莱阳茌梨组培繁殖试验初报

牟红梅 于强 李庆余 姜福东 王义菊 张述华 李元军*

（1山东省烟台市农业科学研究院，烟台265500；2烟台市芝罘区黄务街道办事处，烟台264004）

近年来由于病毒病严重，导致莱阳茌梨树势衰弱，果实品质下降。利用组织培养可在短时间内获得大量再生植株，再通过脱毒技术可获得莱阳茌梨脱毒苗木。

1 材料与方法

1.1 材料消毒

春季取莱阳茌梨当年生幼嫩枝条，迅速带回实验室，去掉叶片，放入三角瓶内，加入洗洁精洗涤，在流动的自来水下冲洗2 h，剪取3～4 cm带芽茎段，75%酒精消毒40 s，HgCl2消毒设3个处理，每处理10瓶，每瓶接种4个外植体。将单芽茎段转入MS培养基中进行启动培养。培养条件为温度 25±2 ℃、光照 14 h/d、光强 2 000 lx。

1.2 继代培养

切取2 cm初代培养嫩梢并转移至继代增殖培养基，40 d后统计增殖倍数和嫩梢长度，调查组培苗生长状况。正交试验设计以6-BA、IBA等两因素为参选因素，共设6个处理。每个处理10瓶，每瓶接种4个外植体。

2 结果与分析

2.1 灭菌时间对莱阳茌梨的影响

灭菌的莱阳茌梨入瓶后，部分会出现褐化现象，消毒时间不同，褐化程度也会不同。其中，酒精消毒时间30～45 s，对植株的污染率及成活率影响相对较小，而HgCl2处理时间的长短对植株无菌体系的建立起重要作用。

表1 HgCl2处理时间对莱阳茌梨死亡率及污染率的影响

由表1知，HgCl2处理时间6 min时，植株的死亡率低（22.5%），但污染率高（15.0%），随着HgCl2处理时间增加，虽然污染率降低，但植株死亡率迅速增加，综合试验得出：莱阳茌梨适宜的消毒时间为6 min。

2.2 不同浓度6-BA和IBA对莱阳茌梨增殖培养的影响

由表2知，6个处理中，处理3的增殖系数最高，为3.3；处理2的茎节间的平均伸长量最长，综合考虑后期进行生根与移栽驯化，莱阳茌梨组培快繁最适宜的增殖培养基为处理3。

表2 不同激素浓度配比对莱阳茌梨增殖培养的影响

3 结论

本试验通过对比莱阳茌梨在不同浓度6-BA和IBA的培养基上的生长情况，筛选出其最适增殖培养基配方为MS+0.2 mg/L IBA+1.0 mg/L 6-BA，外植体灭菌采用0.1%HgCl2灭菌6 min为宜。