Hsp90α、AFP、血清铁蛋白联合检测对原发性肝癌的诊断价值研究

胥 慧,梁红梅,黄 华

[1.深圳市人民医院(暨南大学第二临床附属医院)内分泌科实验室,广东 深圳 518000；2.龙岗区第二人民医院检验科，广东 深圳 518000]

原发性肝癌(Primary hepatic cancer，PHC)是我国常见的肝脏恶性肿瘤之一，起病隐匿，发现时多是中晚期，已失去最佳治疗时机，疾病发展快，死亡率高[1-2]。早期发现、早期诊断、早期治疗是提高PHC患者生存期的关键。由于影像学诊断和病理学检测对早期诊断原发性肝癌价值有限，对原发性肝癌的诊断具有较高的敏感性和特异性的血清甲胎蛋白(AFP)成为目前临床最常用的肝癌标志物，但AFP在原发性肝癌中的阳性率为71.59%，但对原发性肝癌的诊断仍有部分假阴性[3-4]。因此联合检测多种肿瘤标志物有助于提高原发性肝癌临床诊断阳性率。血清铁蛋白(SF)在 PHC 患者中显著升高且与肿瘤血管侵袭或肝内转移关系密切。热休克蛋白90α(Hsp90α)是潜在的肿瘤标志物。本文通过对Hsp90α、AFP、SF联合检测来探讨其对原发性肝癌的诊断价值，现报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料：选取我院2015年1月～2017年1月原发性肝癌患者血清标本70例，术后病理确诊，符合原发性肝癌诊断标准(2011版)，男41例，女29例，年龄37～72岁，平均(45.73±5.79)岁；肝炎患者血清标本70例，经临床症状体征、肝功能检查以及PCR法定量检测血清乙肝病毒DNA确诊，符合病毒性肝炎防治方案，男38例，女32例，年龄36～70岁，平均(44.29±5.23)岁；健康体检血清标本70例，男36例，女34例，年龄40～68岁，平均(45.19±5.46)岁。排除标准：①免疫系统疾病或服用免疫药物者；②心、肺、肝、肾等器官功能异常及其他肿瘤者；③严重的感染性疾病。PHC组、肝炎组及健康体检组在年龄、性别等一般临床资料方面差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。医院伦理委员会批准，三组人员及其家属均了解此次研究内容，全部签署知情同意书。

1.2方法：清晨空腹采集静脉血5 ml，分离血清，置冰箱待测。SF、AFP检测采用电化学方法，使用的E170全自动免疫分析仪及其配套试剂均由美国罗氏公司提供。ELISA法检测Hsp90α，定量检测试剂盒购自上海领潮科技生物有限公司。ELISA法检测乙肝血清免疫学指标，试剂盒购自上海晶抗生物工程有限公司。AFP>20 ng/ml，SF<219 ng/ml，Hsp90α>82.06 ng/ml为阳性表达。灵敏度=真阳性例数/PHC患者总数×100%；特异性=真阴性例数/PHC患者总数×100%；准确性=(真阳性例数+真阴性例数)/PHC患者总数×100%。

2 结果

2.1三组人员血清TM各指标水平的比较:PHC组AFP、SF及Hsp90α均显著高于肝炎组和健康体检组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

组别例数AFP(μg/L)SF(ng/ml)Hsp90α(ng/ml)PHC组70212.34±63.54254.33±127.67147.78±32.74肝炎组7013.19±7.87①162.37±84.51①75.87±17.31①健康体检组707.54±3.65①125.43±56.72①71.25±15.64①t1值36.8047.10724.451t2值38.01710.91724.956

注：t1为PHC组与肝炎组相比；t2为PHC组与健康体检组相比；与PHC组比较，①P<0.05

2.2PHC组内肿瘤指标单独与联合检测的结果比较：PHC组血清AFP敏感性为72.86%，SF的敏感性为70.00%，Hsp90α的敏感性为30.00%。多项指标联合检测HPC敏感性为95.71%，与一项或两项联合检测相比，敏感性、准确性均有不同程度的升高，但与一项检测相比，差异具有统计学意义(P<0.05)。与部分单项检测相比，特异性略有下降。见表2。

表2 PHC组内肿瘤指标单独和联合检测的结果比较(%)

项目准确性敏感性特异性AFP78.57272.86182.86SF71.4370.0080.00Hsp90α60.0030.0080.00AFP+ SF88.5787.1478.57AFP+ Hsp90α85.7184.2977.13AFP+SF+ Hsp90α97.1495.7178.57

注：与AFP单项检测比较，χ2=13.806、11.351，P<0.05

3 讨论

AFP在胎儿肝脏合成，在正常组织中几乎不产生或产量甚微，当肝细胞发生癌变时，由于低甲基化作用导致AFP的基因表达开放，于血清中可检测到AFP浓度显著升高，因此AFP成为PHC早期诊断的血清标记物。许多国内外专家和机构均指定 AFP作为唯一的原发性肝癌肿瘤标志物，并且AFP 检测对手术治疗及放疗、化疗预后具有重要的临床价值[5]。

有研究报道，SF是铁贮存于人体的主要形式之一，参与对造血和免疫系统的调控，合成增加见于炎性反应、肝脏病变及恶性肿瘤，尤其是原发性肝癌，肿瘤坏死因子 α诱导肝癌细胞产生铁蛋白，血清中铁蛋白升高[6]。PHC发生时，肿瘤的临床TNM分期、淋巴结转移及远处脏器转移与SF水平呈正相关(P<0.05)，在进展为 Ⅲ 期和Ⅳ 期患者中SF水平有进一步上升的趋势，可作为肝癌的诊断、治疗及疗效监测的辅助手段[7]。Hsp90α作为热休克家族的主要成员，在多种恶性肿瘤中异常表达，加速细胞的恶性转变及影响肿瘤血管形成，与肿瘤的发生发展、侵袭浸润和转移关系密切，对肿瘤的病情监测和治疗效果评价有一定的提示作用。Hsp90α可能在肝细胞恶变的初始期或癌前期即参与细胞的转化[8]。

本文研究显示， PHC组的AFP、SF及Hsp90α水平显著高于肝硬化组和健康体检组，差异有统计学意义(P<0.05)，表明肝癌发生时，三者活性大量表达，与肿瘤的发生发展、侵袭与转移关系密切。研究显示，PHC患者血清AFP水平与FER呈正相关(P<0.05)[9]。

崔灿等人研究发现，PHC组中的AFP及Ferritin水平远高于良性肝病组和健康对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。原发性肝癌组的AFP及Ferritin水平阳性率高于良性肝病组和健康对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。肿瘤标志物联合检测敏感度84.8%显著优于单一指标检测敏感度，特异性和准确性分别为88.9%和85.2%，较部分肿瘤标志物特异性有所降低[10]。本研究中，三者联合检测的准确性与敏感性分别为88.57%和95.17%，远高于二者联合检测或单一指标检测，差异有统计学意义(P<0.05)，特异性为78.57%，略低于二者联合检测或单一指标检测，提示肿瘤标志物的联合检测对于提高肝癌诊断的敏感性和准确性具有良好的互补作用。AFP单项检测对PHC诊断存在不同程度的局限性，会出现一定程度的漏诊和误诊，联合检测AFP和SF及Hsp90α可以有效提高AFP阴性或低浓度病例的检出率，提高了PHC的检出率和诊断PHC的敏感性，可以显著提高原发性肝癌的确诊率，具有更好的临床应用价值。