复方元芪利喘颗粒的制备工艺研究

王海龙，陈大忠*

（1.中国人民解放军联勤保障部队第962医院，黑龙江 哈尔滨 150080；2.黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040）

复方元芪利喘颗粒为名老中医临床经验方，由淫羊藿，黄芪，五味子，知母，麻黄五味中药组成。具有温阳益气，化痰平喘的功效。本研究根据相关文献报道[1-2]，确定水提取的最佳提取工艺。在此基础上进行颗粒剂的制备工艺考察[3]，旨在研究出质量稳定可控、服用方便中药复方颗粒剂。

1 仪器与试药

1.1 仪器

98-1-B型电子恒温电热套(天津市泰斯特仪器有限公司)；AL204型电子天平（梅特勒-托利多仪器）；DGG9240B电热恒温鼓风干燥箱（上海森信实验仪器

有限公司）；水分测定仪（上海仪电分析仪器有限公司）；SB-5200DT超声波清

洗机（宁波新艺超声波设备有限公司）；仪表恒温水浴锅（上海树立仪器仪表有限公司）；waters 2695型高效液相分析仪（美国waters公司）。

1.2 试药

处方中淫羊藿，麻黄，五味子等各味药材均购自哈药集团世一堂中药饮片有限责任公司。淫羊藿苷对照品（购自中国药品生物制品检定院，批号：110737-200415）。实验中所用的其他试剂均为分析纯。甲醇、乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2 实验方法与结果

2.1 复方元芪利喘颗粒水提工艺条件的优选

称取处方中各味药材，按照正交试验设计分别考察溶剂用量、提取时间和提取次数，以总固形物的出膏率和淫羊藿苷总提取含量为指标优化最佳提取工艺。

2.2 淫羊藿苷含量测定

2.2.1 对照品溶液的制备：精密取淫羊藿苷对照品1.13 mg，加甲醇稀释溶解并定容于10 ml容量瓶中，摇匀，备用（0.113 mg/ml）。

2.2.2 供试品溶液的制备取本品2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇20 ml，称重，超声处理1 h，再称重，补足重量，摇匀，滤过，取续滤液即得。

2.2.3 色谱条件与系统适应性试验：色谱柱用十八烷基键合硅胶为填充剂[4-5]；以乙腈-水（30：70）为流动相，检测波长为270 nm；流速1.0 ml/min；柱温30℃，理论板数按淫羊藿苷峰计算不低于1500。

2.2.4 标准曲线的绘制：分别精密吸取淫羊藿苷对照品溶液2、4、6、8、10、12 µl，按上述色谱条件测定，记录峰面积，以淫羊藿苷进样量为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，得线性回归方程为Y=203126X+1024610.6，r=0.9999，结果表明，淫羊藿苷进样量在0.904-2.034 µg呈良好线性关系。

2.2.5 精密度试验：精密吸取2.1.3项下供试品溶液10 µl，重复进样6次，测定，结果峰面积的RSD为1.8%，表明仪器精密度良好。

2.2.6 稳定性试验：同一批供试品溶液，分别于0，2，4，6，8，10小时按上述色谱条件进样测定6次。结果淫羊藿苷色谱峰面积RSD为2.3%。表明供试品溶液在10小时内稳定性较好。

2.2.7 重复性试验：取同一样品6份，分别制备供试品溶液，进样测定，结果提取物中淫羊藿苷的含量为2.24mg/g，RSD为2.8%。结果表明该方法重复性良好。

2.2.8 加样回收试验：精密称取本品共6份，分别精密加入淫羊藿苷对照品，按上述方法制成供试品溶液，进样测定峰面积积分值，计算回收率，结果平均回收率98.86%，RSD为2.4%。

2.3 正交实验结果

采用三因素三水平正交设计试验优选最佳提取工艺条件。根据单因素试验结果以提取时间（A）、提取次数（B）、水溶剂用量（C）为考察因素，利用淫羊藿苷提取率和出膏率权重综合评分为指标，选用L9(34)正交表进行试验，结果见表1。

表1 提取工艺优选正交试验表

表2 综合评分法方差分析

方差分析发现，因素A、B、C对提取效果的影响具有显著性差异，其中因素

A2＞A3＞A1；B2＞B1＞B3，但B2和B1相近，没有显著性差异，而C3＞C2＞C1但C3与C2相近，二者也没有显著性差异，结合实际生产中的成本和周期，确定为水提取的最佳工艺为A2B2C3，即加水10倍量，煎煮2次，每次2小时。

2.4 提取工艺的验证试验

按处方组成，称取以上各味药材平行3份，按优选出的最佳提取工艺条件加入10倍量水，提取2次，每次2小时，合并水煎煮液，浓缩至干，测定淫羊藿苷含量和总固形物重量[6]。计算淫羊藿苷提取率和总固形物出膏率。结果表明，3份提取物中淫羊藿苷提取率为76.82%，RSD为1.71%；总固形物出膏率为28.462%，RSD为1.38%，验证结果确定该工艺稳定、合理、可行。

3 讨 论

采用HPLC法测定提取物中淫羊藿苷的含量，色谱条件成熟，以淫羊藿苷作为代表性成分能够反映出水提取工艺的提取效率；在此基础上，引入提取物的出膏率并结合淫羊藿的含量作为综合评价指标，对二者赋予不同的权重系数[7-8]，计算综合评分分值，以综合评分数值对正交设计结果进行统计学处理后，优化筛选出复方元芪利喘颗粒水提工艺的最佳条件，通过验证结果客观、重现性好。