肺炎支原体感染与支气管哮喘患儿发病的关系及其对患儿IgE、细胞因子的影响

雷东红，葛雯雯，闫凡，迟建秀

榆林市第一医院儿科，陕西 榆林 718000

支气管哮喘属儿科常见多发呼吸系统疾患，主要临床特征为气道慢性炎症与气道高反应性，有资料统计，我国14岁以下儿童群体中支气管哮喘发病率为0.11%～2.03%，且有逐年增高趋势[1-2]。肺炎支原体(MP)为介于病毒与细菌之间的病原微生物之一，可黏附在呼吸道纤毛上皮细胞表面，引起儿童肺炎、支气管炎、咽炎等。近年来，有关研究指出，MP感染可能会参与气道炎症与高反应性，在哮喘发病、进展中起着重要作用[3]。免疫球蛋白E(IgE)为免疫因子之一，可黏附于支气管黏膜下的肥大细胞及嗜酸性粒细胞细胞膜上，加速一些生物活性物质生成及释放，引发哮喘[4]。肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白 细 胞 介 素 -4(IL-4)、白 细胞 介素 -17(IL-17)均为重要炎性细胞因子，在机体炎症产生、进展中扮演着重要角色[5-6]。但目前临床关于MP感染与支气管哮喘患儿发病的关系及其对患儿IgE、细胞因子影响的研究报道尚较少。本研究旨在探究MP感染与支气管哮喘患儿发病的关系及其对患儿IgE、细胞因子的影响，以期为临床疾病诊治提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年4月至2020年2月榆林市第一医院收治的200例支气管哮喘患儿设为试验组，同期200例上呼吸道感染患儿设为上感组，200例健康体检儿童设为健康组。试验组中男性111例，女性89例；体质量8～57 kg，平均(22.74±4.49)kg；年龄1～12岁，平均(6.36±2.21)岁；疾病病程：急性期108例，缓解期92例。上感组中男性107例，女性93例；体质量 8～59 kg，平均(23.04±4.27)kg；年龄1～12岁，平均(6.52±2.14)岁。健康组中男性109例，女性91例；体质量 9～58 kg，平均(23.39±4.06)kg；年龄1～12岁，平均(6.68±2.35)岁。三组受检者的性别、体质量、年龄等一般资料比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。本研究经医院伦理委员会同意。

1.2 病例选择

1.2.1 纳入标准 (1)试验组符合《支气管哮喘防治指南》[7]中支气管哮喘相关诊断与分期标准；(2)上感组经临床证实为非MP感染、非哮喘的上呼吸道感染患儿；(3)健康组为健康体检儿童；(4)三组近期均未应用免疫抑制剂、糖皮质激素治疗，家属知晓本研究方案，自愿签订知情同意书。

1.2.2 排除标准 (1)合并肺结核、呼吸衰竭、间质性肺炎、呼吸道畸形、支气管异物等其他呼吸系统疾病者；(2)合并心、肺、肝、肾等脏器功能严重异常者；(3)合并免疫、血液系统疾病者；(4)合并认知、精神功能严重障碍者；(5)合并恶性肿瘤、营养不良、脑血管疾病者；(6)临床资料不全者。

1.3 方法 (1)标本采集：采集受检儿童5 mL清晨空腹静脉血样，以离心机施行离心处理10 min，离心速度为3 500 r/min，离心半径为8 cm，取上层血清，低温保存待检，剔除溶血样本。(2)检测方法：以被动冷凝集法测定MP水平，检测试剂盒购于日本富士瑞必欧株氏会社，致敏离子和血清最终稀释倍数超过1：40产生凝集判定为阳性；以双抗夹心酶联免疫吸附法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-17(IL-17)水平，试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司；以免疫比浊法测定免疫球蛋白E(IgE)水平，试剂盒购于宁波美康生物有限公司，相关操作均严格按仪器及试剂盒说明书由医院专业人员完成。

1.4 观察指标 (1)三组受检者的MP表达(滴度、阳性率)情况；(2)试验组不同病程(急性期、缓解期)患儿的MP表达(滴度、阳性率)情况；(3)试验组MP阳性、阴性患儿的血清IgE、细胞因子表达情况；(4)试验组不同MP程度(MP感染重症、MP感染轻症)患儿的血清IgE、细胞因子表达情况。

1.5 MP感染程度判定标准 MP检测阳性，肺部体征较严重，热程≥15 d，肺部并发症≥2个为MP感染重症；MP检测阳性，肺部体征较轻，热程＜15 d，肺部并发症＜2个为MP感染轻症[8]。

1.6 统计学方法 应用SPSS 22.0统计学软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差(±s)表示，两组均数比较采用t检验，多组均数比较采用单因素方差分析，计数资料比较采用χ2检验，采用Logistic回归分析筛选出支气管哮喘发病的影响因素，采用Spearman相关性分析法分析支气管哮喘患儿MP表达与IgE、细胞因子水平之间的关联性，均以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组受检者的MP表达水平比较 试验组患儿的MP滴度及阳性率明显高于上感组和健康组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 三组受检者的MP表达水平比较

2.2 支气管哮喘发病的影响因素 以是否发生支气管哮喘为因变量，将年龄、性别与有无MP感染作为自变量实施Logistic回归分析，结果显示，MP感染为支气管哮喘发病的重要危险因素(P＜0.05)，见表2。

表2 支气管哮喘发病有关影响因素的多元回归分析结果

2.3 试验组不同病程患儿MP表达水平比较 试验组急性期患儿MP滴度及阳性率明显高于缓解期患儿，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表3。

表3 试验组不同病程患儿MP表达水痘比较

2.4 试验组MP阳性与阴性患儿血清IgE、细胞因子表达水平比较 试验组MP阳性患儿血清IgE、TNF-α、IL-4、IL-17水平明显高于阴性患儿，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表4。

表4 试验组MP阳性与阴性患儿血清IgE、细胞因子表达水平比较(±s)

表4 试验组MP阳性与阴性患儿血清IgE、细胞因子表达水平比较(±s)

项目 例数IgE(U/mL)细胞因子MP阳性MP阴性t值P值89 111 651.71±129.67 437.96±116.48 12.262＜0.05 TNF-α (μg/L)36.72±6.39 22.85±4.12 18.563＜0.05 IL-4(pg/mL)237.18±39.84 115.47±26.73 25.763＜0.05 IL-17(ng/L)43.39±10.27 37.84±9.12 4.043＜0.05

2.5 试验组不同MP程度患儿血清IgE、细胞因子表达水平比较 试验组MP感染重症患儿血清IgE、TNF-α、IL-4、IL-17水平明显高于轻症患儿，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表5。

表5 试验组不同MP程度患儿血清IgE、细胞因子表达水平比较(±s)

表5 试验组不同MP程度患儿血清IgE、细胞因子表达水平比较(±s)

程度 例数IgE(U/mL)细胞因子MP感染重症MP感染轻症t值P值38 51 853.60±146.24 501.28±102.41 13.369＜0.05 TNF-α (μg/L)48.42±7.40 28.00±5.82 14.573＜0.05 IL-4(pg/mL)296.53±44.16 192.96±36.28 12.136＜0.05 IL-17(ng/L)49.06±11.25 39.17±9.74 4.434＜0.05

2.6 MP表达与支气管哮喘患儿IgE、细胞因子水平的关系 经Spearman相关性分析结果显示，MP表达与支气管哮喘患儿IgE、TNF-α、IL-4、IL-17水平呈显著正相关(r=0.682、0.706、0.795、0.517，P＜0.05)。

3 讨论

支气管哮喘为一种气道慢性炎症性疾病，呼吸道上皮细胞、肥大细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞与其组分共同参与该病发生、进展，可对患儿生命健康造成严重影响[9-10]。近年来，有研究报道，MP作为一种呼吸道病原体，在婴幼儿群体中感染率有不断增高趋势，且与哮喘急性发作、预后等有关[11]。本研究发现，试验组MP滴度及阳性率高于上感组、健康组，且疾病处于急性期患儿MP滴度及阳性率高于缓解期患儿，回归分析可知，MP感染为支气管哮喘发病的重要危险因素。表明MP感染与小儿支气管哮喘发生、进展密切相关，MP感染可能为引起该病重要危险因素。相关研究指出，气道炎症反应可因内源性因素激活，亦可因病原体感染抑或变应原刺激诱发[12]。而MP可作为感染源黏附于气道上皮细胞，损害呼吸道黏膜上皮纤毛结构和功能，促进肥大细胞、嗜酸性粒细胞等增殖及释放炎症因子，加剧呼吸道炎症，且还可致使呼吸道平滑肌收缩，导致非胆碱能神经功能产生障碍，加剧呼吸道高反应性，进而造成哮喘发病。刁敏等[13]也通过对照研究显示，哮喘患儿MP感染阳性率可显著增高。

有关研究报道，多种炎性细胞及炎性因子均会参与气道炎症，属哮喘发作启动机制，且气道高反应性和自身免疫失调均会诱发哮喘[14]。TNF-α属炎症反应过程出现最早的炎性介质，可增加内皮细胞黏附分子表达，促进血小板活化和炎性细胞浸润，导致组织损伤，在哮喘发病中起着重要作用[15]；IL-4为一种可诱导体液免疫反应的炎性介质，可刺激人体分泌特异性IgE，诱导Ⅰ型变态反应，致使哮喘发病[16]；IL-17属Th17所分泌的炎性介质之一，能促进中性粒细胞、嗜酸性粒细胞向气道聚集，引发高反应性气道炎症，促进哮喘发病[17]；IgE为参与哮喘变态反应重要抗体，于变应原首次进入到人体后，可生成特异性IgE，后者可同肥大细胞、嗜酸性粒细胞等相结合，致使机体产生致敏状态，当相同变应原再次刺激人体时，则会造成生理功能失调，诱发哮喘[18]。可见上述指标在哮喘发病中具有重要作用。基于此，本研究进一步观察了对支气管哮喘患儿IgE及细胞因子(TNF-α、IL-4、IL-17)的影响，发现试验组MP阳性患儿血清IgE、TNF-α、IL-4、IL-17水平高于阴性患儿，MP感染重症患儿高于轻症患儿，且相关性分析可知，MP表达与支气管哮喘患儿IgE、细胞因子水平呈正相关。表明MP表达与患儿IgE、细胞因子水平有关。颜海峰等[19]研究亦指出，MP感染哮喘患儿血清IgE、白细胞介素水平可显著增高。MP感染后，体内Th0细胞朝Th2分化增强，Th2功能提升，Th1功能降低，致使IL-4分泌量增多，且MP感染后，机体对外界抵抗力降低，可致使TNF-α、IL-17等于免疫应答反应过程中大量生成、释放，此外，MP作为特异性抗原之一，可促使人体生成IgE，最终加剧炎症反应与免疫损伤，促使哮喘发生、进展[20]。

综上所述，MP感染与小儿支气管哮喘发生、进展密切相关，且其表达与患儿IgE、细胞因子水平有关，可能为造成气道炎症及免疫紊乱的重要原因，可为小儿支气管哮喘预防及治疗提供新思路。