儿童血液培养病原菌的分布及耐药性分析

张薇薇，申美静，吴凯峰

(遵义医科大学第三附属医院(遵义市第一人民医院)儿童保健科，贵州 遵义)

0 引言

血流感染是病原体及毒素通过各种途径侵入血液循环中引起的一种全身性、严重性的一种感染疾病。儿童败血症病情比较复杂、病情发展较迅速、儿童抵抗力十分低下，所以儿童血流感染的发病率和死亡率均较高。近年来由于免疫抑制剂的广泛应用、免疫力低下病人不断升高以及抗菌素大量使用，使血流感染病人数量不断增加，病死率也逐年不断增加，高达20%-40%[1]。诊断儿童血流感染的最可靠方法是进行儿童血液细菌培养，进行儿童血液细菌培养对控制和治疗儿童血流感染具有非常重要作用。

1 实验资料与方法

1.1 实验研究对象

收集2019年01月至01日至2019年12月31日在遵义医科大学第三附属医院(遵义市第一人民医院)住院并进行血液培养的儿童病人标本共计13906份，其中513份血培养标本中培养出病原菌。

1.2 血液培养标本采集方法

儿童患者温度大于38.5℃或寒颤时，遵循无菌操作方式抽取3-5mL肘静脉血，然后注入含抗生素吸附瓶的儿童血液培养瓶内，混匀后立刻送到检验科，并放入法国梅里埃的全自动血液培养系统中进行培养。

1.3 主要试剂及仪器

购买血平板(BA)；购买不含抗生素巧克力平板；阴性杆菌鉴定卡；酵母菌鉴定卡；阳性球菌鉴定卡；非发酵杆菌药敏卡；肺炎链球菌药敏卡；VITEK MS基质液；质谱分析系统(VITEK MS)；细菌鉴定及药敏分析统(VITEK2)；全自动血液培养系统(法国梅里埃3D)；抗生素吸附儿童血培养瓶。

1.4 细菌培养鉴定及药物敏感试验

血培养仪器报警阳性后，将阳性瓶卸载并转种于血平板和不含抗生素巧克力平板上，接种后放于二氧化碳孵育箱中过夜培养，第二天挑取单个菌落用质谱分析系统或细菌鉴定系统进行细菌的鉴定和药物敏感试验。

1.5 室内质量控制

采用美国菌种贮存中心购买标准菌株，包括铅黄肠球菌、霍氏肠杆菌、肺炎链球菌、葡萄牙念珠菌、粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、光滑念珠菌等标准菌株进行室内质量控制，标准菌株的选用和判断标准遵循CLSI(临床和实验室标准化协会)抗微生物药物敏感试验标准文件、法国梅里埃厂家说明书或全国临床检验第四版操作规程[2-4]的要求。

2 结果

2.1 病原菌分类

2019年01月至01日至2019年12月31日，共检测儿童血液培养标本13906份，检测出病原菌513株，阳性率占比3.7%；其中452株为革兰阳性球菌，所占比率为88.10%；53株为革兰阴性杆菌，所占比率为10.34%；8份为酵母样真菌，所占比率为1.56%，病原菌分类及占比数据一览表，见表1。

表1 病原菌分类一览表

2.2 病原菌的分布

513株阳性菌株中，共检测出178株人葡萄球菌，所占比率34.69%；132株表皮葡萄球菌，所占比率25.73%；36株溶血葡萄球菌，所占比率7.02%；15株大肠埃希氏菌占比2.93%；15株肺炎链球菌，占比2.93%；137株其它细菌，所占比率26.70%等。儿童血液培养分离病原菌分布构成比见表2。

表2 病原菌分布一览

2.3 药物敏感结果

革兰阳性球菌分离率居首位的是人葡萄球菌，对万古霉素、利奈唑胺、替加环素均敏感；对左氧氟沙星敏感率为74.8%；对红霉素敏感率为19.8%；对青霉素敏感率为2.7%；对苯唑西林的敏感率为90.1%。革兰阴性杆菌中以大肠杆菌分离率为主，对亚胺培南、厄他培南、美罗培南和头孢替坦均敏感；对头孢他啶的敏感率为88.9%；对头孢吡肟的敏感率为77.8%；对氨苄西林的敏感率为53.3%；对头孢唑啉的敏感率为63.6%；对头孢呋辛的敏感率为55.6%。肺炎链球菌对万古霉素、厄他培南、左氧氟沙星、青霉素、利奈唑胺、莫西沙星的敏感率为100%；对红霉素的敏感性为7.14%；对美罗培南的敏感性为71.4%。

3 讨论

根据此次实验结果显示在我院儿童血液培养标本13906份样本中，全自动血液培养仪器报警阳性瓶数量为513份，儿童血液培养阳性分离率占比3.7% ，儿童血培养阳性率略低于国内外文献报道阳性率，可能与地域不同、标本送检量、送检人群、标本污染、标本采集方法、采集血量的多少和采血时间等因素有关系[5-6]。在儿童血流感染中分离的病原菌中，革兰阴性杆菌明显低于革兰阳性球菌，凝固酶阴性的葡萄球菌在革兰阳性球菌中居首位，其中以人葡萄球菌分离率最高，均未分离出对万古霉素、利奈唑胺和替加环素耐药的菌株，对红霉素和青霉素的耐药性均大于20%；大肠埃希菌在革兰阴性杆菌分离中占主要地位，其中大肠埃希菌对亚胺培南、厄他培南、美罗培南、阿米卡星和头孢替坦的敏感性为100%；肺炎链球菌对万古霉素、利奈唑胺、左氧氟沙星、青霉素和莫西沙星的敏感性均大于90%。

儿童的身体条件较差，机体免疫系统不完善，抵抗力较差，非常容易引起细菌感染，进而引起细菌进入到血循环中引进血流感染，临床应多采集儿童血液标本进行培养，并重视儿童血液培养病原菌的分布情况及耐药性特点，减少抗生素使用不规范性以及减少多重耐药菌株的产生。

综上所述，我院儿童血液培养病原菌检测中以革兰阳性球菌居首位，革兰阴性杆菌感染次之，酵母样真菌感染最少。现今，儿童血流感染的病死率和耐药率逐年增加，临床医生应依据病原菌的分布特点以及病原菌的药物敏感情况进行抗生素的合理化、规范化选择，降低病人的死亡率，提高儿童患者血流感染的治疗效果。