张掖市常见5 种鸡病的抽样检测及结果分析

何彦春 ，韩庆彦 ，郭慧琳 ,李旭蓉 ，李 珊 ，

（1.张掖市动物疫病预防控制中心，甘肃张掖734000；2.甘肃省动物疫病预防控制中心，兰州730046）

鸡白痢、鸡伤寒、鸡毒支原体、鸡滑液支原体和禽白血病是目前规模养鸡场的常发病。为了掌握这5 种病在张掖市的感染情况，2019 年6 月，张掖市动物疫病预防控制中心对张掖市甘州区、临泽县、高台县、山丹县、民乐县的部分规模养鸡场进行了抽样检测，初步掌握了张掖市鸡白痢和鸡伤寒、鸡毒支原体、鸡滑液支原体、禽白血病目前的感染状况，为今后的防控工作提供了理论依据。

1 材料与方法

1.1 样品采集

在甘州区、临泽县、高台县、山丹县、民乐县各选择存栏量在1000 只以上的商品代养鸡场10个，每场最少随机采集140 日龄以上的临床健康的鸡血样10 份。经实验室分离血清后符合检测要求的样品共785 份，其中甘州区、高台县、民乐县各155 份，临泽县175 份，山丹县145 份。

1.2 所用试剂

鸡白痢鸡伤寒多价染色平板凝集抗原、阳性血清、阴性血清由中国兽医药品监察所生产，批号分别为S062809、201803。鸡毒支原体平板凝集试验抗原、阳性血清、阴性血清, 由中国兽医药品监察所生产，批号为201801。鸡滑液支原体平板凝集试验抗原、阳性血清、阴性血清, 由中国兽医药品监察所生产，批号为201807。禽白血病P27抗原ELISA 检测试剂盒，由深圳真瑞生物科技公司生产，批号：2019053001。

1.3 检测方法

1.3.1 鸡白痢和鸡伤寒血清平板凝集试验操作方法

在室温下滴加鸡白痢鸡伤寒多价染色平板凝集抗原50μl 于玻璃板上，再加入被检血清50μl，用牙签搅匀至直径为2 cm，不断摇动玻璃板，计时判定结果，同时设阳性血清、阴性血清对照。在2 min 内，抗原与阳性血清应呈100%凝集，阴性血清不凝集，判试验有效。被检血清与抗原出现50%以上凝集者为阳性，不发生凝集则为阴性，介于两者之间为可疑反应。

1.3.2 鸡毒支原体和滑液支原体平板凝集试验操作方法

室温中加30μl 被检血清于玻板上，再加等量染色抗原，用牙签棒将其混合，轻轻摇动玻板使之混合均匀。试验设阳性血清及阴性血清对照。结果判定：室温条件下，鸡血清2 min 内，发生完全凝集的，判为阳性。如仅在液滴边缘部分出现凝集，或超过2 min 在边缘出现凝集，判为可疑。超过规定时间无凝集者，判为阴性。

1.3.3 禽白血p27 抗原ELISA 检测方法

1.3.3.1 取预包被纯化抗禽白血病P27 抗原单抗检测板，每孔加入50μl 微升样本稀释液，将阴性对照、阳性对照和待检样品各取50μl 加至相应微孔中，阴、阳性对照各设2 孔，待检样品设1孔，盖好封板膜，轻轻振荡酶标板，充分混匀，置37℃温育 60 min。

1.3.3.2 揭开封板膜，甩掉孔中的溶液，每孔加入稀释好的洗涤液250μL，甩去液体，重复6 次，在干净吸水纸上拍打去除残存洗涤液。每孔加入100μL 酶结合物，盖好封板膜，置37℃温育60 min。

1.3.3.3 揭开封板膜，甩掉孔中的溶液，每孔加入稀释好的洗涤液250μl，甩去液体，重复6 次，在干净吸水纸上拍打去除残存洗涤液。每孔加入显色液100μl，盖上封板膜，37℃避光显色15min。

1.3.3.4 每孔加入终止液 50μl，10 min 内在酶标仪上于650 nm 读各孔吸光度OD 值SC。计算出阴性对照孔OD 均值NC 和阳性对照孔OD 均值PC。当 NC 值＜0.25 且 PC 值 ＞0.7，试验结果成立。

1.3.3.5 阴阳性判断：按照公式计算出IRPC 值，IRPC 值 =（SC-NC）/（PC-NC）×100。如果 IRPC≥20，说明样品中有禽白血病病毒P27 蛋白，判断为阳性；如果IRPC＜20，说明样品中无禽白血病病毒P27 蛋白，判为阴性。

2 结果

共检测鸡白痢和鸡伤寒785 份，检出阳性76份，阳性率9.7%；检测鸡毒支原体785 份，检出阳性319 份，阳性率40.6%；检测鸡滑液囊支原体785 份，检出阳性 213 份，阳性率 27.1%；检测鸡白血病184 份，检出阳性20 份，阳性率10.9%。详见表1：检测结果汇总表。

表1 ：检测结果汇总

3 讨论

3.1 鸡白痢和鸡伤寒是由鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌引起的可经种蛋垂直传播的传染病，各种日龄的鸡均可发生。董永毅等[1]采用血清平板凝集试验对江苏省8 个县市送检的21274份血清样品进行鸡白痢抗体检测，结果表明：8 个县市均存在不同程度的鸡白痢感染情况, 平均阳性率达25.5%。本次检测采集的均是140 日龄以上成年商品鸡的血样，且无明显临床症状。经检测鸡白痢和鸡伤寒阳性率为9.7%，其中民乐县阳性检出率最高，为 15.5%（24/155），高台县最低，为3.2%(5/155)。本次检测中各检测县均从无临床症状的鸡群中检出一定比例的鸡白痢和鸡伤寒阳性病例，说明部分病鸡处于隐形感染状态，或属于雏鸡阶段感染后的耐过病例。由于用鸡白痢鸡伤寒多价染色平板凝集抗原无法区分鸡白痢和鸡伤寒各自的阳性率，故本次的检测结果是鸡白痢和鸡伤寒两种病的综合结果。对这两种病的具体感染情况有待于今后进一步做细菌学检验并结合临床表现确定。

3.2 鸡毒支原体可通过种蛋垂直传播和直接接触病鸡传播，主要引起鸡群慢性呼吸道疾病，容易继发其他疫病造成死亡、饲料转化率降低、产蛋下降等。鸡毒支原体在张掖市的规模养鸡场中多发多见。魏玉明[2]报道，1992 年对 1062 份血样进行检测，检出阳性585 份，阳性率为55.1%。本次检测785 份，检出阳性319 份，阳性率40.6%,其中民乐县检出率最高，为43.9%（68/155）,甘州区检出率最低，为32.9%（51/155）。从检测数据初步说明，从1992 年至2019 年，张掖市的鸡毒支原体的感染率并未明显减轻，防控形势依然很严峻。

3.3 鸡滑液囊支原体主要引起鸡的关节肿大，滑液囊和腱鞘发炎。该病病程长，经常给养鸡生产造成难于弥补的损失。冀锡霖等[3]报道，我国鸡滑

液囊支原体在国内的很多地区鸡群中普遍存在，阳性感染率为20.7%。马爽等[4]采集来自华北、华中、华南、东北、西北、华东6 个地区11 个省份无MS 疫苗免疫背景鸡场的鸡群血样应用平板凝集检测方法进行检测，平均阳性率为41.42%。近年来，该病的临床发病率在张掖市有逐渐增多趋势。本次共检测785 份，检出阳性213 份，阳性率37.1%。其中高台县检出率最高，为 32.9%（51/155）,民乐县检出率最低，为 18.7%（29/155）。今后应加强对滑液囊支原体的防控力度。

3.4 禽白血病主要要引起感染鸡在性成熟前后发生肿瘤死亡。根据《禽白血病诊断技术》（GB／T 26436—2010）[5]，采用禽白血 p27 抗原 ELISA 检测时，当样本中检测出禽白血p27 抗原时，判为禽白血阳性，否则判为阴性。本次检测中利用禽白血p27 抗原ELISA 检测方法共检测184 份，检出阳性20 份，阳性率10.9%。其中高台县检出率最高，为30.60%（51/155）,山丹县和民乐县未检出。临床检查健康的鸡群中检出较高比例的禽白血病，说明张掖市部分养鸡场中有较高比例的禽白血病隐形感染情况，要引起高度重视，并采取综合措施加以防控。