蒲公英炮制中总黄酮含量变化及对胃炎治疗分析

周学东 陈艳 林瑞

摘要 目的：研究蒲公英炮制中總黄酮含量变化及对胃炎治疗的理论。方法：选取2016年4月1日至2018年4月1日成都市公共卫生临床医疗中心收治的胃炎患者30例作为研究对象，随机分为胃炎对照组、蒲公英原药组和蒲公英炭组，每组10例，另选10例健康体检者为健康对照组（n=10）。使用乙醇对蒲公英原药材以及炮制后的蒲公英炭进行总黄酮提取，紫外分光光度计测量炮制前后总黄酮的提取率及含量变化。模型建立成功后观察组蒲公英原药组每天服用蒲公英原药材药液，观察组蒲公英炭药则每天服用炮制后的蒲公英炭药液，健康对照组及胃炎对照组每天服用去离子水，8周后检测相关指标。结果：炮制后的蒲公英中总黄酮含量比炮制前降低了38%，炮制中总黄酮有所损失;患者的胃蛋白酶活性降低，蒲公英原药组的效果比蒲公英炭组好，蒲公英原药组和蒲公英炭组的患者血清GAS升高，IL-1β和IL-6在胃炎对照组中含量升高。与健康对照组比较，其中对于IL-1β而言，2个观察组与胃炎对照组比较都有所下降。对于IL-6而言有相同的趋势。而且蒲公英原药组比蒲公英炭组效果更好。结论：蒲公英在炮制过程中总黄酮会有损失，其含量的变化影响着对胃炎的改善效果，试验表明蒲公英炮制前的原药对胃炎改善效果更好，并且这种效果可能是通过调节炎性反应因子IL-1β和IL-6来实现。

关键词 蒲公英;炮制;总黄酮含量;胃炎治疗;胃黏膜营养因子;白细胞介素-1β;白细胞介素-6;炎性反应因子

Changes of Flavonoid Content in Herba Taraxaci and the Analysis of It on the Treatment of Gastritis

ZHOU Xuedong，CHEN Yan，LIN Rui

（Public Health Clinical Center of Chengdu，Chengdu 610000，China）

Abstract Objective：To study the changes of total flavonoids in the processing of Herba Taraxaci and the theory of treatment for gastritis.Methods：A total of 30 patients with gastritis admitted to Public Health Clinical Center of Chengdu were selected as the research objects and were divided into a gastritis control group（n=10），a Herba Taraxaci active drug group（n=10）and a Herba Taraxaci charcoal group（n=10）.In addition，10 healthy subjects were selected as the healthy control group（n=10）.Ethanol was used to extract the total flavonoids from the original dandelion medicinal material and the processed dandelion charcoal，and the extraction rate and content change of the total flavonoids before and after the processing were measured by an ultraviolet spectrophotometer.After the model was successfully established，the observation group dandelion original medicine group took dandelion original medicinal liquid，the observation group dandelion charcoal medicine took the processed dandelion charcoal liquid every day，the healthy control group and the gastritis control group took deionized water every day.8 weeks later relevant indicators were detected.Results：The content of total flavonoids in Herba Taraxaci after processing was 38% lower than that before processing.The total flavonoids were lost during processing; the pepsin activity of the patients was reduced，and the effect of the dandelion original drug group was better than that of the Herba Taraxaci charcoal group.The serum GAS of the Herba Taraxaci original drug group and the Herba Taraxaci charcoal group increased，and IL-1β and IL-6 were in the content in the gastritis control group increased.Compared with the healthy control group，for IL-1β，the 2 observation groups had a decrease compared with the gastritis control group.For IL-6 there is the same trend.The Herba Taraxaci herb group was better than the Herba Taraxaci charcoal group.Conclusion：The total flavonoids of Herba Taraxaci will be lost in the process of processing，and the change of its content will affect the improvement effect on gastritis.Experiments show that the original drug of Herba Taraxaci before processing has better improvement effect on gastritis，and this effect may be achieved by regulating the inflammatory factors il-1 and il-6.

Keywords Herba Taraxaci; Processing; Total flavonoids content; Gastritis treatment; Gastric mucosal nutrition factor; Interleukin-1β; Interleukin-6; Inflammatory factor

中图分类号：R283.1;R256.39;R573.3;R94文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2020.23.013

慢性胃炎是胃黏膜的慢性炎性反应性疾病，被认为是东方国家普通人群内镜检查中最常见的[1]。我国慢性胃炎的诊断和治疗现状在全国专家共识公布后尚不明确，如对某些内镜医师而言，仅凭黏膜表现而无活检和病理学证据诊断慢性萎缩性胃炎仍是一种常见的做法[2-4]。另一方面，慢性胃炎的治疗在临床医师中差异很大，一些临床医师根据经验处方质子泵抑制剂（Proton Pump Inhibitor，PPI），而另一些临床医师使用黏膜保护剂，偶尔提供天然补充剂或草药[5-6]。黄酮类化合物具有很强的抗氧化和自由基清除作用，具有抗炎、抗过敏、抑制细菌等作用，最近有文献表明其具有改善胃炎的作用，天然来源的小分子量的生物黄酮类化合物，能迅速被人体吸收，同时能通过血脑屏障进入脂肪组织[7-9]。蒲公英为多年生草本植物，全株含有白色乳汁，叶丛生，匙形或狭长倒卵形，边缘羽状浅裂或齿裂[10]，冬末春初抽花茎，顶端生一头状花序，开黄色舌状花，果实成熟时形似一白色绒球，可随风飞散[11]，其嫩株可供食用和作猪饲料，根茎可以入药，有解毒清热的作用，又是健胃剂[12]，也指这种植物的花。蒲公英含有大量的总黄酮的天然来源物，但在蒲公英炮制过程中，其含有的总黄酮量会有发生很大变化，也对胃炎的改善有一定的影响，因此，本研究主要研究蒲公英炮制过程中总黄酮含量的变化及对胃炎疗效的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2016年4月1日至2018年4月1日成都市公共卫生临床医疗中收治的胃炎患者30例作为研究对象，随机分为胃炎对照组、蒲公英原药组和蒲公英炭组，每组10例，另选10例健康体检者为健康对照组（n=10）。本研究已经获得医院医学伦理委员会批准（伦理审批号：019026），且受试者均已签署书面知情同意书。

1.2 诊断标准 胃镜诊断标准：观察黏膜出现红白相间、以白色为主，黏膜中的皱襞变平、甚至消失，黏膜中的血管露显，呈现出颗粒状或者是结节样。如果伴胆汁性反流、糜烂、黏膜内壁出血等情况，描述成萎缩性胃炎伴胆汁性反流、糜烂、黏膜内出血等。在胃镜下观察，萎缩性胃炎会有2种类型：即单纯的萎缩性胃炎以及萎缩性胃炎伴增生。单纯的萎缩性胃炎主要表现出黏膜红白相间，以白色为主，皱襞会变平、甚至消失，血管露显;萎缩性胃炎伴增生的主要表现有黏膜呈颗粒状或者结节状。

1.3 纳入标准 年龄>20岁;初次就诊者;对本次研究涉及的药物无过敏者。

1.4 排除标准 肝炎病毒及人类免疫缺陷病毒感染者;自身免疫性疾病患者;恶性肿瘤患者;严重的心脑肝肾等疾病患者。

1.5 脱落与剔除标准 研究期间失访者;转至其他医疗机构就诊者。

1.6 治疗方法 观察组服用蒲公英炭药，其中胃炎对照组以及2个观察组的患者日常自由引用使用去离子水配制的去氧胆酸钠溶液。模型建立成功后观察组蒲公英原药组每天服用蒲公英原药材药液，观察组蒲公英炭药则每天服用炮制后的蒲公英炭药液，健康对照组以及胃炎对照组则每天服用去离子水，试验8周后检测相关指标。

1.7 观察指标 1）蒲公英炮制前后总黄酮含量变化检测：将蒲公英进行炮制后，提取前后药材的总黄酮含量。总黄酮是一类黄酮类化合物，中间主要包括两类物质，一类物质是黄酮苷，另一类物质是黄酮醇苷，这两类物质与三氯化铝发生化学反应后会生成铝盐络合物，这个物质呈黄色，并且黄色的深浅与蒲公英中总黄酮的含量成正比利关系，可以利用此特征定量测定蒲公英中的总黄酮含量，以便观察炮制前后总黄酮的变化。使用万分之一的天平准确地称取同量的炮制前后的蒲公英原药和蒲公英炭，加入液氮充分研磨，随后加入95%的无水乙醇，加热回流3次，合并每次的提取液，使用旋转蒸发仪蒸发浓缩，收集后使用85%的无水乙醇稀释至4 mg/mL，加入NaNO2和AlCl3以及NaOH溶液反应后在510 nm下检测;配置标准平，然后使用紫外分光光度计检测样本OD值，绘制标曲，计算出样本总黄酮含量。2）患者体质量变化：为了观察蒲公英炮制前后对患者胃炎的影响，试验期间定期测量患者体质量，并做记录，试验结束时，收集患者外周静脉血。3）患者胃蛋白酶的活性检测：试验结束后，收集患者的胃液，经过离心收集上清液，按照胃蛋白酶检测试剂盒检测每组患者的胃蛋白酶活性，同时使用酸度计测量胃液pH值。4）血清GAS、IL-1β、IL-6含量检测：试验结束后，收集患者血清，根据检测试剂盒检测GAS（胃黏膜营养因子）、IL-1β（白细胞介素-1β）、IL-6（白细胞介素-6）含量。

1.8 疗效判定标准 患者的胃镜检查：在试验结束后，实施胃窥镜检查。按照表1炎性评分标准对每组患者进行评分。

1.9 统计学方法 采用SPSS 20.0統计软件对数据进行分析，计量数据以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用单因素方差分析或者重复测量的方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验;计数资料采用百分率（%）表示，组间比较采用χ2分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 炮制前后总黄酮变化 通过提取检测，炮制前后每个样本做5个平行检测，定量计算统计后发现，炮制后的蒲公英中总黄酮含量为8.22 μg/mL，而与炮制前的13.14 μg/mL相比降低了38%，差异有统计学意义，可见在炮制过程中总黄酮有所损失。见表2。

2.2 患者的体质量变化 2个观察组与胃炎对照组比较，体质量都有改善，但比较而言，蒲公英原药组的改善效果更好，优于炮制后的蒲公英炭组。见表3。

2.3 患者胃镜观察结果 健康对照组显现出正常的状态，实验组对胃炎对照组有很大改善，其中蒲公英原药组的效果更好，更接近与正常组的状态。见表4。

2.4 患者胃蛋白酶检测结果 试剂盒检测胃蛋白酶活性，胃炎会导致患者的胃酸pH值、胃液分泌量以及胃蛋白酶活性的降低，而2个观察组都能改善这种情况，但是蒲公英原药组的效果比蒲公英炭组的好。见表5。

2.5 患者血清中GAS，IL-1β、IL-6检测

GAS（胃黏膜营养因子）可以刺激胃酸和胃蛋白酶的分泌，患有胃炎的患者GAS含量会大幅度降低。IL-1β（白细胞介素-1β）和IL-6（白细胞介素-6）是2类促炎因子。试验结果表明胃炎对照组的GAS含量比正常组的低。而蒲公英原药组和蒲公英炭组的患者血清GAS含量升高，与胃炎对照组比较差异有统计学意义。IL-1β和IL-6在胃炎对照组中含量升高与健康对照组比较（P<0.01），其中对于IL-1β来说，2个观察组与胃炎对照组比较都有所下降。对于IL-6来说有相同的趋势。而且蒲公英原药组比蒲公英炭组效果更好。

这些结果在一定程度上说明了患者患有胃炎会影响GAS、IL-1β和IL-6的变换，而蒲公英改善胃炎的症状可能也是通过调节这些因子来实现。见表6。

3 讨论

蒲公英是一种天然植物，其具有抑菌抗炎作用，一般会经过炮制后使用，但在炮制过程中会有活性物质的损失[13-14]。有文献报道说炮制过程中蒲公英中的总黄酮含量会发生变化，对其作用效果有一定的影响[15]。我们在研究过程中通过对炮制前后蒲公英总黄酮量的提取，发现炮制后的蒲公英中总黄酮含量为8.22 μg/mL，而与炮制前的13.14 μg/mL比较降低了38%，这些结果表明在炮制过程中蒲公英总黄酮有所损失。我们研究还发现胃炎对照组的患者的体质量比健康对照组降低，其中体质量降低了17.4%，这说明胃炎对患者的生长以及胃部有很大的伤害[16-19]。2组观察组比较胃炎对照组都有改善，但比较而言，蒲公英原药组的改善效果更好，优于炮制后的蒲公英炭组。

本研究发现，慢性炎性反应的分级可见健康对照组显现出正常的状态，观察组对胃炎对照组有很大改善，其中蒲公英原药组的效果更好，更接近与正常组的状态。血清炎性反应递质包括白细胞介素、白细胞介素-6、白细胞介素-8、白细胞介素-10、肿瘤坏死因子-α、转化生长因子、单核细胞化学引诱物蛋白1和移行细胞[20-23]。这些细胞因子是已知的介导胃损伤或免疫抗病反应[24-25]。IL-6被观察到高架早在小儿胃损伤，也许为了防止惠普和/或EBV感染，EBV不仅找到了一种避免IL-6但使用这种细胞因子来抵消胃黏膜免疫反应和持续。据报道在病毒和细菌合并感染的存在IL-6导致巨噬细胞的抑制巨噬细胞与胶原受体结构的表达（MARCO），将无法吞噬细胞细菌和病毒感染细胞[23]。

慢性胃炎属中医“胃脘痛”“胃痞”范畴。早在清代的《外科证治全生集》卷二“胃脘痛”记载：取鮮蒲公英，瓦上炙枯黑存性，研末，每取五分，滴花烧酒，调团口含，再以烧酒送咽。痛息，接服五日痊愈，戒食生冷。目前多采用疏肝理气等方法。作者自拟黄连公英汤中黄连、蒲公英清热解毒为君药，延胡索、陈皮、制香附理气和胃为臣药，白芍柔肝止痛为佐，甘草调和为使。全方共奏清热解毒，理气和胃，柔肝止痛的功效。蒲公英性寒，有清热解毒、消肿散结、利湿退黄的功效。蒲公英对消化不良、便秘都有改善的作用。现代药理学研究发现，蒲公英有抗菌消炎的作用，可杀灭幽门螺杆菌等菌，对幽门螺杆菌引起的慢性浅表性胃炎及胆汁反流性胃炎都有很好的疗效。

综上所述，蒲公英是一种天然植物，应用于药物方面有利于提高其使用价值，蒲公英中间含有的黄铜对治疗胃炎有一定的作用，在炮制过程中他中间的总黄酮会有损失，其含量的变化影响着对胃炎的改善效果，试验表明蒲公英炮制前的原药对胃炎改善效果更好，并且这种效果可能是通过调节炎性反应因子IL-1β和IL-6来实现的。

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（2019-05-20收稿 責任编辑：苍宁）