PCA3、fPSA、tPSA联合检测在前列腺疾病早期诊断中的运用

张建华，王 震，李 松，侯俊清

（河南大学淮河医院泌尿外科，河南 开封 475000）

前列腺特异抗原（PSA）是前列腺癌常用筛选标志物，然而其在前列腺癌细胞中的特异性不高，PCA3可在前列腺癌细胞内特异性高表达[1]，本研究旨在探讨外周血PCA3及其联合fPSA、tPSA基因检测在前列腺疾病患者中早期诊断价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取河南大学淮河医院泌尿外科自2017年3月～2019年3月收治的120名前列腺疾病患者作为研究组，其中前列腺癌38例，年龄47～78岁，平均（65.30±4.44）岁，TMN病理分期：T1～T2期25例，T3～T4期13例；前列腺增生症82例，年龄46～79岁，平均（65.25±4.50）岁。选取同期在我院接受体检的50名健康男性作为对照组，年龄48～80岁，平均（65.88±4.70）岁。纳入标准：（1）经病理或者活检确诊，前列腺癌患者符合前列腺癌的相关诊断标准，前列腺增生患者符合《良性前列腺增生诊断治疗指南》相关标准；（2）无前列腺药物或手术治疗史；（3）无其他肿瘤且未行放化疗治疗；（4）健康对照组经体检排除前列腺等疾病；（5）知晓本次研究且自愿参与。排除标准：（1）既往前列腺手术史、前列腺反复穿刺活检史；（2）口服5-ɑ还原酶抑制剂患者；（3）3个月内急性前列腺炎、尿路感染患者；（4）依从性差，病例资料不完整者。本研究经医院伦理委员会批准，3组的年龄等基本资料比较无统计学意义（P＞0.05），可比较。

1.2 方法

受试对象于清晨空腹状态下抽取肘静脉血3ml，置于干燥试管内，室温下3000 r/min离心，离心10 min，取上清分别装入Eppedorf管，置于-80oC环境下待测。

fPSA及tPSA检测：取冷冻保存的血清，室温解冻，采用化学发光免疫染色法检测，使用试剂盒由上海信裕生物技术有限公司提供；严格按照试剂说明书操作。PCA3mRNA检测：用Trizol试剂盒（北京博凌科为生物科技有限公司）提取RNA，以逆转录cDNA（上海生工生物工程有限公司）作为内参基因，荧光定量聚合酶链反应法（RTPCR）对外周血PCA3 mRNA表达进行检测。

1.3 统计学方法

数据采用SPSS 20.0软件统计分析，计量资料使用（±s）表示，符合正态分布，以t检验分析对比；计数资料以x2检验分析对比。P＜0.05为差异显著。

2 结 果

2.1 三组血清fPSA、tPSA、PCA3水平比较

研究组前列腺癌、前列腺增生患者血清fPSA、tPSA、PCA3水平均明显高于对照组，差异显著，差异有统计学意义（P＜0.05）；研究组内前列腺癌患者各指标水平明显高于前列腺增生组，差异显著，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

2.2 fPSA、tPSA、PCA3单独及联合诊断价值

以病理诊断为金标准（阳性代表前列腺癌，阴性代表前列腺增生），则fPSA、tPSA、PCA3联合诊断灵敏度、特异度明显高于上述指标单独检测，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

3 讨 论

前列腺癌在世界范围内发病率位居男性恶性肿瘤第2位，且其临床症状与前列腺增生相似，因此准确鉴别诊断尤为重要。研究发现，早期局限型前列腺癌患者接受根治性手术以及内分泌治疗后，患者5年内生存率基本可达到100%[2]，然而许多前列腺癌患者在确诊时已经失去根治机会，因此寻找前列腺癌特异的血清肿瘤标记物对其诊断和预后评价具有重要意义。本次研究结果显示，前列腺癌患者的fPSA、tPSA、PCA3水平显著高于前列腺增生组、健康对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），前列腺增生患者高于健康对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），提示fPSA、tPSA及PCA3能够作为前列腺疾病的诊断标志物。

表1 3组血清fPSA、tPSA、PCA3水平比较（±s）

表1 3组血清fPSA、tPSA、PCA3水平比较（±s）

注：T1、P1代表前列腺癌与对照组比较，T2、P2代表前列腺癌与前列腺增生比较，T3、P3代表前列腺增生与对照组比较

组别 例数（n） fPSA（ng/mL） tPSA（ng/mL） PCA3研究组：前列腺癌 38 2.20±0.55 61.62±10.39 97.89±9.11前列腺增生 82 0.79±0.38 11.28±3.18 5.56±0.71对照组 50 0.37±0.13 1.70±0.44 1.38±0.26 T1 22.744 40.806 75.007 P1 0.000 0.000 0.000 T2 16.314 40.164 91.623 P2 0.000 0.000 0.000 T3 7.541 21.148 39.977 P3 0.000 0.000 0.000

表2 fPSA、tPSA、PCA3单独及联合诊断价值（n，%）

以往研究发现，单一生物标记物易忽略肿瘤的异质性，而联合多种生物标记物时，尚未对标记物种类进行明确，因此探讨各类型标记物的优化组合成为临床研究热点。PSA是临床诊断常用的前列腺癌生物标志物，《中国泌尿外科疾病治疗指南2014版》将PSA检测联合直肠指检作为前列腺癌筛查的最好办法，通过上述检查多可提示早期可疑前列腺癌，然而PSA检测易受到各因素的影响，如导尿管刺激、前列腺穿刺、前列腺按摩等[3]，可能出现较高的假阳性，无法准确提示炎症、良性疾病与肿瘤，本次研究，fSPA、tSPA假阳性分别为26例、19例，提示单纯PSA检测并不理想。有研究表明PSA即使联合其一系列衍生物如:前列腺特性抗原密度（PSAD）、前列腺特异性抗原比值（fPSA/tPSA）、前列腺特异性抗原速率（PSAV）等共同检测，其诊断特异性仍无明显提高[4]。PCA3是1999年Bussemakers 等首次在前列腺癌组织中发现的，在前列腺癌细胞和转移灶中均呈特异性高表达，但在正常前列腺组织或增生组织中却呈现为不表达或低表达，在其他组织器官中均检测不到PCA3基因表达，这为前列腺癌的早期筛查和诊断提供新的目标方向。本次研究，外周血PCA3基因灵敏度为81.58%，特异度为89.02%，均高于fPSA、tPSA检测水平，提示PCA3基因作为特异性标志物检测前列腺癌效果优于PSA。将血清tPSA、fPSA和PCA3优化组合，通过联合检测的灵敏度为94.74%，特异度为96.34%，均高于其单独检测指标，差异有统计学意义，由此可见三者联合检测的效果更加显著，能够更为准确的明确病情，减少漏诊及误诊率。

综上所述，fPSA、tPSA、PCA3三者优化组合能够提高诊断的灵敏度及特异性，更好的鉴别前列腺良性、恶性疾病，通过联合检测在前列腺疾病的诊断中具有显著的应用价值。