气相色谱检测韭菜中腐霉利的残留量前处理条件优化
2020-08-07北海市食品药品检验所
□ 张 铨 北海市食品药品检验所
腐霉利是一种常用的农作物杀菌药物。对于蔬菜灰霉病和菌核病有较好的防治效果，且持效期长，能有效阻止病斑的发展。近年来，由于韭菜种植中腐霉利的违规使用和社交媒体频繁曝光的韭菜中腐霉利超标问题，消费者对韭菜形成了不好的印象[1]。人体摄入的农药达到一定量时，可能会对身体产生不好的影响。所以，针对农药残留量进行检测尤为重要，关系广大群众的饮食安全[2]。国家标准GB 2763—2016 要求，韭菜中的腐霉利残留量按照标准NY/T 761—2008 第2部分方法二进行测定。本研究在借鉴标准、文献的基础上，针对腐霉利残留检测前处理进行优化，缩短检验时间，提高检验工作效率。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
腐霉利（100 μg/mL）、氯化钠、乙腈（分析纯）、乙腈（色谱纯）与正己烷（色谱纯）。
1.2 仪器与设备
Agilent 7890B 气相色谱仪美国安捷伦科技有限公司；匀浆机江苏金坛市亿通电子有限公司；氮吹仪天津市恒奥科技发展有限公司。
1.3 方法
1.3.1 标准工作溶液的配制
准确量取腐霉利标准溶液（100 μg/mL）1 mL 放入100 mL 容量瓶中，用正己烷（色谱纯）定容到刻度线，保存于20 ℃环境中。
1.3.2 优化后的样品前处理方式
在100 mL 离心管中加入25.0 g韭菜试样和50 mL 乙腈（分析纯）混匀，使用匀浆机对其匀浆5 min。匀浆后使用快速滤纸过滤，收集滤液。收集到的滤液转移到装有5 g 氯化钠的100 mL 离心管中。为避免溶液泄漏，必须将盖子旋紧，然后震荡3 min 后静置。当发现溶液明显分层时，从分层溶液中准确量取10 mL 乙腈溶液，转移到15 mL 离心管中。将离心管放入氮吹仪中，水浴锅温度设置为40 ℃，氮吹浓缩至近干。再用正己烷（色谱纯）准确定容至5.0 mL，震荡混匀后，用0.2 μm 滤膜过滤，待测。
1.3.3 仪器条件
1.3.3.1 进样信息
载气为氮气采用直接进样法进样体积为1.0 μL 分流比为10 ∶1，进样口温度为200.0 ℃。
1.3.3.2 色谱信息
色谱柱为弹性石英毛细管柱60 m×250 μm×0.25 μm，DB—1，程序升温设置为初始150 ℃，保持2 min，以6 ℃/min 升温至270 ℃，保持13 min，设置为恒流1.0 mL/min。
1.3.3.3 检测器信息
检测器为ECD，检测器温度为320.0 ℃，尾吹气流量为60 mL/min。
2 检测结果比较
2.1 两种前处理条件的比较，见表1。
2.2 两种前处理条件下样品回收率的对比实验
表1 优化后的前处理条件与NY/T 761-2008 前处理条件的比较
2.2.1 按优化前处理条件处理的回收率测定
称取阴性韭菜试样进行腐霉利添加回收率试验，添加浓度分别0.01、0.02、0.03 mg/kg 3 个水平，按“1.3.2”进行前处理，每个浓度按“1.3.3”进行测定3 次，结果见表2。
表2 优化后的回收率测定结果
2.2.2 按NY761-2008 进行前处理的样品回收率
称取阴性韭菜试样进行腐霉利添加回收率试验，添加浓度分别0.01、0.02、0.03 mg/kg 3 个水平，按标准NY/T 761—2008 第2 部分方法进行前处理，每个浓度按“1.3.3”进行测定3 次，结果见表3。
表3 按NY761-2008 进行前处理的样品回收率
2.3 最低检测浓度
称取阴性样品，按“步骤1.3.2”前处理，按“步骤1.3.3”上机测定，以基线噪音的3 倍计算，测得腐霉利最低检出浓度为0.01 mg/kg。
3 讨论
NY/T 761—2008 前处理条件需要用到的试剂种类多，用量大，步骤繁琐，且过滤需要用到弗罗里矽柱，容易造成样品中腐霉利损失，所以本前处理方法对这些地方进行了优化，省去了弗罗里矽柱活化、过滤等步骤，减少了操作步骤和试剂消耗，缩短了前处理时间。
按本优化方法进行前处理后，检测回收率为92.0%～96.3%，相对标准偏差为0.4%～1.3%；按标准NY/T 761—2008 第2 部分方法进行前处理后测定的回收率为89.0%～103.0%，相对标准偏差为0.6%～1.7%。对比两种方法的实验回收率和相对标准偏差，相差不大，符合检测要求。
4 结论
本研究在标准NY/T 761—2008 基础上对前处理条件加以优化，并与原标准方法进行对比实验，实验结果显示测定结果相差不大，能满足检测要求。同时，原标准前处理需要用到弗罗里矽柱，成本高，耗时长，而本优化方法在保证最低检出限、加样回收率和精密度等均能达到检验要求的前提下，无需弗罗里矽柱，缩短了实验前处理的时间，降低了检测成本，同时避免了过柱提取过程中腐霉利的损失。能够满足日常大批量检验任务的需求。
