新冠疫情下复合酚消毒效果的试验研究

2020-07-04牛志勇陈淑芳赵素娟

今日畜牧兽医 2020年5期

牛志勇，陈淑芳，赵素娟

（1.河北省兽用液体制剂创新中心 050200；2.河北科星药业有限公司 050200）

复合酚为酚（41.0%～49.0%）、醋酸（22.0%～26.0%）及十二烷基苯磺酸等配制而成的水溶性混合物，由河北科星药业有限公司生产。本品为国内生产的新型、广谱、高效消毒剂，能杀灭多种细菌、霉菌和病毒，对多种寄生虫卵也有杀灭作用，主用于畜禽舍、笼具、饲养场地、排泄物的消毒。但国内对此报道较少，为了进一步了解其杀菌效果，为临床提供依据，我公司特对其进行消毒效果实验，本实验采用悬液定量法进行试验研究，现将结果报告如下。

1 方法

1.1 菌种

金黄色葡萄球菌ATCC 6538、大肠杆菌8099（购自中国兽医药品监察所）、某公司F-5 栋车间的常在菌。

1.2 标准培养基

营养肉汤培养基（NB）、普通营养琼脂培养基（购自北京奥博星生物技术有限公司）。

1.3 标准菌悬液的制备

开封冻干菌种后，以普通肉汤溶化悬浮菌体，然后接种到固体培养上划线培养，37℃培养至细菌达到生长平衡期时选择典型的单体菌落在试管固体培养基斜面上传代，于37℃培养24h。挑取上述第2 代培养物中典型菌落，接种于试管固体培养基，于37℃培养24h，即为第3 代培养物。取菌种第3 代的试管固体培养基斜面新鲜培养物，用稀释液洗下并配制成试验菌悬液。

1.4 常在菌悬液的制备

将6 块固体营养培养基，开盖放置于鸡舍内，分别于不同的方位，0.5h 后盖盖，膜封口，于37℃培养18～24h。分别挑取不同方位固体营养上的培养物中典型菌落，接种于试管固体培养基中，于37℃培养24h，取试管固体培养基斜面新鲜培养物，用稀释液洗下并配制成试验常在菌悬液。

1.5 试验菌的活菌计量

1.5.1 稀释：先将菌悬液用比浊法初步估测菌液含菌浓度，然后用营养肉汤做10 倍系列稀释。取0.1mL 菌悬液至0.9mL 营养肉汤中做101倍稀释标记为1 号稀释度；从1 中取0.1～0.9mL营养肉汤中做102倍稀释标记为2 号稀释度；依次类推稀释至107倍标记为7 号稀释度。

1.5.2 接种： 4～7 号各吸取0.1mL 菌液于营养琼脂平皿内。每个稀释度接种3 个平皿。将平皿上的菌悬液摇匀后置37℃恒温箱培养24h。

1.5.3 计数：选每个平皿菌落数在30～300 个者计数。将计数换算成每毫升原液的菌落数，并计算平均菌数。平板间的误差率不能超过10%。

1.6 中合剂鉴定试验

用金黄色葡萄球菌ATCC 6538、大肠杆菌8099、某F-5 栋车间的常在菌，设计6 组，用悬液法进行试验。结果判定，以第1组无试验菌，或仅有极少数试验菌菌落生长，第2 组有较第1 组为多，但较第3、4、5（组）为少的试验菌菌落生长，第3、4、5（组）有相似量试验菌生长，且1×107cfu/mL～5×107cfu/mL 之间，其组间菌落数误差率应不超过15%，第6 组无菌生长，则判定中合剂合格。连续3 次试验取得合格评价。分组情况见下表