SPE-GCMS/MS 法测定粮食中的 10 种有机磷

杨眉 宋明雄 业润泽

[摘要]本试验建立了气相色谱-质谱-质谱联用测定粮食中10种有机磷（敌敌畏、毒死蜱、甲基毒死蜱、马拉硫磷、杀螟松、甲基嘧啶磷、乐果、对硫磷、甲基对硫磷、久效磷）的方法。样品经固相萃取和全平行浓缩仪前处理后，用乙酸乙酯复溶，过滤后进入TSQ9000-GC/GC联用仪测定，用Auto-SRM方法优化，外标法定量。结果表明，10种有机磷线性关系良好（R>0.99），加标回收率为99.1%～102.5%，精密度RSD为3.02%～5.92%。本方法简便、快捷，结果更加准确，并成功应用于实际粮食样品中10种有机磷的测定。

[关键词]TSQ9000-GCMS/MS联用;Auto-SRM方法;粮食;固相萃取;有机磷

中图分类号：S481.8 文献标识码：A DOI：10.16465/j.gste.cn431252ts.202005

中国是农药生产和使用大国，农药广泛用于农业生产之中，同时农药滥用和不规范使用现象比较普遍，所以粮食中农药残留的问题也比较突出。日常检测中，农残监测的任务也相当繁重，当前我国对于农残监测的方法标准主要为GC、GCMS[1-4]等，随着气相色谱三重四级杆质谱的普及，GC-MS/MS的检测方法以其高选择性、高灵敏度、高通量等特点越来越受到检测工作者的欢迎。对于串联质谱来说，方法优化及建立是非常重要的部分。常规方法的开发需要对每个未知化合物挑选母离子、子离子以及优化碰撞能，未知化合物越多，花费的时间也就越多[5-8]。本文运用TSQ9000三重四级杆气相色谱质谱联用仪的AotoSRM功能，自动优化离子对信息及碰撞能量，使整个方法建立部分更加简单方便。在现行标准方法中，同时测定10种有机磷的标准有《粮谷中475种农药及相关化学品残留量测定 气相色谱-质谱法》（GB 23200.9—2016）和《植物源性食品中208种农药及其代谢物残留量的测定 气相色谱-质谱联用法》（GB 23200.113—2018）。本文参考2种标准方法，建立了同时测定10种有机磷的气相色谱-质谱/质谱联用法。

1 材料与方法

1.1 仪器

TSQ9000型三重四级杆气相色谱质谱联用仪：赛默飞世尔科技公司;TG-5SilMS型色谱柱（30m×0.25mm×0.25μm）;Raykol Fotector Plus型全自动固相萃取仪;RayKol AutoEVA-60型全自动氮吹平行浓缩仪：睿科集团股份有限公司;离心机：长沙湘仪离心机仪器有限公司，转速不低于4 000r/min;分析天平：感量0.01mg，梅特勒-托利多集团。

1.2 主要试剂和材料

1.2.1 试剂

乙腈（色谱纯）、乙酸乙酯（色谱純）、环己烷（色谱纯）、丙酮（色谱纯）、氯化钠、硫酸镁。

1.2.2 材料

固相萃取柱：石墨化碳黑/氨基复合柱，500mg/500mg，容积6mL。

2 实验部分

2.1 样品前处理

称取5g试样（精确至0.01g）于100mL塑料离心管中，加10mL水混匀，静置30min。加入20mL乙腈，4 000r/min离心2min，加入6g氯化钠剧烈振荡数次，继续4 000r/min离心5min。准确吸取5mL上清液于25mL试管中，氮吹至干。用5mL乙腈-丙酮溶液预洗固相萃取柱，弃出流出液。将待净化试样用3mL乙腈-丙酮溶液洗涤至固相萃取柱中，再用4mL乙腈-丙酮溶液洗涤，收集洗涤液，用25mL乙腈-丙酮溶液淋洗小柱，收集上述所有流出液至60mL试管中，40℃氮吹至干。加入2.5mL乙酸乙酯复溶，用有机相微孔滤膜过滤，用于测定。

2.2 样品基质溶液

选取空白样品，用本文2.1部分样品前处理方式得到的空白基质溶液。

2.3 标准溶液的配制

2.3.1 混合标准中间液

取10种有机磷的单标，用丙酮稀释。中间储备液的浓度为500ng/mL。中间储备液在-20℃冰箱中冷冻保存。

2.3.2 工作标准溶液

取适量的混合标准中间液，以空白基质液依次稀释成浓度为20.0ng/mL、40.0ng/mL、60.0ng/mL、80.0ng/mL的工作标准溶液。

2.4 仪器方法

2.4.1 气相方法

色谱柱温度：40℃保持1.5min;以25℃/min速度持升温至90℃，保持1.5min;以25℃/min速度升温至180℃，以5℃/min升温至280℃;以10℃/min升温至300℃，保持5min。载气：氦气，纯度≥99.999%;恒流：流速1.2mL/min。进样口温度：270℃;进样量：1.0μL;进样方式：不分流进样。

2.4.2 质谱方法

电子轰击源：70eV;离子源温度：300℃;传输线温度：280℃;溶剂延迟：4min;采集方式：Timed-SRM;SRM反应监测：每种有机磷分别选取一对定量离子、一对定性离子。每组所有需要检测的离子对按照出峰顺序分时段分别检测。

2.5 数据处理

使用Thermo变色龙软件对数据进行采集、处理和报告分析。AutoSRM自动优化化合离子信息及碰撞能量。第一步：选择母离子，进行全扫描（Full Scan）进样，找到对应化合物的色谱峰，挑选质量数较大、离子丰度高的特征离子作为母离子。第二步：选择子离子，进行子离子扫描（Product Ion）进样，挑选出丰度高的离子作为特征子离子。第三步：优化碰撞能，选择Target模式进行SRM碰撞能优化，在得出的数据中，选择响应最高处的CE值为最优碰撞能量。10种有机磷的离子对和最优碰撞能量如表1所示，SRM质量色谱图如图1所示。

4 结 论

本试验采用SPE前处理，TSQ-9000进样，Atuo-SRM方法扫描，使10种有机磷在35.6min内一针完成分析，结果表明，该方法中10种有机磷标准曲线线性良好，线性相关系数R均大于0.99，回收率范围为99.1%～102.5%，RSD范围在3.02%～5.92%。与常规方法比较，该方法回收率好，准确性高，方便快捷，能满足粮食样品中10种有机磷的检测。

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