抗SSA60、SSA52、SSB/La抗体及抗着丝点B抗体在老年性干燥综合征干眼症诊断中的意义

胡海林 方思捷 崔昌 王俊芳 赵福涛

资料与方法

一、一般资料

选取2015年7月至2019年11月在我院风湿免疫科和眼科确诊为老年性干燥综合征的患者157例，其中男性21例，女性136例；年龄60～80岁，平均(67.54±4.90)岁。研究对象病历资料完整，符合老年性的标准和干燥综合征的诊断标准，SS诊断符合2002年干燥综合征国际诊断(分类)标准(US-EU)[2]。本研究通过上海交通大学医学院附属第九人民医院伦理委员会审查，所有患者均签署知情同意书。

二、方法

1．自身抗体检测:所有研究对象均于清晨空腹采静脉血5 ml分离血清，并保存于-20 ℃冰箱用于检测抗体。采用免疫印迹法(德国Human公司)和免疫双扩散法(北京和杰公司)检测抗SSA60抗体、抗SSA52抗体、 抗SSB/La抗体及抗着丝点B抗体。

2．干眼检测

(1)泪液分泌试验:用5 mm×35 mm Whatmann 41号滤纸，折5 mm置于下睑外1/3结膜处，5 min后取下滤纸测定湿长。

(2)泪膜破裂时间:用玻璃棒沾取2%的荧光素钠滴入结膜囊，嘱患者轻轻眨眼数次，自然睁眼平视前方。 在裂隙灯下用低亮度钴蓝光，仔细观察角膜表面，直至发现完整泪膜出现第一个破孔“黑洞”的时间，即泪膜破裂时间。检查均在同一暗室、同一裂隙灯下，由同一检查者进行，重复3次并取平均值。

(3)角膜荧光素染色评分:荧光素钠染色后，在裂隙灯钴蓝光下观察角膜染色情况。从瞳孔正中开始，将角膜划分为4个象限，每个象限出现的角膜染色面积按如下计分:0分无染色;1分为0～30个点状着色;2分为>30个点状染色但未融合;3分为片状染色，最终将计分相加，记录患者角膜荧光素染色评分。

“我们的个税制度要鼓励的应该是勤劳致富，如果靠劳动致富的人最高要缴纳45%的税，而在资本市场层层套利牟取暴利的人，却只交20%的税，不仅造成了新的不公平，更可能带来人才的外流，这是必须要引起相关部门重视的。”刘剑文说。

(4)干眼评分:干眼症评分如下：0分，无明显干眼症状;1分，有干眼症状,但出现频率低;2分，有干眼症状, 但不持续;3分，持续有干眼症状。

三、统计学处理

结 果

一、抗SSA60抗体、抗SSA52抗体、抗SSB/La抗体，抗着丝点B抗体在老年性干燥综合征患者血清中的检出率：人选的157例患者中，抗SSA60抗体阳性82例，占52.2%，抗SSA52抗体阳性82例，占52.2%，抗SSB/La抗体阳性52例，占33.1%，抗着丝点B抗体阳性18例，占11.4%。

二、干眼症在老年性干燥综合症患者中的检出率(157例，79例干眼症)：干眼症在老年性干燥综合症的阳性率为50.3%。

三、抗SSA60抗体、抗SSA52抗体、抗SSB/La抗体，抗着丝点B抗体在老年性干燥综合征患者干眼症的比较(表1)。

1.抗SSA60抗体阳性的患者出现干眼症与抗SSA60抗体阴性的患者相比差异有统计学意义(P<0.01)；抗SSA52抗体阳性的患者出现干眼症与抗SSA52抗体阴性的患者相比差异有统计学意义(P<0.01)；抗SSB/La抗体阳性的患者出现干眼症与抗SSB/La抗体阴性的患者相比差异有统计学意义(P<0.01)；抗着丝点B抗体阳性的患者出现干眼症与抗着丝点B抗体阴性的患者相比差异有统计学意义(P<0.05)；

2.抗SSA60抗体阳性和阴性患者干眼指标的比较：抗SSA60抗体阳性的患者相对于阴性患者来说，出现泪液分泌试验和泪膜破裂时间短、角膜荧光素染色评分和干眼评分高，2组患者差异均有统计学意义(P<0.001)。

3.抗SSA52抗体阳性和阴性患者干眼指标的比较：抗SSA52抗体阳性的患者相对于阴性患者来说，出现泪液分泌试验和泪膜破裂时间短、角膜荧光素染色评分和干眼评分高，2组患者差异均有统计学意义(P<0.001)。

4.抗SSB/La抗体阳性和阴性患者干眼指标的比较：抗SSB/La抗体阳性的患者相对于阴性患者来说，出现泪液分泌时间和泪膜破裂时间短、角膜荧光素染色评分和干眼评分高，2组患者差异均有统计学意义(P<0.01)

5.抗着丝点B抗体阳性和阴性患者干眼指标的比较：抗着丝点B抗体阳性的患者相对于阴性患者来说，出现泪液分泌时间短，2组患者差异有统计学意义(P<0.05)。泪膜破裂时间、角膜荧光素染色评分、干眼评分差异无统计学意义(P>0.05)。

表1 抗SSA60、SSA52、SSB/La抗体及抗着丝点B抗体在老年性干燥综合征患者干眼症的干眼指标的比较

讨 论

干燥综合征常常以淋巴细胞浸润和外分泌腺功能损伤为特征，多于40～60岁发病，好发于女性，女性和男性比例为 9:1[3]。本研究组女性和男性比例在6.5:1左右，比报道的比例略低。可能本研究是在60岁以上的老年人群中开展，故推测是男女性比例有所差异。

眼干、口干是干燥综合征的常见临床表现。1933年瑞典的眼科医生亨里克报道有19例干燥综合症患者有严重的干眼症状[4]，成人患病率为0.5～0.1%，是风湿病科第二大疾病[5]。干燥综合征在老年人群中，发病率为3%～4%[6]。干眼是由于泪液的量或质或流动动力学异常引起泪膜不稳定和(或)眼表损害，后导致眼不适症状及视功能障碍的一类疾病[7]。有研究证明，在美国老年人中近乎8%的人有干眼症，其中约有1/10都是干燥综合征患者[8]。而其中大概约2/3的干燥综合征患者还没进一步在临床上确诊为干眼症[9]，在美国干眼症的广泛发作已成为巨大的经济负担[10]。因此推测在干燥综合征患者中，干眼症比例可能更高。本研究表明干眼症在老年性干燥综合征中比例超过50%，约半数人都有干眼症。有研究表明[11]眼表炎症是干眼病理损害的重要机制，干燥综合征是慢性炎症免疫性疾病，我们可以推测干燥综合征患者干眼比例更高。

有研究表明，干燥综合征患者的血液中可检测多项免疫因子，成为评价干燥综合征的重要血清学检查，例如抗SSA和抗SSB抗体。抗SSA抗体，又称抗Ro抗体，属于小分子细胞质核糖核蛋白(scRNP)，由Anderson等人在1962年首次发现。抗SSA抗体的靶抗原是分子量为60KD和52KD两种蛋白，Ro60和Ro52是同一大分子复合体，所以把抗SSA抗体系统命名成为SSA 60抗体和SSA52抗体。该抗体也广泛出现于系统性红斑狼疮、系统性硬化症、多发性肌炎等多种自身免疫病。

有研究表明，干燥综合征的患者约71%抗SSA抗体阳性和约67%抗SSB抗体阳性[12]。抗SSB/La抗体是一种磷蛋白，相对分子质量为48000，在1979年Alspaugh与Clark实验就证明SSB抗原与1974年发现的胞浆抗原La是同一种物质，所以命名为抗SSB/La抗体[13]。定位于细胞核/细胞浆中，对于诊断干燥综合征有着重要的地位[14]。在传统的免疫印迹检测中，通常要60KD和52KD同时阳性才能报告抗SSA抗体阳性，临床标本单独出现时不能报告。所以本研究在老年性干燥综合征患者中同时检测抗SSA60、抗SSA52抗体，结果表明两者检测结果几乎一致。

有研究发现抗着丝点抗体(anticentromereantibody,ACA)和干眼症的相关性越来越多[15]，在PSS中的阳性率占3.7%～27.4%[16]。与ACA反应的有四种着丝蛋白，其中着丝蛋白-B是最主要的靶蛋白。而在PSS中，ACA仅仅能识别靶蛋白B[17]。因此本研究在老年性干燥综合征患者中检测抗着丝点B抗体的比例。有文献表明，抗着丝点B抗体阳性的原发性SS与抗着丝点B抗体阴性的SS有不同的临床特征，使得SS分为不同亚组[18-20]。本研究证明抗着丝点B阳性的患者与抗着丝点B阴性患者相比，泪液分泌时间缩短的意义更大，而泪膜破裂时间、角膜荧光素染色评分、干眼评分没有统计学意义。

综上所述，在老年性干燥综合征患者中检测抗SSA60、SSA52、SSB/La及抗着丝点B抗体在临床上有一定的意义，联合检测能提示干眼症的发生，抗SSA60、SSA52、SSB/La抗体可能意义更大。本研究是回顾性病例分析，纳入研究的患者病例数比较少，为单中心研究，后续可能需要更多样本以及多中心的临床研究等支持。