裂殖壶菌替代鱼粉对杂交鳢生长性能、形体指标及肌肉营养组成的影响

曾 娟 ， 高启平 *， 任秀芳

（1.通威股份有限公司，四川成都 610041；2.水产健康养殖四川省重点实验室，四川成都 610041）

裂殖壶菌，又名裂殖壶藻，是一类富含n-3不饱和脂肪酸（DHA）且易于规模化培养的海洋真菌。因其富含多不饱和脂肪酸、色素、角鲨烯等多种生物活性成分，而被广泛应用于水产养殖中（曾娟等，2015）。由于裂殖壶菌最早大规模应用是作为鱼油替代产品用于食品中，如婴幼儿奶粉、保健品等（陈殊贤等，2013），从而导致目前其在国内外水产养殖中的应用研究也主要聚集在裂殖壶菌油脂替代鱼油方面 （潘瑜等，2016；Ganuza等，2008；Matthew 等，2007），而对其作为蛋白原料替代鱼粉方面的研究鲜有报道。

杂交鳢是以乌鳢为父本，斑鳢为母本获得的杂交子一代，与亲本相比，具有肉质好、无肌间刺、生长速度快、产量高、能摄食人工配合饲料等优点，是目前餐桌上热门的淡水鱼类食品（王国霞，2019；邹礼根等，2011）。因其饲料中鱼粉用量较多，而近年鱼粉价格居高不下，致使大量植物蛋白应用其中，导致饲料适口性差，最终影响杂交鳢生长（林仕梅等，2018）。为此，本试验以杂交鳢为研究对象，研究膨化饲料中以裂殖壶菌替代鱼粉对其生长性能、形体指标和肌肉营养组成的影响，为裂殖壶菌在水产饲料中的规模化应用和新型蛋白源的开发提供新思路和理论数据参考。

1 材料与方法

1.1 试验饲料 本试验所选用裂殖壶菌粉、鱼粉的营养成分及含量见表1，其中裂殖壶菌粉由通威股份生产所得。试验以含24%鱼粉的饲料为基础饲料，分别在其基础上添加0.0%、2.5%、5.0%、10.0%裂殖壶菌粉，以替代基础饲料中0.0%、1.0%、2.0%、4.0%的鱼粉，配制成4种等氮、等脂、等蛋氨酸、等赖氨酸的试验饲料，并分别记为S1（0.0%）、S2（2.5%）、S3（5.0%）、S4（10.0%）组，试验饲料的组成及营养水平见表2。所有饲料原料均过80目筛，用5.0 mm粒径模板制成膨化饲料，烘干后备用。

表1 裂殖壶菌粉与鱼粉的常规营养成分及氨基酸组成%

1.2 试验设计和饲养管理 试验选择同一批体格健康、规格整齐的一冬龄杂交鳢720尾，初始均重约为567 g，随机分为4组，分别投喂试验饲料S1（0.0%）、S2（2.5%）、S3（5.0%）、S4（10.0%），每组4个重复，每个重复45尾鱼，饲养在室外池塘网箱（2 m×2 m×2 m）中。饲养周期为 8周。试验期间每日投喂2次（9:00和 17：00），日投喂量为其体重的1%～4%。试验期间平均水温为26°C左右，溶氧浓度为5.0 mg/L以上，pH为8.0左右，氨氮浓度≤0.2 mg/L。

1.3 样品制备与分析计算公式 饲养试验结束后，禁食24 h，以网箱为单位计杂交鳢尾数并称总重，然后每个重复随机取3尾雄鱼和3尾雌鱼分别测定体重、体长，解剖取出内脏，分离肝胰脏并称重。雄鱼去皮后，取大身中段肌肉混样，测定肌肉营养组成。主要指标计算与测定方法如下：

初始均重/（g/尾）=初始鱼总重/初始鱼尾数；

终末均重/g=终末鱼总重/终末鱼尾数；

表2 试验饲料组成及营养水平%

成活率/%=试验结束时鱼尾数/试验开始时鱼尾数×100；

增重率/%=（终末鱼重+死亡鱼重量－初始鱼重量）/初始鱼重量×100；

特定生长率/%=（ln终末均重量－ln初始均重量）/饲喂天数×100；

蛋白质效率=试验鱼增重/（试验鱼饲料摄食量×饲料蛋白含量）；

饲料系数=投饲量/增重量；

肥满度/%=（试验鱼体重/试验鱼体长3）×100；

脏体比/%=试验鱼内脏重/试验鱼体重×100；

空腔比/%=空腔重（g）/体重（g）×100；

肝体比/%=试验鱼肝脏重/试验鱼体重×100。

肌肉的水分、粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分、氨基酸组成和脂肪酸组成按照国标GB 5009.3-2016、GB 5009.5-2016、GB 5009.6-2016（第一法）、GB 5009.4-2016（第一法）、GB 5009.124-2016和 GB 5009.168-2016（第三法）方法测定。

1.4 统计分析 采用SPSS 23.0对各组数据进行单因素方差分析（One-way ANOVA），采用 Duncan’s进行多重比较，检验均值的差异显著性，用P＜0.05表示，结果数据用“平均数±标准差”表示。

2 结果与分析

2.1 裂殖壶菌替代鱼粉对杂交鳢生长性能的影响 由表3可知，经过56 d的养殖试验，各组间的饲料系数、特定生长率、蛋白质效率、增重率和存活率无显著差异 （P＞0.05）。随着裂殖壶菌用量的增加，饲料系数呈先下降后上升的趋势，蛋白质效率和增重率呈先上升后下降的趋势，裂殖壶菌用量为5.0%时，生长性能开始低于对照组。

表3 试验饲料对杂交鳢生长性能及饲料蛋白质效率的影响

2.2 裂殖壶菌替代鱼粉对杂交鳢形体指标的影响 由表4可知，随着裂殖壶菌用量的增加，在雄鱼中，肥满度先下降后上升，裂殖壶菌用量为5.0%时，肥满度显著低于其他各组（P＜0.05），其他各组间差异不显著（P＞0.05）；脏体比和肝体比逐渐降低，空腔比逐渐升高，裂殖壶菌用量为10.0%时，脏体比显著低于对照组，空腔比显著高于对照组 （P＜0.05），各组间肝体比差异不显著（P＞0.05）。在雌鱼中，裂殖壶菌替代鱼粉对杂交鳢肥满度、脏体比、肝体比无显著影响（P＞0.05）。

2.3 裂殖壶菌替代鱼粉对杂交鳢肌肉营养组成的影响 由表5可知，使用裂殖壶菌替代部分鱼粉后，对杂交鳢肌肉水分、粗蛋白质、粗灰分没有明显影响。其中，随着裂殖壶菌用量的增加，粗脂肪含量呈先上升后下降再上升趋势，当裂殖壶菌用量为2.5%、10.0%时明显高于对照组，用量为5.0%时含量最低。

表4 试验饲料对杂交鳢形体指标的影响%

表5试验饲料对杂交鳢肌肉中常规营养成分的影响g/100 g

2.4 裂殖壶菌替代鱼粉对杂交鳢肌肉氨基酸和脂肪酸的影响 由表6可知，使用裂殖壶菌替代部分鱼粉后，杂交鳢肌肉中赖氨酸、精氨酸、鲜味氨基酸、必需氨基酸、非必需氨基酸、总氨基酸及必需氨基酸在总氨基酸中的占比含量均有略微提高。

由表7可知，随着裂殖壶菌用量的增加，杂交鳢肌肉中总脂肪酸、饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸的含量均呈先上升后下降再上升趋势，当裂殖壶菌用量为5.0%时含量最低，使用裂殖壶菌组DHA含量均高于对照组。

3 讨论

3.1 裂殖壶菌替代鱼粉对杂交鳢生长性能的影响 快速增长和低饲料系数是水产养殖的终极目标。本研究结果显示，饲料中使用裂殖壶菌替代部分鱼粉，对杂交鳢的生长性能无显著影响，但当替代用量超过5.0%时对生长性能有负面影响，说明一冬龄杂交鳢饲料中可以使用裂殖壶藻粉替代部分鱼粉，但高水平替代具有局限性。裂殖壶菌富含DHA，而DHA是水产动物生长必需但又无法自身合成的脂肪酸。已有研究表明，添加一定量的裂殖壶菌可提高斑点叉尾鮰、刺参、对虾、鲤鱼等的生长性能，可过量添加则会影响动物的生长（刘宏超等，2016； 黄亮华等，2014； 焦建刚等，2014；Li等，2009）。本试验结果趋势与上述研究成果一致。但因饲料配方、裂殖壶菌营养成分、鱼种及规格等不同，则适宜替代用量不同。由表1可知，裂殖壶菌的粗蛋白质、氨基酸、钙、磷含量明显低于鱼粉，虽然平衡了粗蛋白质、蛋氨酸、赖氨酸等主要营养指标，但其他氨基酸、钙、磷以及鱼粉中的未知生长因子含量因鱼粉的替代而下降，可能是影响生长的主要原因，潘瑜（2016）在海鲈上用裂殖壶菌替代鱼油及李贤（2012）在泥鳅上用蝇蛆粉替代鱼粉的研究结果也证明如此。

表6 试验饲料对杂交鳢肌肉中氨基酸的影响

3.2 裂殖壶菌替代鱼粉对杂交鳢形体指标的影响 鱼体的肥满度是衡量鱼体肥瘦程度和生长情况的一个指标，同时也影响鱼体的商品价值。肝体比则是评价鱼体健康程度的重要指标（王国霞等，2019）。杂交鳢性别不同，形体指标差异较大。本研究结果显示，饲料中使用裂殖壶菌替代部分鱼粉，对杂交鳢雄鱼的形体指标有一定影响，对雌鱼的影响不显著。在雄鱼中，除裂殖壶菌替代鱼粉用量5.0%组外，其他各组肥满度差异不显著，并随着裂殖壶菌替代用量的增加，脏体比和肝体比呈下降趋势，其中10.0%组的脏体比、肝体比明显低于其他各组，说明饲料中使用一定量的裂殖壶菌替代部分鱼粉，对杂交鳢的形体指标无显著影响，甚至还有一定积极作用。裂殖壶菌富含n-3多不饱和脂肪酸，其能抑制脂类合成，促进脂类分解，降低肝脂和血脂。马晶晶（2009）、朱庆国（2012）等研究结果均表明饲料中高水平的n-3 PUFA可抑制鱼体内脏中脂肪的沉积，从而使肝体、脏体指数下降，与本研究结果一致。

表7 试验饲料对杂交鳢肌肉中脂肪酸的影响

3.3 裂殖壶菌替代鱼粉对杂交鳢肌肉营养组成的影响 已有研究表明，饲料的营养组成密切影响鱼体的营养组成，蛋白质量、氨基酸及脂肪酸组成等均对脂肪在鱼体内的吸收和沉积有影响 （李贤等，2012）。本试验结果显示，随着裂殖壶菌用量的增加，对杂交鳢肌肉中的水分、粗蛋白质、粗灰分均没有负面影响，粗脂肪、SFA、MUFA及PUFA的含量均呈先上升后下降再上升趋势。当裂殖壶菌用量为5.0%时，除DHA外，其余脂肪酸含量均低于对照组。说明在杂交鳢饲料中使用一定量的裂殖壶菌替代部分鱼粉，对肌肉脂肪及其组成有一定影响，其中对PUFA尤其是DHA的沉积有一定积极作用。不饱和脂肪酸具有降血糖、调节血脂和降低胆固醇等作用，PUFA中的DHA更具有提高脑细胞的活性、增强记忆力和思维能力的作用（陈秀丽等，2016）。刘兴旺（2007）研究结果表明，饲料中不同水平n-3 PUFA对军曹鱼肌肉常规营养成分含量无显著影响，但可促进n-3 PUFA的积累。钟国防（2016）研究结果也显示，随着对虾饲料中添加裂殖壶菌的增加，肌肉中常规营养成分含量无显著差异，就数值而言，粗脂肪含量趋势与本试验结果一致，并且在脂肪酸组成中，PUFA含量也呈先上升后下降趋势。这都与朱庆国（2012）的研究结论相符，n-3 PUFA可促进鱼体肌肉中脂肪的沉积，但可抑制内脏中脂肪的沉积。与肝体指数变化也相对应。

蛋白质是肌肉的主要组成成分，而蛋白质又是由氨基酸组成的，因此氨基酸的含量及组成决定了蛋白质的结构与性质，从而决定了肌肉的品质。试验数据显示，使用裂殖壶菌替代部分鱼粉后，杂交鳢肌肉中粗蛋白质、赖氨酸、精氨酸、鲜味氨基酸、必需氨基酸、非必需氨基酸及总氨基酸含量均高于对照组，而必需氨基酸在总氨基酸中的占比与对照组无差异，说明饲料中添加裂殖壶菌可以一定程度提高生鱼肌肉中的营养指标及其风味，从而改善鱼肉品质，其原因可能与裂殖壶菌中的有关成分能促进蛋白质代谢有关，具体原因有待进一步研究。

4 结论

在饲料中使用裂殖壶菌等氮、等脂、等蛋氨酸、等赖氨酸替代部分鱼粉，对杂交鳢的生长性能无显著影响，但能一定程度改善其肝体指数及肌肉品质。综合考虑各项指标，建议替代鱼粉用量不宜超过5.0%。