妊娠期子宫体检感染病毒种类、HR-HPV载量及预后评估

库瑛，饶亦良，胡蝶，万桃香

武穴市第一人民医院妇产科，湖北 武穴 435400

宫颈癌是仅次于乳腺癌的常见恶性肿瘤，其发病率长期位居女性恶性肿瘤前列，致死率高，发病人群日益呈现年轻化趋势，给社会及患者造成了极其沉重的负担[1-2]。宫颈癌的发生是由多因素指导的阶段渐进性生物学过程，宫颈上皮内瘤变(CIN)与癌症前期病变密切相关，能够充分反映宫颈癌病变过程。大量研究表明，高危型人乳头病毒(HR-HPV)持续感染是宫颈癌持续发展病变的关键，HR-HPV通过病毒基因蛋白干扰细胞正常工作周期而导致宿主细胞异常增殖[3-4]。且由于妊娠期妇女性激素水平出现变化，导致生殖道内环境与机体免疫功能出现变化，感染多呈现潜伏性与隐匿性，临床症状不明显，不会引起患者足够重视[5]。针对这一情况，早期检测妊娠期妇女HR-HPV感染情况极为必要，能够有效诊断其宫颈病变严重程度，及时采取治疗措施，最大程度保证妊娠期妇女生命健康。本研究主要探讨妊娠期妇女子宫体检感染病毒种类、HR-HPV载量及预后情况，现将结果报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2017年6月至2019年6月在武穴市第一人民医院妇产科进行子宫体检的218例妊娠期妇女为研究对象。根据第二代杂交捕获法(HC-2)检测结果，将所有妇女分为正常组(31例)、低度鳞状上皮内瘤变(LSIL)组(58例)、高度鳞状上皮内瘤变(HSIL)组(84例)和宫颈癌组(45例)。纳入标准：①无免疫系统疾病者；②资料完整且依从性高者。排除标准：①合并其他恶性肿瘤者；②接受过治疗、化疗或宫颈手术者。正常组妇女年龄21～42岁，平均(30.32±6.28)岁；体质量指数(BMI)平均(25.51±3.28)kg/m2；有孕史12例，无孕史19例。LSIL组妇女年龄21～43岁，平均(31.05±6.34)岁；BMI平均(25.59±3.26)kg/m2；有孕史27例，无孕史31例；宫颈炎33例，CIN I 25例。HSIL组妇女年龄22～43岁，平均(31.47±6.51)岁；BMI平均(25.54±3.30)kg/m2；有孕史41例，无孕史43例；CINⅡ45例，CINⅢ39例。宫颈癌组妇女年龄23～44岁，平均(32.13±6.68)岁；BMI平均(25.49±3.22)kg/m2；有孕史25例，无孕史20例。四组妊娠期妇女的年龄、BMI、孕史资料比较差异均无统计学意义(P＞0.05)。本研究均经医院医学伦理委员会批准，妊娠期妇女及其家属均知情并签署同意书。

1.2 检测方法 四组妊娠期妇女统一取截石位，充分暴露宫颈外口，采用无菌消毒棉签擦拭患者宫颈分泌物，随后将宫颈刷缓慢置入患者子宫颈内，顺时针旋转5～10圈，以确保宫颈细胞充分掉落，停留5 s收集完成后取出，置入事前准备好的包含ThinPrep保存液液基瓶中，密封标记，置于4℃冰箱中待检。注意事项：标本采集应避开患者月经期；采样前1 d禁止同房、盆浴、阴道检查；采样前3 d禁止阴道用药，不得用碘液涂抹阴道口。分别于妊娠期及产后3个月，采用HC-2方法对收集的宫颈细胞或病变组织进行检测，包括HR-HPV感染种类及载量，标本数据由专业妇产科医师进行细胞收集，定量定标进行13种HR-HPV载量(包括 HPV-16、HPV-18、HPV-31、HPV-33、HPV-35、HPV-39、HPV-45、HPV-51、HPV-52、HPV-56、HPV-58、HPV-59、HPV-68)检测。检测试剂主要包括：裂解液、HPV Probe b、DR1、DR2及主要实验仪器基因杂交信号扩大仪DML2000，上述材料及仪器均采购于美国Digene公司。检测由专业医师严格按照规章制度及操作说明进行。

1.3 观察指标 比较四组妊娠期妇女HR-HPV感染种类、载量及其预后情况。HR-HPV载量以该样本的相对发光单位(RLU)/阳性对照临界值(CO)表示，阳性≥1。

1.4 统计学方法 应用SPSS18.0统计软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差(x-±s)表示，组间两两比较采用t检验，三组及以上比较采用单因素方差分析，计数资料比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 四组妊娠期妇女HR-HPV感染情况比较 正常组妇女的感染类型主要为HPV-31、HPV-33、HPV-35，LSIL组、HSIL组和宫颈癌组的感染类型主要为HPV-16、HPV-18；LSIL组、HSIL组和宫颈癌组的单一感染率和多重感染率均明显高于正常组，且宫颈癌组的单一感染率明显高于LSIL组、HSIL组，HSIL组的单一感染率明显高于LSIL组，宫颈癌组的多重感染率明显高于LSIL组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 四组妊娠期妇女的HR-HPV感染情况比较[例(%)]

2.2 四组妊娠期妇女的HR-HPV载量情况比较 LSIL组、HSIL组和宫颈癌组的HR-HPV载量均明显高于正常组，且宫颈癌组的HR-HPV载量明显高于LSIL组、HSIL组，HSIL组的HR-HPV载量明显高于LSIL组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表2。

表2 四组妊娠期妇女的HR-HPV载量情况比较(±s)

表2 四组妊娠期妇女的HR-HPV载量情况比较(±s)

注：与正常组比较，a P＜0.05；与LSIL组比较，b P＜0.05；与HSIL组比较，c P＜0.05。

组别正常组LSIL组HSIL组宫颈癌组F值P值例数31 58 84 45 HR-HPV载量(pg/mL)32.51±6.84 296.43±74.18a 393.27±103.45ab 738.64±167.16abc 9.925 0.001

2.3 四组妊娠期妇女预后比较 产后3个月，LSIL组、HSIL组和宫颈癌组的单一感染率和多重感染率均明显高于正常组，且宫颈癌组的单一感染率明显高于LSIL组、HSIL组，HSIL组的单一感染率明显高于LSIL组，宫颈癌组的多重感染率明显高于LSIL组；LSIL组、HSIL组和宫颈癌组的自然转阴率均明显低于正常组，且宫颈癌组的自然转阴率明显低于LSIL组、HSIL组，HSIL组的自然转阴率明显低于LSIL组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表3。

表3 四组妊娠期妇女预后比较[例(%)]

3 讨论

宫颈癌的发病部位常见于宫颈管柱状上皮和宫颈阴道部上皮交界处，该部位极易受损，外界刺激和感染情况较为严重，使得该处细胞发生不典型上皮增殖，并随时间发展由病变最终演化为宫颈癌[6-7]。人类乳头瘤病毒(HPV)是球型外科病毒，能够寄生于妇女受损宫颈上皮，使宫颈上皮长期处于感染状态无法康复，导致上皮细胞发生不典型增殖，引起不同程度的上皮瘤变，最终演化成为宫颈癌[8-9]。根据HPV亚型可将宫颈癌CIN关系分为：高危型和低危型，高危型包含HPV-16、HPV-18、HPV-31、HPV-33、HPV-35、HPV-39、HPV-45、HPV-51、HPV-52、HPV-56、HPV-58、HPV-59、HPV-68，低 危 型 包 含 HPV-6、HPV-11、HPV-40、HPV-42、HPV-43、HPV-44、HPV-54、HPV-61、HPV-70、HPV-72、HPV-81[10]。妊娠期妇女性激素水平发生极大变化，生殖道内环境以及免疫功能受到影响，且感染症状不明确，多呈现隐匿性与潜伏性，不易引起女性重视，导致患者错过最佳诊断时机[11]。因此，对妊娠期妇女开展HR-HPV感染种类及载量检测是诊断宫颈癌并做到积极防治的重中之重。

本研究采用HC-2方法检测所有研究对象妊娠期及产后3个月HR-HPV感染种类、载量，结果显示31例正常妇女和187例宫颈病变妇女妊娠期及产后3个月，检测 HR-HPV 种类包含 HPV-16、HPV-18、HPV-31、HPV-33、HPV-35、HPV-39、HPV-45、HPV-51、HPV-52、HPV-58、HPV-68等11个类型，其中正常妇女的感染类型主要为HPV-31、HPV-33、HPV-35，宫颈病变妇女的感染类型主要为HPV-16、HPV-18。除此之外，宫颈病变妇女的单一感染率和多重感染率均明显高于正常妊娠期妇女，且宫颈病变妇女的感染率随其病变严重程度而不断升高，说明妊娠期妇女宫颈病变与HR-HPV感染具有相关性，病变程度越严重，其感染率越高。

在临床治疗当中，单纯通过HR-HPV感染阳性或阴性进行宫颈癌患者及高危人群筛查仍存在不确定性与局限性，通常大部分妇女出现HPV感染时都会在短时间内消失，仅有少数妇女处于持续感染阶段，并且存在患有宫颈癌的可能[12]。近些年来，随着研究的进一步深入，在HR-HPV感染率和种类检测的基础上联合HR-HPV载量检测，开始逐渐应用于妊娠期妇女宫颈癌检测诊断当中。本研究发现，宫颈病变妇女的HR-HPV载量明显高于正常妊娠期妇女，且宫颈病变妇女的HR-HPV载量随其病变严重程度而不断增加，这一结果表明HR-HPV载量能够影响到妊娠期妇女是否出现宫颈癌病变，HR-HPV载量与宫颈病变存在剂量-效应关系。产后3个月，宫颈病变妇女的单一感染率和多重感染率均明显高于正常妊娠期妇女，且宫颈病变妇女的感染率随其病变严重程度而不断升高；宫颈病变妇女的自然转阴率均明显低于正常妊娠期妇女，且宫颈病变妇女的自然转阴率随其病变严重程度而不断降低，说明妊娠期妇女宫颈病变程度越严重，其预后情况越差，而妊娠期妇女HR-HPV感染种类及载量的检测有利于其病情的早期诊断，有及时采取治疗措施防治宫颈癌、促进预后等积极作用。

综上所述，HPV-16和HPV-18是妊娠期宫颈病变患者HR-HPV感染的主要类型，患者宫颈病变程度越严重，其HR-HPV感染种类及载量越多；且妊娠期妇女HR-HPV感染率及载量越高，其预后情况越差，检测妊娠期妇女HR-HPV感染种类及载量对其早期诊断、治疗及预后具有重要意义。