己酮可可碱对人瘢痕疙瘩成纤维细胞IL-6、PDGF表达的影响
2020-06-24冯红霞
刘 妍,冯红霞*
(1.内蒙古医学院第三附属医院病理科,内蒙古 包头 014010;2.内蒙古医学院第三附属医院皮肤性病科,内蒙古 包头 014010)
瘢痕疙瘩又称疤痕疙瘩,主要是皮肤伤口愈合后,伤口生长过度的特殊瘢痕组织。是一种皮肤科的良性肿瘤。己酮可可碱(pentoxifyline.PTX)是一种抗纤维化很强的药物,其能抑制肿瘤坏死因子造成的皮肤成纤维细胞腺苷酸合成酶增加,从而抑制瘢痕皮肤的生成。我们采取用己酮可可碱在体外培养成纤维细胞(flbroblast,FB)。研究分析PIX对FB的IL-6、PDGF表达影响,讨论PIX浓度不同时对其的表达影响。
1 资料与方法
1.1 对象
以我院50名瘢痕疙瘩病患为研究对象。平均年龄17-45岁,分别于颈、前胸、上臂部位割取瘢痕疙瘩为标本。
1.2 细胞培养法
用聚丁二酸丁二醇酯(PBS)缓释液反复冲洗,再将标本放置于37℃且含有5%CO2培养箱中2-3小时,然后加入2ml的培养液,每隔2-3小时换一次培养液,总共培养24小时。观察标本细胞,细胞生长至75%时,将其储存,待后续试验利用。
1.3 实验处理
己酮可可碱的浓度有0.25、0.5、1和2mg/ml。利用酶联免疫吸附试验分别检测IL-6、PDGF的具体含量。瘢痕疙瘩以5×102/ml接种在24板内,每个标本细胞设置3个复孔。标本放置培养箱内24小时后加入己酮可可碱终浓度,然后收集清液,放在离心管中,保存在气温-22℃的环境里,酶联免疫吸附试验检测的24小时各孔上的清液中IL-6、PDGF的表达。
1.4 统计学分析
利用SPSS 22.0版本的系统进行数据分析处理,所有参数以(±s)表示,具有差异性(P<0.05)有统计学意义。
2 结 果
一定浓度下的己酮可可碱可以抑制白介素-6、血小板衍生因子的表达。PIX浓度0.25mg/ml,分别作用于48h、72h,其中0.5、1、2mg/ml作用于24h、48h、72h,白介素-6的表达存在差异(P<0.01),有统计意义。见表1。PIX浓度0.25、0.5、1、2分别作用于24h、48h、72h,血小板衍生因子的表达存在差异(P<0.01),见表2。
3 讨 论
生成血小板衍生因子的主要细胞是FB,血小板衍生因子能促进创面的愈合,有助于FB的形成。进行PCR反应的实时定量的技术证明了瘢痕疙瘩成纤维细胞中血小板衍生因子受体a蛋白和信使RNA表达水平都明显提高,其中的PDGF受体β蛋白和信使RNA表达提高不明显。本文研究结果证实,己酮可可碱能降低瘢痕疙瘩成纤维细胞IL-6和PDGF的表达,进一步防止了瘢痕疙瘩的形成,让临床上治疗瘢痕疙瘩有了新方案去为患者更好解决疾病。
表1 己酮可可碱对瘢痕疙瘩成纤维细胞IL-6的表达影响
表2 己酮可可碱对瘢痕疙瘩成纤维细胞PDGF表达的影响