lncRNA RPL34-AS1通过靶向调控miR-575表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响

张敬 董杰 王秋桔 崔允巍 张辉

卵巢癌是女性常见恶性肿瘤，目前常用手术及辅助放化疗的方法进行治疗，但因手术治疗不彻底、癌细胞对化疗药物易产生耐药性，使得患者治疗效果及预后较差，随着分子生物学、遗传学及精准医学的发展，针对卵巢癌发生发展机制与分子靶向治疗成为目前研究的热点[1-2]。研究表明长链非编码RNA（Long non-coding RNA，lncRNA）参与调控了卵巢癌的恶性生物学行为，可能与卵巢癌发生发展密切相关[3]。核糖体蛋白L34 反义RNA1（ribosomal protein L34 antisense RNA1，RPL34-AS1）是新型lncRNA，定位在人类4q25染色体上，已有研究表明RPL34-AS1在结肠癌中表达降低，其低表达与结肠癌预后不良相关[4]。RPL34-AS1在食管癌中也低表达，过表达RPL34-AS1 可通过下调RPL34表达抑制食道癌细胞的增殖、迁移和侵袭[5]。然而RPL34-AS1在卵巢癌细胞中的作用及其机制尚不清楚。研究表明微小RNA（microRNA，miRNA）也参与调控卵巢癌发生发展、转移、耐药及复发等过程，与患者生存率密切相关[6]。研究发现miR-575在非小细胞肺癌细胞系中上调表达，促进非小细胞肺癌细胞的增殖及侵袭[7]。miR-575在胃癌组织和细胞中上调表达，其表达水平与肿瘤大小，美国癌症联合委员会（American Joint Committee on Cancer，AJCC）分期和预后相关，抑制miR-575表达抑制胃癌细胞增殖，促进细胞凋亡[8]。而miR-575在卵巢癌中的作用及其对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响还尚未清楚。本实验旨在研究RPL34-AS1 对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制是否与miR-575有关。

材料与方法

一、材料

1.卵巢癌细胞和来源：卵巢癌细胞株SKOV3购自中国科学院上海细胞库。选取河北省衡水市妇幼保健院妇产科2017年1月至2019年1月收治的卵巢癌肿瘤患者为研究对象。患者纳入标准：病理学诊断为卵巢癌，所有患者肿瘤均为原发性肿瘤，术前未进行过放化疗及其他靶向治疗，临床病理资料完整。排除标准：合并有其他器官、高血压、糖尿病等慢性疾病，合并有其他恶性肿瘤等，患者为卵巢癌复发，存在家族肿瘤病史的，不同意提取组织标本及病理资料不完整的。最终选取符合条件的20例患者，年龄为23～74岁，浆液性腺癌8例，黏液性腺癌4例，子宫内膜样腺癌10例,卵巢上皮细胞癌8例，病理分期Ⅰ期6例，Ⅱ期8例，Ⅲ期9例，Ⅳ期7例。通过手术切除癌组织及癌旁正常组织，其分别命名为卵巢癌组织和癌旁组织。本研究得到本院医学伦理学委员会批准（批号：20160412），且所有患者均知情且同意。

2.试剂和仪器：胎牛血清、DMEM培养基（美国Sigma公司）；RNA提取试剂盒、反转录试剂盒和荧光定量试剂盒（日本Takara公司）；LipofectamineTM2000转染试剂盒（美国Invitrogen公司）；双荧光素酶报告基因检测试剂盒（美国Promega公司）；四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）试剂盒、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素（Annexin V-FITC）和碘化丙锭（PI）试剂盒、二辛可宁酸（bicinchoninic acid，BCA）试剂盒、RIPA蛋白裂解液（碧云天生物技术研究所）；抗体（上海煊翎生物科技有限公司）；载体质粒（上海基屹生物科技有限公司）；Thermo FC酶标仪、流式细胞仪（美国Thermo公司）。

二、方法

1.细胞培养：卵巢癌细胞株SKOV3 用含10﹪胎牛血清的DMEM培养基于37℃，5﹪ CO2的恒温箱培养，每2天换液1次，细胞融合至80﹪左右时进行消化传代，选取对数生长期细胞进行实验。

2.细胞转染和分组：取对数生长期SKOV3细胞用无血清培养基同步化12 h，将pcDNA、

pcDNA-RPL34-AS1、si-NC、si-RPL34-AS1、anti-miR-NC、anti-miR-575分别转染至SKOV3胞中，记为pcDNA组、pcDNA-RPL34-AS1组、si-NC组、si-RPL34-AS1组、anti-miR-NC组、anti-miR-575组；将pcDNA-RPL34-AS1 与miR-NC、miR-575分别共转染至SKOV3胞中，记为pcDNA-RPL34-AS1+miR-NC组、pcDNA-RPL34-AS1+miR-575组；转染按照LipofectamineTM2000试剂盒进行操作。正常培养的细胞作为对照组。

3.实时荧光定量PCR（Real-time quantitative PCR，RT-qPCR）检测RPL34-AS1和miR-575表达水平：癌旁组织、卵巢癌组织和培养48 h后的细胞提取总RNA，用反转录试剂盒逆转录成cDNA，RPL34-AS1和miR-575分别以GAPDH和U6为内参进行PCR扩增，每个样品设3个重复。循环条件为95℃ 30 s，60℃ 30 s；72℃ 30 s，共40个循环；60℃延长5 min。相对表达量采用2-△△Ct法计算（表1）。

表1 引物序列信息

4.双荧光素酶报告基因实验检测RPL34-AS1对miR-575的靶向调控：构建RPL34-AS1野生型和突变型荧光素酶表达载体WT-RPL34-AS1和MUT-RPL34-AS1，用LipofectamineTM2000试剂盒将WT-RPL34-AS1、MUT-RPL34-AS1质粒分别和miR-NC和miR-575共转染到SKOV3细胞。按照说明书进行检测，实验结果以荧光素酶活性和Renilla活性的比值进行统计学分析。实验重复3次。

5.MTT试剂盒检测细胞活性：各组细胞调整细胞浓度为1×104个/mL，取100 μL 接种于96孔板，培养至24、48、72 h时，每孔分别加入20 μL的MTT溶液，在37℃培养4 h；吸弃培养液，每孔加入150 μL DMSO，每孔加入后振荡反应15 min，用酶标仪于490 nm波长处检测各孔吸光度（OD）值。细胞活性（﹪）=实验组OD值/空白对照组OD值×对照组，实验重复3次，每次3个复孔。

6.流式细胞术检测细胞凋亡：各组细胞培养48 h后用不含EDTA的胰酶消化，离心收集细胞，PBS漂洗2次，加500 μL，结合缓冲液重悬细胞。按照试剂盒说明书，先后加入Annexin V-FITC和PI 避光孵育。用流式细胞仪检测激发波长488 nm和发射波长530 nm处的荧光强度，计算细胞凋亡率。实验重复3次，每次3个复孔。

各组细胞培养48 h后收集细胞，并制备单细胞悬液，加入3 mL 预冷的70﹪乙醇固定，用PBS缓冲液洗涤后加入核糖核酸酶A（RNase A）于37℃水浴30 min，加入碘化啶（PI），避光30 min，上机检测，重复3次，每次3个复孔。用流式细胞仪和DNA细胞周期分析软件对细胞周期进行检测分析。

7.蛋白质印迹（Western blot）检测Cyclin D1、p21、Bcl-2、Bax蛋白表达水平：各组细胞培养48 h后提取细胞总蛋白，BCA试剂盒进行定量。将蛋白样品经10﹪聚丙烯酰胺凝胶电泳转移至PVDF上，用5﹪脱脂牛奶室温封闭2 h，分别加入相应的一抗，4℃孵育过夜，PBS洗涤3次，每次5 min；再加入二抗，室温孵育2 h，PBS洗涤3次，每次10min，后在暗室中曝光显影，定影，将胶片用Quantity One分析各组蛋白条带的灰度值，蛋白相对表达水平=目的条带灰度值/GAPDH条带灰度值。实验重复3次，每次3个复孔。

三、统计学分析方法

采用SPSS 20.0 软件进行统计学分析。RPL34-AS1和miR-575的表达水平，蛋白表达水平，细胞OD值，细胞凋亡率，荧光素酶活性，各细胞周期占比，细胞百分比等均以表示，两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

一、lncRNA RPL34-AS1和miR-575在卵巢癌组织中的表达

采用RT-qPCR检测卵巢癌组织中lncRNA RPL34-AS1和miR-575的表达，结果显示，与癌旁组织比较，卵巢癌组织中RPL34-AS1表达水平（1.00±0.08比0.47±0.05）降低，miR-575表达水平（1.01±0.07比3.12±0.28）升高，差异具有统计学意义（t= 25.124、32.694，P均＜0.05）（图1）。

二、lncRNA RPL34-AS1靶向调控miR-575的表达

LncBase 在线预测显示RPL34-AS1 与miR-575存在结合位点（图2）。荧光素酶报告实验结果显示，与miR-NC比较，miR-575 转染RPL34-AS1野生型表达载体的SKOV3细胞的荧光素酶活性降低（P＜0.05，表2）；而转染RPL34-AS1突变型表达载体的SKOV3细胞的荧光素酶活性差异无统计学意义。RT-qPCR检测结果显示，与pcDNA组比较，pcDNA-RPL34-AS1组miR-575表达水平降低（1.01±0.09比0.42±0.04，P＜0.05）；与si-NC组比较，si-RPL34-AS1组miR-575表达水平升高（1.00±0.08比2.87±0.27，P＜0.05）。

图1 lncRNA RPL34-AS1和miR-575在卵巢癌组织中的表达

图2 RPL34-AS1的序列中含有与miR-575 互补的核苷酸序

表2 miR-NC组和miR-575组荧光素酶相对活性（±s，n = 3）

表2 miR-NC组和miR-575组荧光素酶相对活性（±s，n = 3）

注：n实验重复次数

分组 WT-RPL34-AS1 MUT-RPL34-AS1 miR-NC组 0.99±0.08 0.97±0.09 miR-575组 0.36±0.04 0.98±0.07 t 值 21.130 0.263 P值＜0.001 0.795

三、lncRNA RPL34-AS1过表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响

与对照组和pcDNA组比较，pcDNA-RPL34-AS1组卵巢癌SKOV3细胞中RPL34-AS1表达水平升高；细胞活性降低，G1期细胞所占比例升高，S期细胞所占比例降低，细胞凋亡率升高，CyclinD1、Bcl-2表达水平降低，p21、Bax表达水平升高（P＜0.05）（图3，表3～4）。

四、抑制RPL34-AS1表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响

与对照组和si-NC组比较，si-RPL34-AS1组卵巢癌SKOV3细胞中RPL34-AS1表达水平降低，细胞活性升高，G1期细胞所占比例降低，S期细胞所占比例升高，细胞凋亡率降低，CyclinD1、Bcl-2表达水平升高，p21、Bax表达水平降低（P＜0.05），各细胞周期所占比例差异无统计学意义（P＞ 0.05）（图4，表5～6）。

五、抑制miR-575表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响

与对照组和anti-miR-NC组比较，anti-miR-575组miR-575表达水平降低，细胞活性降低，G1期细胞所占比例升高，S期细胞所占比例降低，细胞凋亡率升高，CyclinD1、Bcl-2表达水平降低，p21、Bax表达水平升高（P＜0.05）（图5，表7～8）。

六、miR-575过表达逆转了lncRNA RPL34-AS1过表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的作用

图3 lncRNA RPL34-AS1过表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响

表3 lncRNA RPL34-AS1过表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响（±s，n = 3）

表3 lncRNA RPL34-AS1过表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响（±s，n = 3）

注：与对照组比较，aP ＜0.05；与pcDNA组比较，bP ＜0.05；n实验重复次数

分组 RPL34-AS1 OD值（490 nm）细胞周期（﹪）凋亡率（﹪）24 h 48 h 72 h G1 S M对照组 1.00±0.08 0.36±0.03 0.57±0.05 0.76±0.06 31.65±3.11 33.58±3.74 34.77±3.71 7.98±0.71 pcDNA 1.00±0.09 0.35±0.03 0.54±0.05 0.73±0.07 30.54±3.03 35.69±3.54 33.77±3.47 8.36±0.84 pcDNA-RPL34-AS1 2.93±0.28a 0.31±0.03ab 0.37±0.04ab 0.51±0.05ab 54.12±5.28ab 10.74±2.02ab 35.14±3.45 20.11±2.01ab F值 360.862 7.000 47.591 45.736 102.280 168.917 0.360 244.590 P值＜0.001 0.004＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001 0.702＜0.001

表4 lncRNA RPL34-AS1过表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡相关蛋白表达的影响（±s，n = 3）

表4 lncRNA RPL34-AS1过表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡相关蛋白表达的影响（±s，n = 3）

注：与对照组比较，aP ＜0.05；与pcDNA组比较，bP ＜0.05；n实验重复次数

分组 CyclinD1蛋白 p21蛋白 Bcl-2蛋白 Bax蛋白对照组 0.81±0.08 0.23±0.03 0.69±0.06 0.20±0.02 pcDNA 0.79±0.07 0.25±0.03 0.68±0.06 0.22±0.03 pcDNA-RPL34-AS1 0.33±0.03ab 0.66±0.06ab 0.29±0.03ab 0.61±0.05ab F值 163.180 294.500 173.444 379.658 P值＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001

图4 抑制RPL34-AS1表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响

表5 抑制si-RPL34-AS1表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖、周期和凋亡的影响（±s，n = 3）

表5 抑制si-RPL34-AS1表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖、周期和凋亡的影响（±s，n = 3）

注：与对照组比较，aP ＜0.05；与si-NC组比较，bP ＜0.05；n实验重复次数

分组 RPL34-AS1 OD值（490 nm）细胞周期（﹪）凋亡率（﹪）24h 48h 72h G1 S M对照组 1.00±0.09 0.37±0.03 0.56±0.05 0.74±0.07 30.65±3.11 34.28±3.51 35.07±3.66 8.98±0.98 si-NC 1.00±0.06 0.36±0.03 0.55±0.05 0.71±0.06 32.15±2.11 34.69±3.41 33.16±3.24 9.25±0.91 si-RPL34-AS1 0.51±0.05ab 0.39±0.03 0.68±0.06ab 0.99±0.08ab 13.42±1.38ab 53.75±5.22ab 32.83±3.57 4.31±0.42ab F值 152.176 2.333 16.430 42.826 182.468 65.266 1.078 106.003 P值＜0.001 0.119＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001 0.356＜0.001

表6 抑制si-RPL34-AS1表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡相关蛋白表达的影响（±s，n = 3）

表6 抑制si-RPL34-AS1表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡相关蛋白表达的影响（±s，n = 3）

注：与对照组比较，aP ＜0.05；与si-NC组比较，bP ＜0.05；n实验重复次数

分组 CyclinD1蛋白 p21蛋白 Bcl-2蛋白 Bax蛋白对照组 0.68±0.06 0.31±0.03 0.59±0.05 0.33±0.03 si-NC 0.71±0.07 0.29±0.03 0.61±0.06 0.31±0.03 si-RPL34-AS1 0.92±0.08ab 0.13±0.02ab 0.86±0.07ab 0.19±0.02ab F值 30.987 119.455 55.555 70.364 P值＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001

图5 抑制miR-575表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响

与pcDNA组比较，pcDNA-RPL34-AS1组卵巢癌SKOV3细胞中miR-575表达水平降低，细胞活性降低，G1期细胞所占比例升高，S期细胞所占比例降低，细胞凋亡率升高，CyclinD1、Bcl-2表达水平降低，p21、Bax表达水平升高（P＜0.05）；与pcDNA-RPL34-AS1+miR-NC组比较，pcDNA-RPL34-AS1+miR-575组卵巢癌SKOV3细胞中miR-575表达水平升高，细胞活性升高，G1期细胞所占比例降低，S期细胞所占比例升高，细胞凋亡率降低，CyclinD1、Bcl-2表达水平升高，p21、Bax表达水平降低（P＜0.05）（图6，表9～10）。

表7 抑制miR-575表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖、周期和凋亡的影响（±s，n = 3）

表7 抑制miR-575表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖、周期和凋亡的影响（±s，n = 3）

注：与对照组比较，aP＜0.05；与anti-miR-NC组比较，bP＜0.05；n实验重复次数

分组 miR-575 OD值（490 nm）细胞周期（﹪）凋亡率（﹪）24h 48h 72h G1 S M对照组 1.00±0.06 0.36±0.04 0.57±0.05 0.77±0.06 31.21±3.12 35.69±3.44 33.10±3.54 6.98±0.71 anti-miR-NC 1.01±0.08 0.34±0.03 0.56±0.05 0.74±0.07 32.14±3.12 34.69±3.12 33.65±3.12 7.45±0.74 anti-miR-575 0.47±0.04ab 0.33±0.03 0.41±0.04ab 0.57±0.05ab 50.36±5.11ab 17.50±1.64ab 32.14±3.31 17.69±1.76ab F值 222.129 1.853 32.864 28.555 69.064 113.723 0.449 238.359 P值＜0.001 0.179＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001 0.644＜0.001

表8 抑制miR-575表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡相关蛋白表达的影响（±s，n = 3）

表8 抑制miR-575表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡相关蛋白表达的影响（±s，n = 3）

注：与对照组比较，aP＜0.05；与anti-miR-NC组比较，bP＜0.05；n实验重复次数

分组 CyclinD1蛋白 p21蛋白 Bcl-2蛋白 Bax蛋白对照组 0.79±0.07 0.24±0.03 0.68±0.06 0.20±0.02 anti-miR-NC 0.77±0.07 0.26±0.03 0.69±0.06 0.21±0.03 anti-miR-575 0.38±0.03ab 0.61±0.06ab 0.33±0.03ab 0.57±0.05ab F值 134.832 216.500 140.111 315.711 P 值＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001

图6 miR-575过表达逆转lncRNA RPL34-AS1过表达对卵巢癌SKOV3细胞和凋亡的作用

表9 miR-575过表达逆转了lncRNA RPL34-AS1过表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖、周期和凋亡的作用（±s，n = 3）

表9 miR-575过表达逆转了lncRNA RPL34-AS1过表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖、周期和凋亡的作用（±s，n = 3）

注：与pcDNA组比较，aP ＜0.05；与pcDNA-RPL34-AS1+miR-NC组比较，bP ＜0.05；n实验重复次数

分组 miR-575 OD值（490 nm）细胞周期（﹪）凋亡率（﹪）24h 48h 72h G1 S M pcDNA 1.00±0.09 0.36±0.03 0.58±0.05 0.76±0.07 31.65±3.11 33.58±3.41 34.77±3.42 7.98±0.77 pcDNA-RPL34-AS1 0.49±0.04a 0.32±0.03a 0.38±0.03a 0.52±0.05a 53.12±5.22a 11.23±1.28a 35.65±3.14 20.14±2.02a pcDNA-RPL34-AS1+miR-NC 0.47±0.05 0.30±0.03 0.36±0.04 0.49±0.04 55.69±5.13 10.21±1.20 34.10±3.46 21.65±2.11 pcDNA-RPL34-AS1+miR-575 0.88±0.07b 0.35±0.03b 0.52±0.05b 0.69±0.06b 40.35±4.11b 28.14±2.54b 31.54±3.26 12.06±1.22b F值 153.684 7.583 55.040 48.857 56.892 238.197 2.548 144.410 P值＜0.001 0.006＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001 0.073＜0.001

表10 miR-575过表达逆转了lncRNA RPL34-AS1过表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡相关蛋白表达的作用（±s，n = 3）

表10 miR-575过表达逆转了lncRNA RPL34-AS1过表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡相关蛋白表达的作用（±s，n = 3）

注：与pcDNA组比较，aP ＜0.05；与pcDNA-RPL34-AS1+miR-NC组比较，bP ＜0.05；n实验重复次数

分组 凋亡率（﹪）CyclinD1蛋白 p21蛋白 Bcl-2蛋白 Bax蛋白pcDNA 7.98±0.77 0.78±0.07 0.24±0.03 0.67±0.06 0.22±0.03 pcDNA-RPL34-AS1 20.14±2.02a 0.35±0.03a 0.67±0.06a 0.28±0.03a 0.63±0.05a pcDNA-RPL34-AS1+miR-NC 21.65±2.11 0.34±0.03 0.68±0.07 0.27±0.03 0.60±0.06 pcDNA-RPL34-AS1+miR-575 12.06±1.22b 0.67±0.06b 0.35±0.04b 0.56±0.05b 0.33±0.03b F值 144.410 175.339 164.181 184.860 185.468 P值＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001

讨 论

靶向治疗是一种新兴治疗恶性肿瘤的手段，通过特定因子抑制癌细胞的增殖甚至直接杀死癌细胞，因此研究卵巢癌的发生发展分子机制对分子靶向治疗卵巢癌至关重要[9]。研究发现lncRNA RPL34-AS1在胃癌中低表达，与胃癌肿瘤大小相关[10]。RPL34-AS1在乳头状甲状腺癌组织中表达降低，过表达RPL34-AS1 可通过竞争性结合miR-3663-3p抑制乳头状甲状腺癌细胞的增殖和侵袭，促进细胞凋亡[11]。以上研究结果提示RPL34-AS1在癌症中可能起抑癌基因作用。本实验结果显示，RPL34-AS1在卵巢癌组织中低表达，抑制RPL34-AS1表达后，细胞活性升高，G1期细胞所占比例降低，S期细胞所占比例升高，细胞凋亡率降低，CyclinD1、Bcl-2表达水平升高，p21、Bax表达水平降低。说明抑制RPL34-AS1表达确实可以促进癌细胞增殖，抑制细胞凋亡。而过表达RPL34-AS1后卵巢癌SKOV3细胞中细胞活性降低，G1期细胞所占比例升高，S期细胞所占比例降低，细胞凋亡率升高，CyclinD1、Bcl-2表达水平降低，p21、Bax表达水平升高。说明过表达RPL34-AS1可抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖、阻滞细胞周期，促进细胞凋亡。提示RPL34-AS1在卵巢癌也具有抑癌作用。

研究表明miRNA与肿瘤的发生发展密切相关，深入研究miRNA在肿瘤中的作用机制对其诊断、治疗和预后以及药物研发均具有重要意义[12]。有研究报道miR-575与胶质母细胞瘤患者的生存率相关，过表达miR-575 增加了胶质母细胞瘤细胞系的细胞增殖和细胞运动性[13]。过表达miR-575抑制人脐静脉内皮细胞的迁移、增殖，且诱导其细胞凋亡[14]。miR-575在肝癌组织和细胞中上调表达，下调其表达抑制肝癌细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭[15]。本研究结果显示，miR-575在卵巢癌组织中高表达，抑制miR-575表达卵巢癌SKOV3细胞中细胞活性降低，G1期细胞所占比例升高，S期细胞所占比例降低，细胞凋亡率升高，CyclinD1、Bcl-2表达水平降低，p21、Bax表达水平升高。表明抑制miR-575表达可抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖、促进细胞凋亡。且本实验还发现RPL34-AS1靶向调控miR-575，且miR-575过表达逆转了RPL34-AS1过表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制和凋亡促进的作用。提示，RPL34-AS1 可能通过调控miR-575影响卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡。

综上所述，过表达RPL34-AS1可抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖，促进细胞凋亡，其机制可能与下调miR-575 有关。将可为卵巢癌分子靶向治疗提供理论参考。