曲靖市栽培半夏质量考察

朱正华 王 喆 张 馨

曲靖市食品药品检验检测中心，云南 曲靖 655000

半夏之名始见于《礼记·月令》，“五月半夏生，盖当夏半也”，《本草纲目》及《神农本草经》等经典著作中均有记载。依据其附图及文字说明即可确定本草半夏与2015版《中国药典》记载的半夏为同一种属。半夏(Pinellia ternata)属天南星目天南星科半夏属植物，古称地文、守田等，云南又名地珠半夏，药用部位为其干燥块茎。野生于山地、农田、溪边或林下[1]，云南属主产区之一。半夏喜温和潮湿、荫蔽的沙壤土环境，怕干旱及强光照射，耐寒，块茎能够自然越冬。繁殖主要以块茎和珠芽为主。半夏为多年生草本，块茎球形，夏、秋二季采挖，洗净，除去外皮和须根，晒干即可入药。块茎含有挥发油如：茴香脑，柠檬醛、1-新烯、β-辛香烯等。还含有有机酸、生物碱、微量元素等[2]。味辛、性温，有毒。归脾、胃、肺经。因半夏有毒性，其对眼、咽喉、胃肠等粘膜具有强烈的刺激性。故内服入药前须炮制去毒，保证其药用的安全、有效。根据炮制方法的不同，分为法半夏、姜半夏、清半夏、醋制半夏等。具有燥湿化痰、降逆止吐、消痞散结等作用。用于治疗湿痰寒痰，咳喘痰多，痰饮眩悸，风痰眩晕，胸闷胀满、恶心呕吐。外用治痈肿痰核[3]。

曲靖市属半夏主产区之一，传统以野生半夏入药，但由于野生半夏资源日趋减少，不能满足临床需要，故需发展半夏的家种栽培来缓解半夏市场的供需矛盾[4]。半夏的主要活性成份为多种生物碱、氨基酸[5]，本文以《中国药典》2015年版为依据通过对曲靖产半夏的原植物形态、药材外观性状、显微特征、薄层色谱鉴别、总酸含量测定等多个指标的研究，从而确定家种半夏的质量，为曲靖市地产半夏的人工种植、开发利用及临床应用提供理论依据。

药材来源： A：富源县后所镇铁翅药材种植基地 B：师宗县丹凤镇药材种植基地 C：沾益县炎方乡药材种植基地

1 仪器与材料

1.1 仪器 OLYMPUS电子显微镜(日本)；瑞士万通916型全自动电位滴定仪；METTLER TOLEDO XS 105电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公司)；HH-4型数显恒温水浴锅(国华电器有限公司)；AS系列超声波清洗机(天津奥特赛恩斯仪器有限公司)。

1.2 材料 半夏对照药材(批号：121272-201806)、缬氨酸对照品(批号：140681-201703)、亮氨酸对照品(批号：140687-201804)、精氨酸对照品(批号：140685-201707)、丙氨酸对照品(批号：140680-201604)等均为中国食品药品检定研究院提供；硅胶G薄层板(青岛海洋化工厂)；甘油(丙三醇)、乙醇、石油醚(60～90 ℃)、乙酸乙酯、丙酮、甲酸、甲醇、乙醚、三氯甲烷、硫酸、正丁醇、冰醋酸、茚三酮、氢氧化钠为国产分析纯；水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 鉴别

2.1.1 原植物形态鉴别 块茎圆球形，直径1～2 cm，具须根。叶2～5枚，幼时单叶。叶柄长5～8 cm，基部具鞘，鞘内、鞘部以上或叶片基部(叶柄顶头)有直径3～5 mm的珠芽，珠芽在母株上萌发或落地后萌发；幼苗叶片卵状心形至戟形，为全缘单叶，长2～3 cm，宽2～2.5 cm；老株叶片3全裂，裂片绿色，背淡，长圆状椭圆形或披针形，两头锐尖，中裂片长3～10 cm，宽1～3 cm；侧裂片稍短；全缘或具不明显的浅波状圆齿，侧脉8～10对，细弱，细脉网状，密集，集合脉2圈。花序柄长25～30(-35)cm，长于叶柄。佛焰苞绿色或绿白色，管部狭圆柱形，长1.5～2 cm；檐部长圆形，绿色，有时边缘青紫色，长4～5 cm，宽1.5 cm，钝或锐尖。肉穗花序：雌花序长2 cm，雄花序长5～7 mm，其中间隔3 mm；附属器绿色变青紫色，长6～10 cm，直立，有时“S”形弯曲。浆果卵圆形，黄绿色，先端渐狭为明显的花柱。花期5～7月，果8月成熟。结果：A、B、C三个样品的原植物形态均符合以上描述，经鉴定均为药典品半夏Pinelliaternata(Thunb.)Breit．

2.1.2 性状鉴别 本品呈类球形，有的稍偏斜，直径1～1.5 cm。表面白色或浅黄色，顶端有凹陷的茎痕，周围密布麻点状根痕；下面钝圆，较光滑。质坚实，断面洁白，富粉性。气微，味辛辣、麻舌而刺喉。具体见图1。此外，在云南很多地方有半夏的习用品、代用品。如盾叶半夏、土半夏、掌叶半夏等，均为民间习用草药，在用法和功效上也与药典半夏有所不同，不能混用，以免影响半夏的临床疗效。

样品A 样品B 样品C图1 半夏样品图

2.1.3 显微鉴别 本品粉末类白色：①淀粉粒：甚多，单粒类圆形、半圆形或圆多角形，脐点裂缝状、人字状或星状；复粒由2～6分粒组成。②草酸钙针晶：成束存在于椭圆形黏液细胞中，或随处散在，针晶长20～144 μm。③导管：螺纹为主，直径10～24 μm。 粉末显微图见图2。

1 2 31.淀粉粒；2.草酸钙针晶；3.导管图2 样品的显微特征

2.1.4 薄层色谱鉴别 取本品粉末1 g，加乙醇10 mL，加热回流1 h，滤过，滤液浓缩至0.5 mL，作为供试品溶液。另取半夏对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述两种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90 ℃)-乙酸乙酯-丙酮-甲酸(30∶6∶4∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。如图3。

1 2 3 4 5 6 7 8 9注：1、2为样品A；3、4为对照药材；5、6为样品B；7、8、9为样品C图3 半夏薄层色谱图(1)

取本品粉末1 g，加甲醇10 mL，加热回流30 min，滤过，滤液挥至0.5 mL，作为供试品溶液。另取精氨酸对照品、丙氨酸对照品、缬氨酸对照品、亮氨酸对照品，加70%甲醇制成每1 mL各含1 mg 的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取供试品溶液5 μL、对照品溶液1 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(8∶3∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105 ℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。如图4。

A B C 混合对照品图4 半夏薄层色谱图(2)

2.2 检查

2.2.1 水分 水分测定按照2015年版《中国药典》四部(通则0832)第二法(烘干法)测定三批药材水分，规定本品水分不得超过14.0%，结果A、B、C三个样品的水分均符合规定。结果见表1。

表1 样品水分含量

2.2.2 总灰分[8]按照灰分测定法《中国药典》2015年版四部(通则2302) 测定三批药材总灰分，规定本品总灰分不得超过4.0%，结果A、B、C三个样品的总灰分均超过规定限度，不符合规定。见表2。

表2 样品总灰分

2.2.3 浸出物[6]按照水溶性浸出物项下的冷浸法，《中国药典》2015年版四部(通则2201)测定三批药材浸出物，规定本品水溶性浸出物不得少于9.0%，结果A、B、C三个样品的浸出物均符合规定。见表3。

表3 品浸出物含量

2.3 含量测定[7]采用直接电位滴定法测定总酸含量。取本品粉末(过四号筛)约5 g，精密称定，置锥形瓶中，加乙醇50 mL，加热回流1 h，同上操作，再重复提取2次，放冷，滤过，合并滤液，蒸干，残渣精密加入氢氧化钠滴定液(0.1 mol/L)10 mL，超声处理(功率500 W，频率40 kHz)30 min，转移至50 mL量瓶中，加新沸过的冷水至刻度，摇匀，精密量取25 mL，照电位滴定法(通则0701)测定，用盐酸滴定液(0.1 mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白实验校正。每1 mL氢氧化钠滴定液(0.1 mol/L)相当于5.904 mg的琥珀酸(C4H6O4)。本品按干燥品计算，含总酸以琥珀酸(C4H6O4)计，不得少于0.25%，结果A、B、C三个样品的总酸含量均符合规定。见表4。

表4 样品总酸含量

3 讨论

研究从原植物形态、药材性状、显微鉴别[11]、薄层色谱鉴别、水分检查、总灰分检查、浸出物检查、总酸的含量测定这几方面来对比考察曲靖栽培半夏的药用质量，除总灰分测定超出规定限度以外，其他几项均符合2015年版《中国药典》的要求。

浸出物分别以水、乙醇和甲醇为溶剂，照水溶性浸出物项下的冷浸法和热浸法测定。实测药材3批结果表明，采用水为溶剂，热浸法与冷浸法的浸出物较高，且差异不大。根据方便快捷、可行性高为原则，本标准选择水溶性浸出物项下的冷浸法[6]。

酸碱滴定法一般常用于中药中总有机酸含量的测定，但由于中药的水提液或醇提液常常具有较深的颜色，指示剂的选择受到了限制，同时滴定终点指示不明显，影响实验的准确性。而电位滴定法是利用电极电位的突跃来指示终点的，并可实现自动化和连续滴定，具有灵敏、准确、可靠等优点[7]，因此用直接电位法对半夏中总游离有机酸含量进行测定。半夏中所含化学成分比较复杂，如还含有多种氨基酸和生物碱，炮制品法半夏中还含有甘草次酸等，其有效成分及毒性成分尚未完全明确[10]，所以现在只能以含量偏高、样品处理方法不太繁杂、检测成本不高的总酸为其控制指标，随着检测技术的不断提高，对其有效成分及毒性成分的含量测定会不断走向科学化、标准化和成熟化。

质量检测中总灰分的测定超标，灰分测定是衡量中药材质量的重要指标，它反应了药材中掺假及其受污染的程度，一般中药材的总灰分通常都在一定的范围内，故可用于中药材的纯度检查[8]。实验测定三批次供试品的总灰分测定结果均超出《中国药典》2015年版规定的中药材总灰分的最高限量，则必定有其他无机物污染或掺杂，常见的无机物为泥土、砂。根据对采集样品的仔细观察比较，发现其块茎上残留少许须根及未洗净的泥沙，分析原因应为农民在半夏的采收并进行粗加工的过程中，未除尽非药用部位(须根等)、未洗净泥沙等其它杂质[9]，排除总灰分这一影响因素，曲靖地区栽培半夏质量符合药用标准，可推广半夏的家种栽培，并制定一套切实可行的管理措施以确保其质量。