红花保存年限、有效成分含量和颜色值的相关性分析

2020-07-09王洁苏少锋姚仁川任超翔裴瑾陈江

中国药房 2020年5期

王洁　苏少锋　姚仁川　任超翔　裴瑾　陈江

中圖分类号 R284.3 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2020）05-0554-05

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.05.10

摘要目的：考察红花保存年限、有效成分含量与颜色值的相关性，为不同保存年限的红花药材质量评价提供参考。方法：以来自同一产地的不同保存年限（0、1、2年，各8批）的24批红花药材为样品，采用高效液相色谱法测定其羟基红花黄色素A（HSYA）和山柰酚的含量，采用分光测色仪测定其粉末颜色值[明暗程度值（L*）、红绿色色调值（a*）、黄蓝色色调值（b*）]，并应用SPSS 19.0统计软件对其保存年限、有效成分含量和颜色值进行相关性分析。结果：保存1年或2年的药材中山柰酚含量仍较高（分别为0.161%、0.061%），但药材中HSYA含量随着保存年限的延长而降低（保存0、1、2年的药材中HSYA平均含量分别为2.46%、1.58%、1.51%），且药材颜色变暗（a*值降低）。相关分析结果显示，HSYA含量与颜色值L*、a*呈显著正相关（r=0.430、0.781，P<0.05或P<0.01），HSYA含量与保存年限呈显著负相关（r=-0.777，P<0.01），其余各变量间无相关性（P>0.05）。结论：保存年限越长，红花药材颜色越深、HSYA含量越低，故该药材不宜过年或多年保存。

关键词红花;保存年限;羟基红花黄色素A;山柰酚;色泽;品质;相关性分析

Correlation Analysis of Storage Life and Effective Composition Content with Color Value of Carthamus tinctorius

WANG Jie1，2，SU Shaofeng1，YAO Renchuan3，REN Chaoxiang1，2，PEI Jin1，2，CHEN Jiang1，2（1.College of Pharmacy， Chengdu University of TCM， Chengdu 611137， China;2.State Key Laboratory Breeding Base of Systematic R&D and Utilization of TCM Resources， Chengdu 611137， China;3.Sichuan Fuzheng Pharmaceutical Corporation， Chengdu 611730， China）

ABSTRACT OBJECTIVE： To investigate the correlation of storage life and effective composition content with color value of Carthamus tinctorius， and to provide reference for the quality evaluation of C. tinctorius with different years of storage. METHODS： Using 24 batches of C. tinctorius from same place of production with different years of storage （0， 1， 2 years， 8 batches each type） as samples， the contents of hydroxysafflor yellow A （HSYA） and kaempferol were determined by HPLC. Color value [lightness value （L*）， red-green value （a*）， yellow-blue value （b*）] were determined by spectrophotometer. SPSS 19.0 statistical software was used to analyze the correlation of storage life and effective composition content with color value. RESULTS： Kaempferol content was still high after 1 year or 2 years of storage （0.161%， 0.061%， respectively）. However， the content of HSYA decreased with the prolongation of the storage life （the average content of HSYA were 2.46%， 1.58%， and 1.51% after storage 0， 1 and 2 years， respectively）， and the color of the drug became darker （a* value decreased）. Results of correlation analysis showed that the content of HSYA was positively associated with color value L*， a* （r=0.430， 0.781，P<0.05 or P<0.01）; the content of HSAY was negatively associated with storage life （r=-0.777，P<0.01）. There was no correlation between the remaining variables （P>0.05）. CONCLUSIONS： The longer the storage life， the darker the color and the lower the content of HSYA， so it is not suitable for over year and multiyear preservation.

2.1.5 含量测定结果将24批红花药材分别按“2.1.2”项下方法制备成供试品溶液，然后分别按“2.1.3”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并采用外标法计算HSYA、山柰酚含量。每批药材重复测定2次，取平均值，24批红花中HSYA、山柰酚含量测定结果见表2。

表2 24批红花中HSYA、山柰酚含量测定结果（n=2）

结果显示，当年采收（保存年限为0）的药材中HSYA含量在1.78%～2.91%之间，平均为2.46%，达到2.00%以上的有7份样品;保存1年的药材中HSYA含量在1.34%～1.78%之间，平均为1.58%;保存2年的药材中HSYA含量在1.34%～1.90%之间，平均为1.51%。当年采收的红花中，山柰酚含量在0.041%～0.131%之间，平均为0.080%，达到0.1%以上的有3份样品;保存1年的药材中山柰酚含量在0.058%～0.488%之间，平均为0.161%，达到0.1%以上的有6份样品;保存2年的药材中山柰酚含量在0.031%～0.090%之间，平均为0.061%。可见，随着保存年限的延长，红花中HSYA含量逐渐降低;山柰酚含量虽在保存1年时有所增加，但保存2年时又减少。

2.2 红花粉末颜色值测定

参考课题组前期报道的方法对红花粉末颜色值进行测定[6]。测定条件：波长范围为380～780 nm，扫描速度为600 nm/min，狭缝宽度为1 nm，照明光源為D65，视场为10°。具体测定方法：首先进行黑白板校正，校正后取红花样品粉末适量，平铺于比色皿中，依次对24批样品进行测定，记录颜色值[明暗程度值（L*）、红绿色色调值（a*）、黄蓝色色调值（b*）]。每个样品测定3次，取平均值。24批红花粉末颜色值测定结果见表3。

表3 24批红花粉末颜色值测定结果（n=3）

结果显示，当年采收（保存年限为0）的红花样品颜色值L*在51.06～55.03之间，平均为53.84;a*在18.81～24.89之间，平均为22.88;b*在22.90～28.73之间，平均为26.54。保存1年的药材中样品L*值在51.93～54.82之间，平均为53.15;a*在17.56～21.31之间，平均为19.53;b*在23.92～28.63之间，平均为25.38。保存2年的药材中样品颜色值L*在50.29～55.65之间，平均为52.59;a*在18.13～23.17之间，平均为20.80;b*在21.00～30.23之间，平均为24.95。可见，保存1～2年后，红花颜色明显变暗。

2.3 相关性分析

2.3.1 红花保存年限、有效成分含量和颜色的相关性分析应用SPSS 19.0统计软件，对24批红花样品中保存年限、有效成分含量和颜色值进行相关性分析。结果显示，保存年限与HSYA含量呈显著负相关（P<0.01），颜色值L*、a*与HSYA含量呈显著正相关（P<0.05或P<0.01），其余各变量之间均无相关性（P>0.05）。因此，本研究主要探讨红花中HSYA含量、保存年限以及颜色值L*、a*之间的相关性。红花的保存年限、有效成分含量与颜色值的相关性分析结果见表4。

2.3.2 回归方程的建立利用SPSS 19.0统计软件，分别以HSYA含量为自变量、颜色值（L*、a*）为因变量，保存年限为自变量、HSYA含量为因变量进行回归分析。结果显示，HSYA含量与颜色值L*、a*的决定系数R2分别为0.185、0.610，说明颜色值a*有61%受HSYA含量的影响，而颜色值L*受HSYA含量的影响不大;保存年限与HSYA含量的决定系数R2为0.603，说明HSYA含量有60.3%受保存年限的影响。结果表明，保存年限的长短对HSYA含量有较大影响，HSYA含量的高低也会表现在红花药材的颜色上。HSYA含量与颜色值L*、a*的回归分析结果见表5，保存年限与HSYA含量的回归分析结果见表6。

表5 HSYA含量与颜色值L*、a*的回归分析结果（模型汇总）

回归方程的方差分析结果表明，P均小于0.05，说明拟合的回归方程在统计学上是显著的。最终得到回归方程分别为：Y（颜色值L*）=1.28X（HSYA含量）+50.82、 Y（颜色值a*）=3.575X（HSYA含量）+14.448、Y（HSYA含量）=0.477X（保存年限）-2.329。

3 讨论

中药是一种特殊的商品，常因流通不畅、市场不稳等因素而导致久贮现象的产生。除少数要求陈用的中药外，绝大多数中药材会随着贮藏时间的延长而出现变色、虫蛀、泛油等变质现象，其内在的有效成分含量可能也会降低，进而使临床应用的中药材和饮片质量得不到保障，给患者带来安全隐患。而历版《中国药典》均未规定中药材的有效年限，故而市场上中药材和饮片的质量难以得到保障。由于以传统性状评价判别中药材的质量存在很强的主观性，而通过测定有效成分含量来评价中药材质量的操作复杂繁琐。基于色差原理的分光测色仪能够以量化的数据，客观、快速、准确地反映药材的颜色，而药材颜色又与有效成分含量及贮藏时间存在一定的相关性。因此，近年来色差分析原理逐渐被引入中药质量评价中[6-14]。如徐红霞等[6]利用色差法对不同产地的红花进行了分析，结果表明颜色值可用来反映红花中HSYA含量。

本研究以保存不同年限的24批红花为样品，对HSYA、山柰酚含量以及药材颜色进行测定，并对其有效成分（HSYA和山柰酚）含量、颜色值、保存年限进行了相关性分析。结果表明，山柰酚含量与保存年限、颜色值间均无相关性;HSYA含量与颜色值L*、a*以及保存年限均有显著相关性。随着保存年限的延长，HSYA含量及颜色值L*、a*均明显降低，红花药材颜色变暗;山柰酚含量变化趋势不明显，保存1年的药材中含量比当年采收及保存2年的药材高。

综上所述，保存年限对红花质量有显著影响，主要表现在HSYA的含量变化上。与当年采收的红花相比（HSYA平均含量为2.46%），保存1、2年的红花中HSYA的平均含量分别为1.58%、1.51%。从外观上，可根据颜色的明暗程度来反映不同保存年限红花药材的质量优劣。本研究结果可为红花药材的保存年限及优质药材的筛选、鉴定提供一定参考，也有利于市场上红花药材的质量控制。但本研究所用样本量有限，所测的化学成分种类较少，在以后的研究中，本课题组将进一步扩大样本量，并增测更多的成分进行进一步验证。

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