酶联免疫吸附试验检测梅毒抗体假阳性的原因探讨

2020-08-03王颖娴陈媛媛赵帆

今日健康 2020年4期

王颖娴陈媛媛赵帆

（西安交通大学第一附属医院检验科，陕西西安，710061）

梅毒是一种对人体健康有严重伤害的性传播性疾病，该病症从根本上来说是苍白螺旋体（Treponemapallidum）感染所导致的，基于其传播途径，可分为先天性和后天性两种。其中，前者就是传播途径就是胎盘传播，所以胎儿分娩后就体内就具有此病毒；后者的传播途径则是因为不洁性行为、间接接触等[1]。数据统计表明，梅毒近年来在我国的发病率有所上升，在万分之三到万分之四之间。梅毒是一种全年龄段均可感染发病的疾病，实际患者主要集中在20-40 岁群体中[2]。梅毒如果没有得到有效控制，会造成患者多器官功能障碍，具有很高的致死率。所以要尽量做到早检查、早治疗。当前，检测梅毒采用的主要方法是酶联免疫吸附试验。然而该方法使用以来，有一定概率会出现假阳性结果。为了进一步分析酶联免疫吸附试验检测梅毒抗体假阳性的原因，我院展开此次临床研究，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

以我院2018 年1 月至2019 年12 月期间11238 例接受梅毒抗体检测的血清标本为对象展开分析。全部血清标本来自于6055 例男性和5183 例女性，年龄最小者仅有1 岁，最大者95岁，平均年龄为（55.4±2.1）岁。全部参与测试的研究对象（家属）均对本次研究知情同意，并且其中不包括恶性肿瘤疾病患者和严重脏器功能衰竭患者。

1.2 方法

所有参与研究的受试者，均为空腹状态下接受采血。共采集静脉血5ml 并均分为两份，分别实施酶联免疫吸附试验检测（ELISA）和梅毒特异性抗体检测（TPPA）检测。本次研究中，所使用的酶标仪由深圳雷度生命科技公司提供，相关检测试剂来自于上海科华生物。

1.3 观察指标

对比两组方法得出的阳性率和阴性率，并就酶联免疫吸附试验检测得出的假阳性样本展开进一步分析，找出造成假阳性的主要原因。

1.4 统计学方法

使用SPSS20.0 对研究中两组患者的相关指标展开统计分析，计量数据运用t 检验，计数数据运用χ2 检验，以P＜0.05作为差异具有统计学意义的判断标准。

2 结果

2.1 两种方法的检测结果

如下表1 中数据所示，相比于梅毒特异性抗体检测的结果，酶联免疫吸附试验检测的阳性率0.58%略高，但两种方式的阳性率无统计学差异，P＞0.05。

表1 两种方法的检测结果对比

2.2 酶联免疫吸附试验假阳性原因分析

经过分析，本次检验中采用酶联免疫吸附试验检测11238例血液样本，共出现了65 例阳性结果，其中21 例为假阳性结果。

通过对假阳性结果展开深入分析，总结其原因有如下几点：11例（0.098%）假阳性是由于年龄因素影响,所占比例最高；5 例（0.046%）假阳性是由于样本因素影响，3 例（0.027%）假阳性是由于疾病因素影响，2 例（0.018%）假阳性是由于螺旋体共生因素影响，占比最少。

3 讨论

3.1 梅毒病毒及酶联免疫吸附试验

就当前对于梅毒的相关研究来看，梅毒螺旋体具有非常规律的生长发育周期，通常会经历三个使其，分别为颗粒期、球形体期和螺旋体期；并且梅毒病毒有非常强的繁殖能力，30 个小时即可有一倍的增长量。梅毒病毒的不同发育周期，直接决定了其处于潜伏还是发作状态，以及其症状表现、危害性等等。研究结果表明，梅毒螺旋体是一种典型的厌氧菌，所以在外界生活的能力非常弱，特别是对各种化学药品有极高的敏感性，在体外环境几乎无法存活；而且梅毒病毒在光照环境、干燥环境均会快速死亡，这也导致此病毒难以通过器形传播[3]。但是，梅毒病毒是一种潜伏期非常长的病毒，这也是其危害性较高的重要原因，研究表明，没梅毒病毒感染两年后，其依然可以通过胎盘传播。所以强化梅毒病毒检测，对于一直其蔓延有非常重要的意义。当前，我国已经将梅毒螺旋体作为孕前保健、献血的重要检测项目，就是为了有效抑制其传播。

当前，我国在实施梅毒检测的过程中，绝大部分地区的卫生机构，使用的方法都是酶联免疫吸附试验，通过酶联免疫吸附和双抗原夹心法来实施检测，从而对患者是否受梅毒感染作出判断[4]。这种方法降压相对简单，所以受到了广泛的应用。本次实验中，酶联免疫吸附试验检测的阳性率0.58%略高于梅毒特异性抗体检测的0.39%，但两种方式的阳性率无统计学差异，P＞0.05。这充分体现了该方法所具有的价值。但是，随着该方法大范围展开应用，逐渐发现存在这一定比例的假阳性结果，本次研究结果中也体现出了这一点。这也迅速引起了临床上的高度重视，检测的假阳性结果容易造成不良的效应，尤其是当前我国梅毒发病率逐渐提升的背景下，检测结果的准确率对于控制梅毒有非常重要的影响。所以，针对酶联免疫吸附试验假阳性结果展开原因分析，具有非常重要的显示意义。

3.2 酶联免疫吸附试验假阳性原因分析

本次检验中采用酶联免疫吸附试验检测11238 例血液样本，共出现了65 例阳性结果，其中21 例为假阳性结果。这也充分证明了酶联免疫吸附试验检测梅毒抗体的确有一定的概率会得到假阳性结果。就导致酶联免疫吸附试验检测梅毒抗体假阳性的原因来看，年龄因素、样本因素、疾病因素和螺旋体共生因素，分别有11 例、5 例、3 例和2 例。

（1）年龄因素。本次研究中，11 例患者因为年龄因素而出现假阳性。患者及未表现出相关症状，也没有发病史与接触史，但是检验结果却呈现出阳性。这样的结果的原因就是因为年龄造成的。人体机能会随着年龄的增加而逐渐衰退，各器官都会逐渐表现出衰退迹象，免疫功能也会出现明显的迹象，这种情况下人体就会易产生一些针对连接用的白蛋白的抗体或一些异常蛋白质，这就会对检测结果造成影响[5]。因为酶联免疫吸附试验，就是通过检测特异性蛋白抗来作出判断的，所以对于老年受检者来说，会由于本身的白蛋白抗体、异常蛋白质，导致检测结果出现假阳性。

（2）样本因素。样本因素同样是导致假阳性的重要因素，本次研究中11 例假阳性结果是样本因素引发的。在采用酶联免疫吸附试验检测过程中，如果对样本没有实施有效的处理，就有可能使得血液样本中纤维蛋白为完全析出；而在样本中遗留下来的纤维蛋白原，会附着在板孔成为薄膜层，或者呈絮状存在，这样也会导致检验结果呈假阳性。研究表明，因为纤维蛋白原残留而造成的假阳性，二者之间有密切的正相关性。并且完全有效吸出纤维蛋白原几乎是不可能实现的，即使提高离心强度，也无法真正实现这一效果。

（3）疾病因素。在造成酶联免疫吸附试验检测假阳性的因素中，疾病也是较为重要的因素。特别是诸如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等疾病，会造成致多克隆B 细胞活化，进而在体内分泌出一过性抗磷脂抗体，进而使得酶联免疫吸附试验结果表现为阳性。

（4）螺旋体共生因素。在本次研究中，有2 例假阳性是因为螺旋体共生因素所导致的。本次研究中涉及的研究对象有极大的年龄跨度，从1 岁的婴儿到95 岁的高龄者，所以患者体内难免会存在螺旋体共存的状况，诸如倡导螺旋体、口腔螺旋体等等；这些螺旋体的存在与检测抗原发生反应，从而使得结果表现为假阳性。

（5）其他原因。虽然本次研究结果中的假阳性原因分析仅限于上述四大类，但事实上，在检测过程中还有其他的一些原因，有可能会对结果造成影响，从而表现出假阳性。比如，标本保存问题，采集的血液样本保存不当受到细菌污染，特别是带有有内源性辣根过氧化物酶的细菌提，会对酶联免疫吸附试验结果造成影响，出现弱的假阳性；比如检测仪器问题，检测过程中使用的酶标仪，当其反应板底部有污染后，会造成吸光度值升高，进而使得检测结果出现假阳性。

所以，在采用酶联免疫吸附试验检测梅毒的过程中，如果出现可疑阳性标本，务必要认真查找干扰因素，并在此抽血复杂，而不能草率作出决定。