成都市9 142例女性HPV感染状况、亚型分布及与宫颈病变的关系分析

范永霞，王英，刘春燕，郭锦，朱岩，王成方，罗文琼，刘江岚

610213 成都，成都天府新区人民医院 妇产科

人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是属于乳头多瘤空泡病毒科的一种无包膜小环状球形双链DNA病毒[1]，具有很强的传染性，通过感染人体的表皮、黏膜组织，可导致宫颈上皮内病变和宫颈癌等[2-3]，女性是HPV感染的主要高危人群[4]。HPV不同基因亚型对宫颈上皮的致病能力以及致癌风险不同，因此将HPV基因亚型分为高危型和低危型，HPV高危亚型主要包括 HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68、83等亚型，主要与各种宫颈上皮内瘤变及宫颈癌等恶性病变密切相关[5]；低危亚型主要包括HPV6、11、40、42、43、44、61、70、72、81等亚型，主要外生殖道各种良性病变有关[6]。中国女性HPV感染率约为15.5%，在全球范围内处于较高水平[7]，分别高于欧洲的7.8%～8.4%，北美洲的12.4%～13.5%以及亚洲的5.5%～7.5%[8-10]。已有研究表明，HPV的感染率和基因亚型分布在不同地区、不同人群之间具有不同的流行现状，不同的HPV基因亚型的致癌性之间也存在显著差异[11-12]。为了解成都市女性HPV感染情况、HPV基因亚型分布特点以及HPV感染与宫颈病变之间的关系，预防和减少宫颈病变及宫颈癌的发生率，本研究对9 142例女性进行HPV感染及基因亚型检测，现将结果报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取2015年1月至2019年12月在我院妇科自愿进行HPV检测的女性患者9 142例为研究对象。纳入标准：宫颈完整，非孕期、非月经期，采用前3 d内无性生活、无阴道内用药或冲洗，无系统性、传染性疾病；同时进行HPV基因亚型检测和液基薄层细胞学检测(thin-preparation cytologic test, TCT)。排除标准：子宫切除、宫颈手术及盆腔放射治疗患者。所有患者的知情同意均已获得。

1.2 仪器与试剂

HPV基因分型(23型)检测试剂盒(PCR荧光探针法)购自湖南圣湘生物科技公司，SLAN96P荧光定量PCR仪购自上海宏石医疗科技有限公司，恒温金属浴和电热恒温水槽购自北京卡尤迪公司，MINI412高速离心机购自珠海黑马医学仪器有限公司。

1.3 样本采集及HPV检测

采用HPV基因分型(23型)试剂使用一次性无菌子宫颈取样器，通过使用阴道扩张器完全暴露子宫颈。用棉签擦去过多的阴道和宫颈分泌物，宫颈刷伸入宫颈1.0～1.5 cm处，轻轻搓动宫颈刷，使其顺时针方向轻旋3～5圈后，慢慢拔出宫颈刷，将脱落细胞样本放入专门的细胞保存液采样管中。立即送检或置于4℃保存，当日送检。

HPV基因分型(23型)检测试剂盒(PCR荧光探针法)说明书的操作流程进行操作，在HHM-3型核酸分子杂交仪中完成杂交。依据蓝色斑点显现的位置，按照标准结果对样本检验结果进行判读，确定样本HPV感染的基因型，本研究所采用的试剂盒共检测23型，包括18种高危亚型(HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、83)和5种低危亚型(HPV6、11、42、43、81)。此外，1种类型的HPV感染是单一感染，2种或2种以上类型的HPV感染是多重感染。

1.4 TCT检测

病理医师采用Bethesda诊断系统进行分类诊断，疑难病例由两名副高以上病理医师共同诊断后确定。结果分为：正常包括未见上皮内病变或炎症、意义不能明确的不典型鳞状上皮细胞(atypical squamous cells of uncertain significance,ASC-US)、不能排除高度鳞状上皮内病变的不典型鳞状细胞、低度鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesiou,LSIL)、高度鳞状上皮内病变、非典型腺细胞癌和鳞状细胞癌。

1.5 统计学分析

2 结 果

2.1 HPV感染情况

9 142例女性宫颈筛查标本中，共检出阳性标本1 912例，HPV感染率为20.91%。1 912例阳性标本中，单一HPV感染占大多数，有1 502例(78.23%)；多重感染占21.77%，包括二重感染309例、三重感染84例、四重感染17例(表1)。

表1 HPV感染检测结果

2.2 HPV各基因亚型检出分布情况

1 912例阳性标本中，23种HPV基因亚型均有检出，共检出病毒1 231株，检出率最高的前5位HPV亚型依次为HPV52、16、53、58、51均为高危亚型。各亚型检出率及见构成比见表2。

表2 HPV各基因亚型感染检出情况

2.3 HPV感染年龄分布情况

9 142例女性筛查标本中，各年龄组HPV感染阳性率由大到小依次为≥55岁、<25岁、25～29岁、50～54岁、40～49岁、30～39岁，感染率分别为：34.50%、29.73%、23.81%、21.11%、18.31%、17.16%，各年龄组感染率呈“V”形分布(图1)。HPV 感染率的年龄分布之间，差异有统计学意义(χ2=86.038，P<0.001)。

图1 不同年龄组女性HPV感染率分布

在单一感染患者中，≥55岁组感染率最高(24.00%)，其次为25～29岁组(17.51%)；在多重感染患者中，<25岁组染率最高(14.71%)，其次为≥55岁组(10.50%)(表3)。

表3 不同年龄组女性HPV感染情况

2.4 HPV感染亚型与宫颈鳞状上皮内病变的关系

高危亚型的HPV感染者发生宫颈鳞状上皮内病变的比例明显高于低危亚型HPV感染者[45.92%(759/1 653)vs26.25%(68/259);χ2=35.267,P<0.001]；各种宫颈鳞状上皮内病变患者，均表现为高危亚型HPV感染者的患病率高于低危亚型感染者，但仅在ASC-US、LSIL患者中差异具有统计学意义(χ2=9.496,P=0.002;χ2=10.849,P=0.001)(表4)。

表4 HPV感染亚型与宫颈细胞学检查结果的关系[n(%)]

3 讨 论

女性HPV感染目前在妇科临床十分常见，目前已发现HPV病毒约有280多种基因亚型，其中有超过200种以上亚型可以感染人类，与生殖道感染疾病相关的亚型约有40余种[13-14]。流行病学数据显示[15-16]，不同基因亚型对宫颈上皮或宫颈黏膜的致病力和致癌性有所不同，而持续的HPV感染尤其是高危亚型感染是导致宫颈上皮内瘤变及宫颈癌比较明确的危险因素。因此了解女性HPV感染状况以及其HPV基因亚型的分布情况，分析其与宫颈鳞状上皮内病变的关系，对女性HPV感染相关疾病及宫颈癌的防治具有重要的显示意义。

最近几年有很多研究结果表明，在不同国家以及在同一国家的不同地区，人群HPV的感染率和HPV亚型分布之间存在较大差异。多项研究已经证实，一种或多种高危型HPV感染是导致宫颈癌前病变及宫颈癌的明确病因。本组资料中，成都市9 142例女性受检者，共检出阳性标本1 912例，HPV感染率为20.91%。以单一HPV感染为主(78.23%)。本组HPV感染阳性率处于中上水平，与张爱凤等[17]报道的北京感染率(21.67%)、张振林等[18]报道的珠海的感染率(21.37%)相近，高于靳大川等[19]报道郑州的感染率(9.4%)、罗秋兰等[20]报道深圳的感染率(13.70%)，低于马丽娜等[21]报道黑龙江的感染率(32.16%)、姜宝玉等[22]报道内蒙古的感染率(28.25%)。HPV感染率可能与当地经济水平、教育程度、婚姻、生活习惯，不良性生活等因素有关，同时检测方法的不同也可能影响HPV感染率。

在所有感染HPV的基因型中，感染率排在前5位的依次为HPV52、16、53、58、51均为高危亚型，与中国农村地区较常见的HPV52、16、58、18四种高危亚型有所不同[23]，与中国女性感染率前5位亚型HPV16、58、52、18、33也有所差异[24]，全球范围内最常见的HPV感染亚型为HPV16、18、31、58、52，且以 HPV16、18感染最常见、致癌性最强，两者约占宫颈癌总数的70%[25-26]；但Clifford等[6]研究亚洲病例中，HPV58和52更常见。提示不同地理环境、社会生活习惯、社会区域的主要致病性HPV基因型存在一定的差异。

本研究还发现女性HPV感染率年龄构成曲线呈“V”字形分布，两个高峰分别为≥55岁年龄组和<25岁年龄组，与其他地区的年龄分布高峰相似，也表现为低龄组和高龄组[17-20]。在单一感染患者中，≥55岁组感染率最高(24.00%)，其次为25～29岁组(17.51%)，在多重感染患者中，<25岁组染率最高(14.71%)，其次为≥55岁组(10.50%)。对于<25岁低龄女性由于性生活初期自我保护意识差，性行为活跃，随年龄增长，HPV感染率呈下降趋势后再度上升，在≥55岁组高龄组达高峰。这可能与随着年龄的增长，机体免疫力逐渐降低，机体对HPV的自然清除率减弱，进而导致HPV感染率上升有关。因此，HPV在年轻女性及老年女性中持续感染的可能性更大，对于30岁以下年轻女性应加强疫苗接种等方面的指导，而对于55岁以上的女性HPV筛查可能更有意义。

分析高危型和低危型HPV感染与宫颈细胞学检查结果的关系发现，高危亚型HPV感染患者发生宫颈鳞状上皮内病变发生率明显高于低危亚型HPV感染患者，这表明高危亚型HPV感染的患者发生宫颈鳞状上皮内病变的风险更高，为了降低宫颈病变和宫颈癌的风险，对高危亚型感染的患者应及时采取治疗措施。由于样本量有限，在不同宫颈鳞状上皮内病变中，均发现高危亚型HPV感染患者的患病率高于低危亚型感染者，但仅在ASC-US、LSIL患者中有统计学意义。但是由于细胞学检测还需要结合组织病理学。因此，为对降低HPV感染的发病风险，应对高危人群采取预防和保护措施。一旦发生HPV感染，注重临床随访，特别是高危亚型感染。

综上所述，成都市女性HPV感染率较高，年龄分布以<25岁组和≥55岁组感染率最高，感染率排在前5位的基因亚型依次为高危亚型HPV52、16、53、58、51，高危亚型的HPV感染患者发生宫颈鳞状上皮内病变的风险较高。应针对高危人群进行早期发现、早期诊断和早期治疗，以防止疾病的发展。

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