HPLC法快速检测降血脂类中成药中非法添加化学药物成分

刘文阳

（抚顺市药品检验检测中心分析室，辽宁 抚顺 113006）

高血脂的检出率在逐年上升，高血脂引发的并发症给患者带来了很大的安全隐患。中成药在降血脂的药物应用也非常广泛，但很多不法商人为了牟取暴利，经常会在药物中添加非法的化学药物成分，且使用剂量严重不符合临床的规定范围，如很多非法化学药物的过量使用会引起肺、肾脏等器官的毒性，同时也会损伤神经系统等，严重者会导致死亡。近些年来，降血脂类中成药中非法添加化学药物的成分检测受到各方面的关注，也出现了很多新的检测方法。本研究采用HPLC法快速、灵敏的检测降血脂类的中成药中6种非法添加化学药物成分的方法，并可以进行定性定量分析，具有很好的应用前景。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

Agilent1200系列安捷伦高效液相色谱仪；CPA225D电子分析天平（赛多利斯公司）。洛伐他汀对照品；阿托伐他汀钙、烟酸、非诺贝特、辛伐他汀、普伐他汀钠，均购自中国食品药品鉴定研究院，纯度在95%以上。甲醇纯度为色谱纯；乙酸铵纯度为分析纯。降血脂类中成药为抽检样品。

1.2 色谱条件

样品经0.03 mol/L的甲醇溶剂提取，Inertsil ODS-3 色谱柱分离，柱温为30℃，0.02 mol/L乙酸铵-甲醇流动相下进行梯度洗脱，流速为1.0 mL/min，检测波长为230 nm，进样量10 uL。

1.3 标准溶液和供试品溶液制备

各种标准品分别称取10.0 mg，在甲醇中溶解为浓度1.0 mg/mL的标准溶液备用。

供试品研磨后精确称量300 mg，用甲醇稀释，超声提取20 min，冷却到室温，甲醇定容至50 ml，充分混匀，0.45 um的滤膜过滤。

2 结 果

2.1 分析条件的优化

在检测过程中，由于检测药物成分的空间构相及生化性质都有很大的差异，因此选择梯度洗脱的方法可以更好的分离各成分。在多次尝试之后，放弃了甲酸-甲醇溶液、水-甲醇溶液为流动相，而是选择峰型好、分离度高的0.02 mol/L乙酸铵-甲醇溶液为本实验的流动相，选择230 nm为检测波长，该波长的外部干扰小，灵敏度高。

2.2 方法专属性试验

混合对照品溶液在1.2的色谱条件下进行检测，具体色谱图见图1。普伐他汀钠、洛伐他汀、阿托伐他汀钙、烟酸、非诺贝特、辛伐他汀的保留时间分别为9.47、10.62、11.56、15.09、18.61、27.89 min，均可达到分离要求。

图1 混合对照品的HPLC图

2.3 各化学药物成分的线性范围、相关系数和回归方程

分别取配置好的6种化学药物成分对照品标准溶液，以对照品标准溶液浓度为X轴，对应的峰面积为Y轴，绘制标准曲线。结果显示化学药物成分的线性关系良好，相关系数都超过了0.999，具有较高的灵敏度。

2.4 各化学药物成分的回收率分析

在不含6种非法药物成分的空白样品中添加标准对照品溶液，测定6种非法药物成分的回收率均在96%以上，回收率较高，RSD在0.6%～0.9%之间。见表1。

表1 各化学药物成分的回收率和相对标准偏差（RSD）

2.5 样品的测定

选取12种市面上常见的降血脂类中成药，利用本研究中所用方法对其进行分析测定。结果显示，12种药品的色谱图均未出现与对照品保留时间一致的色谱峰，表明12种测定药品中均未检测到6种非法药物成分。

3 结 论

本研究建立了一种利用HPLC法快速、灵敏的检测降血脂类中成药中6种非法添加化学药物成分的方法。该方法具有较高的灵敏度和准确性，线性关系良好，回收率高，可作为降血脂类中成药检测的常用方法，具有很好的应用前景。