顺德地区无偿献血人群开展不规则抗体筛查的研究

梁丽雯 叶伟亮 刘志泉 李交 陈永飞 于艳涛

【摘要】 目的：探究順德地区无偿献血人群开展不规则抗体筛查结果。方法：选取2018年2月-2020年

2月顺德地区无偿献血者25 029例，利用全自动凝聚胺微板法对其实施不规则抗体筛查，利用试剂谱抗体鉴定及效价测定细胞阳性标本。分析不规则抗体的检出情况。结果：本研究中的25 029例样本中，筛查出7例不规则抗体，其检出率为0.028%，另外规则抗体为25 022例，其检出率为99.972%;本研究中16 241例男性进行不规则抗体检查，其中检出的不规则抗体为4例，检出率为0.025%;8788例女性进行不规则抗体检查，其中检出不规则的抗体为3例，检出率为0.034%;女性无偿献血者中不规则抗体的阳性率与男性比较，差异无统计学意义（P>0.05）。7例不规则抗体中，IgG型1例，IgM型抗体6例，其中1例抗-D，2例抗-M，冷抗体4例。结论：随着输血医学技术的不断革新，对血型鉴定和抗体筛查成为临床输血中的必备部分。对顺德地区无偿献血者实施不规则抗体的检查，能够清楚认识到机体内不规则抗体所存在的频率、类型以及特异性、效价，能够促进电子交叉配血的实行，同时为顺德地区临床输血提供真实的数据支持，保障了临床用血安全、有效和及时的特性，值得推广应用。

【关键词】 无偿献血人群 不规则抗体 筛查

[Abstract] Objective： To explore the results of irregular antibody screening among free blood donors in Shunde area. Method： A total of 25 029 free blood donors in Shunde area from February 2018 to February 2020 were selected. It was screened for irregular antibodies by automatic polyamine microplate method. The positive samples were identified by reagent spectrum antibody and titer. The detection of irregular antibody was analyzed. Result： Among the 25 029 samples in this study， 7 irregular antibodies were screened， with a detection rate of 0.028%， in addition， 25 022 cases were regular antibody， the detection rate was 99.972%. In this study， 16 241 male patients were examined for irregular antibodies， 4 of them were irregular antibodies， the detection rate was 0.025%. 8，788 women were examined for irregular antibodies， 3 of them were irregular antibodies， the detection rate was 0.034%. The positive rate of irregular antibody in female unpaid blood donors was compared with that in male， there was no significant difference （P>0.05）. Among 7 cases of irregular antibodies， 1 case of IgG type and 6 cases of IgM type antibody， including 1 case of anti-D， 2 cases of anti-M and 4 cases of cold antibody. Conclusion： With the continuous innovation of transfusion medical technology， blood group identification and antibody screening become an essential part of clinical transfusion. Irregular antibody tests are carried out on blood donors in Shunde area， it can clearly recognize the frequency， type， specificity and titer of irregular antibodies in the body， promote the implementation of electronic cross matching， provide real data support for clinical blood transfusion in Shunde area， and ensure the safety， effectiveness and timeliness of clinical blood use， which is worthy of promotion and application.

[Key words] Free blood donors Irregular antibody Screening

First-authors address： Foshan City Shunde District Central Blood Station， Foshan 528300， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2020.18.016

采供血机构及时且有效地向临床治疗提供足够的血液制品，从而保障临床用血的正常运行，因为临床用血关系到患者的生命健康，因此输血的安全和血液的质量成为比较重要的部分，近几年因不规则抗体造成临床输血出现不良反应的情况被着重关注[1]。不规则抗体是指除抗-A、抗-B之外的其他血型抗体。研究表明，不规则抗体是因为人体遭受到相应抗原类似物质的免疫进行刺激后形成的[2]。在健康献血者中也极有可能产生不规则抗体，为预防临床输血所用的血浆中存在不规则抗体，造成交叉配血出现不相合的情况，本文对2018年2月-2020年2月顺德地区的标本实施不规则抗体筛检，对呈阳性的标本利用谱细胞实施抗体特异性鉴定以及效价检测，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 对象 选取2018年2月-2020年2月顺德地区无偿献血者25 029例，其中男16 241例，女8 788例;年龄19～61岁，平均（40.0±1.5）岁，均实施血浆不规则抗体筛查。

1.2 方法

1.2.1 仪器和试剂 由上海血液生物医药有限责任公司、长春博德生物技术有限责任公司提供的筛选细胞，由上海血液生物医药有限责任公司、匈牙利REAGENS公司提供的谱细胞，由上海血液生物医药有限责任公司生产的阳性对照IgG抗D试剂，珠海贝索生物技术有限公司生产研究的凝聚胺试剂盒，西班牙Grifols公司、DianaGel提供的微柱凝胶抗人球蛋白卡，由Hamilton公司生产的Star全自动加样仪，所使用的型号为TITRAMAX 101的震荡仪由德国Heidolph公司生产，Tecan Sunrise全自动酶标仪由瑞士帝肯公司生产，所使用的型号为ROTINA 35R平板离心机由德国Hettich公司生产，日本久保田公司生产的型号为KA-2200的离心机，西班牙Grifols公司提供的戴爱娜手工卡式血型/配型系统以及浙江拱东提供的96孔U型板[3]。

1.2.2 检测方法 （1）筛选不规则抗体：将待检血浆和相关试剂依据设置加入96孔U型板中，每板将IgG抗D试剂为8孔阳性对照。将50 μL的血浆和20 μL筛选细胞以及150 μL IM，在此基础上加入50 μL的凝聚胺溶液，通过震荡将其混匀，利用1 000 r/min的离心机将上清液从血浆中分离出来，震荡频率为7档/min，依据是否出现凝集现象判定上述步骤是否有效，随后加入50 μL的重新悬浮液，震荡频率仍为7档/min，由全自动酶标仪对结果进行判读。出现凝集现象是阳性标本[4]。（2）鉴定不规则抗体：利用谱细胞使用试管法及微柱凝胶法对不规则抗体筛选阳性的样本实施特异性鉴定[5]。（3）测定抗体效价：倍比稀释已鉴定完抗体特异性的样本，利用微柱凝胶法对抗体效价进行测定[6]。

1.3 观察指标 （1）分析不规则抗体的检出情况。（2）分析不同性别不规则抗体检出情况。（3）分析不规则抗体的特异性、类型、效价。

1.4 统计学处理 采用SPSS 22.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，比较采用t检验;计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不规则抗体的检出情况分析 经过上述仪器和试剂的筛选和鉴定，本研究中的25 029例样本中，筛查出7例不规则抗体，其检出率为0.028%（7/25 029），另外规则抗体为25 022例，其检出率为99.972%（25 022/25 029）。

2.2 不同性别不规则抗体检出情况分析 女性无偿献血者中不规则抗体的阳性率与男性比较，差异无统计学意义（字2=1.258，P>0.05），见表1。

2.3 不规则抗体的效价、类型、特异性分析 最终的鉴定结果表明，7例不规则抗体中，IgG型1例，IgM型抗体6例，其中1例抗-D，2例抗-M。4例冷抗体，以上抗体效价均<8。见表2。

3 讨论

在欧美地区等多个发达国家中，普遍采用红细胞对献血者体内的不规则抗体进行筛选，中国香港、台湾等地区的采供血机构在进行常规筛查时，将不规则抗体筛选作为项目[7]。对世界上不同地区的无偿献血人群进行不规则抗体检查，其检出率存在一定的不同，造成这一现象的原因可能为不同地区、不同人种人群存在的血型系统差异[8]。现阶段，国内尚未形成统一且规范的筛查规范，因此未对献血者必须接受不规则抗体筛查进行强制要求[9]。但随着医学技术中检测技术的持续革新，因不规则抗体造成不良的临床输血事故越来越多，同时医学界对不良的临床输血的关注、引入电子交叉配血理念等多种因素，使得采血站的医生提高了对献血者实施不规则抗体筛选的重视程度[10]。现阶段，东莞、武汉和杭州以及广州等多个地区都对献血者进行不规则抗体筛查的活动，同时依据临床实践获得的有关数据进行报道[11]。

输血在临床救治危重患者的过程中发挥着极为关键的作用，血站应该保证所提供的血液制品安全且有效[12]。近几年，随着医学技术的不断进步，输血技术水平也得到了迅速的发展，同时临床上血型鉴定试剂具有极高的敏感度。目前，已经很少发生因弄错血型造成临床救治期间出现溶血性输血反应，但除ABO血型外，其他血型系统极有可能存在不规则抗体，其极易造成不良的临床输血反应。依据美国食品、药品管理局的有关统计，因不良输血反应造成的死亡患者中，因溶血性输血反应死亡的人数占总死亡人数的55.5%，其中因为不规则抗体造成的占14.0%[13]。如果将包含不规则抗体阳性的血液向血液中存在红细胞抗原的患者输入，抗原抗体马上出现免疫反应，在此基础上加入补体，使得患者体内的红细胞出现严重的溶血现象，从而形成溶血性输血反应，病情严重时对患者的生命健康产生极大的威胁[14]。不规则抗体分為两种类型，主要是IgM型以及IgG型。其中IgM型不规则抗体通过一定浓度的盐水，能够与对应的红细胞进行直接连接，使其产生凝集现象，这种现象比较明显，肉眼均可见;而IgG型抗体通过盐水并不会出现凝集现象，只能致敏相应抗原的红细胞，其检验利用酶法、低离子强度溶液法和抗人球蛋白法以及聚凝胺法、凝胶法等多种方法和先进的血型血清学技术进行实现[15]。

本研究中主要利用全自动凝聚胺微板法对2018年2月-2020年2月顺德地区无偿献血者实施抗体筛查项目，结果显示，本研究中的25 029例样本中，筛查出7例不规则抗体，其检出率为0.028%，另外规则抗体为25 022例，其检出率为99.972%。7例不规则抗体中，IgG型1例，IgM型抗体6例，其中1例抗-D，2例抗-M。4例冷抗体。研究可知，IgG型抗体一般在造成临床输血反应发生的抗体中占有主要地位，但在本文的研究中，所检查出的IgG型抗体效价均小于8，所以其临床上免疫性溶血反应的出现率极低。其他不规则抗体权属于IgM型，具有比较低的抗体效价，主要是在4～8。抗体能够在4～20 ℃的温度下与红细胞膜抗原相互结合，极易对临床的血型鉴定以及交叉配血等操作产生消极的影响[16]。IgM型抗体是一种天然抗体，IgG型抗体一般是利用输血、器官移植等多种免疫刺激方式形成的，据相关报道可知，每进行一次临床输血，其抗体的形成率占4%，大部分抗体普遍形成于输血1～2次后[17]。

本研究结果显示，研究中16 241例男性进行不规则抗体检查，其中检出的不规则抗体为4例，检出率为0.025%;8 788例女性进行不规则抗体检查，其中检出不规则的抗体为3例，检出率为0.034%;女性无偿献血者中不规则抗体的阳性率与男性比较，差异无统计学意义（P>0.05）。相关的资料报道，IgG型抗体的产生与女性个体特有的妊娠等免疫刺激具有密切的关系，但因为献血者在献血时所登记的一般资料中未记录妊娠状况，所以本研究并未对妊娠状况和IgG型抗体的形成之间的关系进行深入研究分析。而IgM型抗体呈现阳性差异的形成原因仍未明晰，相关权威研究显示，其与自身的性激素调节身体免疫功能具有一定的相关性[18]。女性献血者所献出的血浆，其输入对象为特殊患者，包括麻醉患者、老人或者儿童等，应该进行不规则抗体筛查。通过对其进行特异性鉴定，本研究表明所检测出的不规则抗体普遍存在于Rh、P、MN、Lewis等四类血型系统中[19]。本研究结果显示，2例抗-M，1例抗-D，冷抗体4例。与世界上其他地区具有一定的差异性[20]，其说明不同地区、不同人种的献血者的特异性具有一定的差异。

综上所述，随着现阶段输血医学技术的不断革新，对血型鉴定和抗体筛查成为临床输血中的必备部分。对顺德地区无偿献血者实施不规则抗体的检查，能够清楚认识到机体内不规则抗体所存在的频率、类型以及特异性、效价，能够促进电子交叉配血的实行，同时为顺德地区临床输血提供真实的数据支持，保障了临床用血安全、有效和及时的特性，值得推广应用。

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（收稿日期：2020-04-21） （本文编辑：姬思雨）