新疆褐牛同期发情和同期排卵—定时输精效果

刘建明， 褚洪忠， 陈幻喜， 杨光维， 李 涛， 施巧婷， 徐照学， 乃比江*

(1.伊犁州畜牧科学研究所，新疆 伊宁 835000；2.尼勒克县乌赞镇畜牧兽医站，新疆 尼勒克 835700；3.河南省农业科学院畜牧兽医所，郑州 450008)

牛同期发情技术是利用外源性激素直接作用于卵巢，人为的调控母牛发情周期进程，使群体母牛集中在某一时段同时发情[1]。同期发情对规模化牛场来说便于生产管理，促进母牛群发情，使乏情母牛出现性周期活动，是开展胚胎移植必要的过程，也便于培养人工授精技术人员[2]。对于牧区牛群来说，通过同期发情处理，可将母牛群集中到配种点，解决部分偏远牧区交通不便的问题。同期排卵—定时输精技术是在同期发情基础上发展的繁殖新技术，就是利用促性腺激素释放激素(GnRH)、前列腺素(PG)等外源生殖激素处理母畜，根据排卵时间直接输精，而不再需要观察母畜发情，从而降低了工作量，也解决了养殖户不会观察牛只发情，错配、漏配的问题，并可提高母畜的利用率和受胎率[3]。近年来，国内外学者在奶牛、肉羊、生猪上广泛开展了同期排卵—定时输精技术试验，取得了较好的效果[4]，但同期排卵—定时输精技术在不同品种、不同方法上应用效果却鲜有报道。

新疆褐牛主要分布在新疆天山北部、塔额盆地，是新中国成立以来我国自主培育的第1个乳肉兼用牛品种，具有抗病力强、适宜放牧等特点，深受广大农牧民养殖户的喜爱[5]。近年来，随着人工授精冷配技术在新疆褐牛上广泛应用，有力推动了新疆褐牛的繁殖效率和产业化发展。但在新疆褐牛实际生产中，仍然存在母牛产后不发情，乏情，配种受胎率低，产犊间隔长的问题，除在生产管理、营养饲料等原因外，发情鉴定和输精时间的把握是造成新疆褐牛繁殖效率低的重要原因。本试验通过比较同期发情和同期排卵—定时输精不同处理方法在新疆褐牛上的应用效果，旨在探索新疆褐牛效果最佳、成本最低的同期发情处理方法和同期排卵—定时输精方法，为新疆褐牛生产实际提供指导，也为解决牧区人工授精推广难提供方法，同时也为加快新疆褐牛选育提高和新品系选育步伐提供新的繁殖技术。

1 材料与方法

1.1 试验地点

试验地点选择新疆伊犁州尼勒克县2个新疆褐牛养殖合作社(I、Ⅱ)。

1.2 试验动物

选择养殖合作社I中2胎以上45头新疆褐牛健康、膘情较好母牛开展不同同期发情处理方法比较试验，选择养殖合作社Ⅱ中2胎以上20头新疆褐牛健康、膘情较好母牛开展不同同期排卵—定时输精处理方法比较试验，2个养殖合作社均采用TMR饲粮饲喂，散栏饲养，自由采食、饮水。

1.3 试验药品及冻精

孕酮为CUE-MATE孕酮栓，新西兰产，含1.56 g孕酮；前列腺素为氯前列腺烯醇(PGF2α)，宁波三生生物科技有限公司产，0.5 mg，GnRH类似物促黄体素释放激素A3(LHRH-A3)，宁波三生生物科技有限公司，25 μg。冻精为北京奶牛中心产美系褐牛冻精和德国宝牛育种中心产德系褐牛冻精。

1.4 同期发情、同期排卵—定时输精处理分组

试验牛分为5组，即A、B、C、D、E组，A、B、C组为3种同期发情处理方法组，D、E组为2种同期排卵—定时输精处理组。

A组：PG(PGF2α)+PG(PGF2α)法处理方法，即2次PG法，在母牛发情周期的任意一天，注射0.5 mg，2 mL PGF2α，记为第0天，在第11天再注射0.5 mg，2 mL PGF2α，之后开始仔细观察发情情况，并做好发情时间、发情情况记录。

B组：PG(PGF2α)法处理方法，即1次PG法，在母牛发情周期的任意一天，注射0.5 mg，2 mL PGF2α，之后观察发情，并做好发情时间、发情情况记录。

C组：孕酮(CIDR)+PG(PGF2α)法处理方法，即在母牛发情周期的任意一天，阴道埋CIDR栓，记为第0天，在第11天去栓，再注射0.5 mg，2 mL PGF2α，之后开始仔细观察发情情况，并做好发情时间、发情情况记录。

D组：GnRH(LHRH-A3)+PG(PGF2α)+GnRH(LHRH-A3)+AI，即在母牛发情周期的任意一天，注射LHRH-A3，记为第0天，第7天再注射PGF2α，在48 h后注射LHRH-A3，16～24 h内进行人工授精配种。

E组：孕酮(CIDR)+GnRH(LHRH-A3)+PG(PGF2α)+GnRH(LHRH-A3)+AI，即在母牛发情周期的任意一天埋植CIDR栓，并同时注射LHRH-A3，记为第0天，第7天撤CIDR栓，并同时注射PGF2α，48 h后再注射LHRH-A3，16 h后进行人工授精配种。

1.5 妊娠检测

人工授精配种后60 d后用直肠B超法进行妊娠诊断，统计怀胎率。

1.6 数据统计

原始数据经过Excel软件进行整理，用SPSS 19.0软件进行卡方检验。

2 结果与分析

2.1 不同同期发情处理方法母牛发情情况分析

由表1可知，3种不同同期发情处理方法母牛主要集中在12～24 h内发情，其中12～24 h内A组和C组处理方法母牛发情率极显著高于B组处理方法(P<0.01)，C组比A组高出32.3%，A组和C组处理方法差异不显著(P>0.05)；24～48 h内C组处理方法母牛发情率最高，显著高于A组处理方法(P<0.05)，极显著高于B组处理方法(P<0.01)，A组处理方法极显著高于B组处理方法(P<0.05)；48～72 h内A组处理方法显著高于B组和C组(P<0.05)，3种处理方法总发情率中C组最高为93.3%，A组为86.7%，B组最低为40.0%，C组与A组总发情率极显著高于B组(P<0.01)。

表1 同期发情率分析

2.2 不同同期发情处理方法母牛发情后配种妊娠情况分析

由表2可知，经3种同情发情处理后的3组中发情母牛数分别为13头，6头，14头，对3组发情母牛进行人工授精配种，60 d后经直肠B超妊娠检测定胎，A、B、C 3组情期受胎头数分别为9头，4头，10头，受胎率分别为69.2%，66.7%，71.4%，三者差异不显著(P<0.05)。

表2 同期发情配种妊娠情况分析

2.3 不同同期排卵—定时输精方法母牛配种妊娠情况分析

由表3可知，2种不同同期排卵—定时输精方法在输精时E组母牛全部发情，发情率达100%，D组发情率达到90%，发情母牛按照处理方法要求配种时间前，经直肠检查排卵情况，D组排卵5头，E组排卵6头，排卵率分别为50%，60%，二者差异显著(P<0.05)，发情排卵率二者差异不显著(P>0.05)，经人工授精冷配后，60 d B超妊娠检测定胎，总怀胎率D组与E组相同，均为50%。

表3 不同同期排卵—定时输精方法母牛配种妊娠情况分析

3 讨 论

3.1 不同同期发情处理方法新疆褐牛母牛发情情况的影响

人工授精技术的广泛应用，有力推动了优质种公牛遗传物质的推广和地方牛品种改良、育种等进程[6]，同期发情技术可有效提高人工授精的效率，它是利用外源激素对母牛进行处理，以提高母牛发情的同步率。对规模化养殖场来说，利用同期发情技术，在预定的时间对待配母畜进行集中配种，查发情方便省力，产仔时间相近，统一管理，缩短产犊间隔，降低饲养成本，提高养殖效益[7]。对于牧区放牧新疆褐牛来说，利用同期发情技术，可有效提升牧区牛羊分群集中人工授精冷配点的工作效率，减少偏远牧区人工授精推广难的问题。母牛在1个发情周期中可分为黄体期和卵泡期过程，PG具有溶解黄体的作用，外源注射PG后引起黄体退化造成孕酮合成和分泌量降低，解除孕酮对卵泡发育的抑制作用，卵泡恢复发育形成新的优势卵泡，雌激素分泌量增加，母牛表现发情并排卵[2]。当运用CIDR栓埋植在母牛阴道中，持续、缓慢释放孕酮，撤CIDR栓后，孕酮水平急速下降，解除孕酮对卵泡发育的抑制，而诱使母牛发情并排卵则。本试验结果显示，利用PG、CIDR等对母牛进行外源激素处理，2次PG法和CIDR+PG法在同期发情处理中都取得了较好的效果，2次PG法的成本要远远低于CIDR+PG法，因此，选用2次PG法在新疆褐牛上应用更为合适。1次PG法发情率低的主要原因是由于PGF2α对前5 d或无黄体的母牛处理无反应，这与李金辉等人的研究结果[8]相似。因此，若要进一步降低同期发情处理费用，利用1次PG法，首先应开展母牛直肠黄体情况检测，进行选择性处理。

3.2 不同同期发情处理方法新疆褐牛母牛配种妊娠情况的影响

同期发情处理后母牛配种妊娠怀胎率情况主要受配种时是否排卵的决定，同时也受到母牛膘情、饲养管理等方面的影响[9]。本试验中试验母牛为规模化养殖场的母牛，总体来说膘情较好，3组处理方法情期受胎率达到了66.7%以上，因此，同情发情处理技术在新疆褐牛上应用，在配种怀胎率方面可取得较好的效果，但首先要控制好母牛膘情。同时，本试验中试验牛数较少，且在5月份气候较适宜，同期发情率较肖杰和高庆华等研究报道同期发情率82.5%，75%高[2,10]，配种怀胎率与李静等人的研究[11]相似。

3.3 不同同期排卵—定时输精方法新疆褐牛母牛配种妊娠情况的影响

家畜同期排卵—定时输精(TAI)技术是在同期发情技术上发展而来的一种家畜繁殖新技术，母畜通过外源激素处理后，使其同期发情和同期排卵，在规定的时间内直接人工输精配种[2]。Pursley等首次报道了促性腺激素释放激素和前列腺素处理母牛达到同期排卵的目的，并对该项技术进行命名同期排卵—定时输精[12]。同期排卵的基本原理为母牛发情周期的任意一天注射GnRH，促进垂体分泌促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)，使卵巢上卵泡成熟并排卵，未妊娠，形成黄体，之后第7天再注射PGF2α诱导黄体溶解，黄体溶解使孕酮减低促进卵泡发育，48 h后母牛发情并注射GnRH，促进LH分泌，引起排卵。本试验结果显示，两种处理方法中发情率都比较高，E组处理方法甚至达到了100%，直肠检测排卵情况D组、E组处理方法都超过或为50%，说明同期排卵效果较好，总怀胎率方面两者差异不显著。因此，从生产成本上来说，D组方法更具有优势。本试验中配种时间D组在16～24 h，E组在16 h，下一步在配种时间还有待于进一步研究，以提高新疆褐牛同期排卵—定时输精怀胎率，得出最优技术方案。

4 结 论

新疆褐牛同期发情处理应用2次PG(PGF2α)法、CIDR+PG法(PGF2α)都取得了较好的发情率(86.7%，93.3%)，但从处理成本上来说，2次PG(PGF2α)法更经济适用；若要进一步降低同期发情处理费用，利用1次PG法，首先应开展母牛直肠黄体情况检测，进行选择性处理。同期排卵—定时输精宜采用GnRH(LHRH-A3)+PG(PGF2α)+GnRH(LHRH-A3)+AI方法，成本低，且受胎率较好，适宜在牧区集中人工授精冷配点推广。