

2.2 结肠癌根治术患者血清TK1水平与病理特征关系：结肠癌患者血清TK1水平与肿瘤直径、淋巴结转移情况、TNM分期、Ki67的表达、Her-2的表达有明显相关性，差异有统计学意义（P<0.05）;而在性别、年龄、肿瘤形态、肿瘤分化程度方面差别无统计学意义（P>0.05）。CEA与性别、年龄、肿瘤形态、淋巴结转移、Ki67的表达、Her-2的表达均无关（P>0.05），而与肿瘤分化程度及TNM分期有关（P<0.05）。

3 讨论

临床研究证实TK1能够作为恶性肿瘤的预测指标，结肠癌患者血清中均存在不同程度的TK1水平的升高。TK1水平与癌症预后密切相关。本研究通过检测结肠癌组、健康人血清TK1水平，结果证实结肠癌组患者TK1水平明显高于健康对照组，差异具有统计学意义。本研究中，21例远处转移患者其TK1、CEA、CA199水平，均明显高于可手术患者（P<0.05）。TK1为细胞增殖标志物，考慮与肿瘤临床分期越晚，肿瘤细胞负荷越重有关。因此，临床上结肠癌患者加强TK1水平测定能对患者的早期诊断提供帮助，对患者的病情变化给予正确评估，指导临床合理的诊断和治疗。

多项临床研究证实血清TK1较其他肿瘤标志物在筛查恶性肿瘤方面更敏感，联合检测肿瘤标志物可提高诊断的敏感性及特异性。但目前单独检测TK1水平难以达到满意效果，需要联合其他检查方法[3]。本研究也得出相同结论，与CEA、CA199相比较，TK1在结肠癌诊断中的敏感性最高，为86%，其次为CEA 68%，CA199为67%;CEA特异性最高为97%，其次为TK1 93%;三项联合诊断实验的敏感性和特异性最高，均为93%;不同肿瘤物联合诊断优于单一肿瘤标志物诊断。因此，血清TK1检测联合其他肿瘤标志物可以提高结肠癌的诊断。

结肠癌根治术为早期结肠癌首选的治疗方法，然而术后的远处转移和复发严重影响着这类患者的预后。重要的原因之一是缺乏可靠的标志物预测远处转移或局部复发的发生。虽然超声、CT等影像学检查能够评估肿瘤大小及淋巴结转移情况，但是仍然无法发现血液中的微病灶，不能真实的反映出肿瘤的负荷情况。众多学者致力于研究能够寻找能够预测复发的临床指标，如CEA、CA199、CA242等，但是临床使用中仍不十分准确。术前高血清TK1水平者复发或远处转移的风险更高。TK1能够反映肿瘤细胞增殖情况，与全身肿瘤负荷具有相关性。我们在对比研究中发现，结肠癌根治术后患者TK1水平明显下降。对相关病理特征进行单因素分析，发现TNM分期、淋巴结转移情况、术前高TK1水平有统计学差异，其他指标无统计学差异。多因素分析，结果显示术前TK1水平为独立危险因素。

4 结论

TK1评估结肠癌患者化疗疗效显著，联合影像学检查综合判定病情发展更为准确。TK1可作为结肠癌患者手术效果的判定及复发转移的预测指标之一。由于本研究时间较短，样本量仍然较少，仍需多中心、大样本进一步研究证实。

参考文献

Xu Y，Shi QL，Ma H，et a1.High thymidine kinase l（TK1）expression is a predictor of poor survival in patients with pT1 of lung adenocarcinoma[J].Tumour Biol，2012，33（2）：475-483.

袁航，朱宝，吴翼伟，等.肺癌患者血清TK1检测的临床意义[J].放射免疫学杂志，2012，24（3）：301-302.

方辉，李学良，施瑞华.结肠癌患者血清细胞质胸苷激酶的检测及临床意义[J].实用临床医药，2013，33（13）：30-32.