离子色谱-直接电导法在盐酸二甲双胍药物中二甲胺残留检测中的应用

2020-06-20朱凤姝邵长冰李祥群

化工设计通讯 2020年6期

杨芹，朱凤姝，邵长冰，李祥群

（江苏豪森药业集团有限公司，江苏连云港 222000）

盐酸二甲双胍是目前主要用于治疗单纯饮食疗法控制血糖效果不佳的2型糖尿病，在临床应用时具有较为满意的治疗效果[1]。二甲胺作为盐酸二甲双胍药物的主要原料之一[2]，其对于机体具有较强烈的刺激作用，如长期接触二甲胺极易导致眼角膜损伤、皮肤坏死等情况，因此在盐酸二甲双胍的生产过程中，应严格控制二甲胺的残留量，以免增加药物的不良反应[3]。虽然目前可用于二甲胺检测的方法较多，但其中气相色谱法对色谱柱有着较大的损伤，因此应用受限。而液相色谱法由于需先行住前衍生，且各项操作较为复杂，使其应用也受到一定限制。而离子色谱法以其较高的灵敏度、优异的重复性和操作便捷等优势，被广泛用于多个领域[4]。本文将通过对相关文献进行整理，总结离子色谱法在用于二甲胺残留检测时的应用效果。

1 材料与方法

1.1 仪器

主要设备及仪器见表1。

表1 设备仪器

1.2 试剂

研究所用试剂见表2。

表2 研究试剂

1.3 方法

1.3.1 配制对照品溶液

精准称取二甲胺盐酸盐16.56mg，将其装入10mL量瓶内，加入少许制备好的超纯水，使其溶解并定容。按照1∶1000的比例配制二甲胺盐酸盐溶液，并放置在4℃冰箱内冷藏备用。在实验需要时将其加入适量超纯水配制成研究所需浓度的标准工作液，作为对照品溶液使用。

1.3.2 配置供试品溶液

精准称取10mg的盐酸二甲双胍置入到10ml玻璃量瓶中，向其内加入适量的超纯水震荡使盐酸二甲双胍药物充分溶解，然后定容。再按照每1ml溶液中含有4μg二甲胺盐酸盐和1mg盐酸二甲双胍的比例配置溶液，用作系统适用性溶液备用。所有配置好的溶液均采用0.22μm水系滤膜过滤后进行色谱分析。

1.3.3 色谱条件

研究采用戴安lonpac CS12A（4mm*250mm）阳离子交换柱作为色谱柱，以甲磺酸溶液作为流动相，其浓度为20mmol/L-1，柱温设定为30℃，流速为1.0mL/min。采用抑制电导法见检测，抑制电流控制为60mA，电动池温度设定为35℃，进样时的体积为25μL。

2 结果

2.1 色谱条件优化

研究可见，二甲胺相对密度为0.680，易溶于水。本次研究采用不同的流速和不同浓度的淋洗液作为色谱条件，分别考察了二甲胺峰以及其他离子峰的分离度，经研究发现，以1.0mg/min作为流速，以20mmol/L作为甲磺酸淋洗液浓度时，物质的分离度最好，因此本次研究以该条件作为色谱条件。

2.2 系统适用性试验

将制备好的系统适用性溶液、对照品溶液以及空白水，分别按照设计好的色谱方法注入到离子色谱仪内，观察色谱图，结果可见，二甲胺峰型较好，约在5.5min时出峰。

2.3 定量限以及检测限

精准称取适量二甲胺盐酸盐置入量瓶内，加入适量超纯水后溶解定容，对其检测限和定量限进行分析，定量限和检测限的分别为0.032 8μg/ml和0.120μg/ml。

2.4 线性关系

分别配制0.10μg/ml、0.20μg/ml、0.50μg/ml、1.0μg/ml以及5.0μg/ml和10.0μg/ml浓度的二甲胺对照品溶液，将不同浓度的对照品溶液注入到离子色谱仪内。根据峰值面积计算出浓度曲线，线性回归方程为Y=0.825X-0.036 1，r=0.9994。结果显示，当二甲胺盐酸盐的浓度在0.1～10.0μg/mL时，线性关系良好。

2.5 回收率试验

在不含有二甲胺的盐酸二甲双胍空白品内加入不同限定浓度的二甲双胍对照品溶液开展回收率测定实验，结果表明其具有着良好的回收率，平均回收率在97.7%-99.5%，见表1。

表1 回收率试验

3 讨论

离子色谱-直接导电法是一种常用的检测手段，其通过液相色谱法来检测被检测物中的阴阳离子，进而达到快速、准确检测的目的，且操作较为简便，使其应用范围较广。本次研究为了能够有效降低盐酸二甲双胍药品中二甲胺的含量，进而对离子色谱-直接导电法在二甲胺残留检测时的应用情况进行分析，并对该方案的线性、定量限、回收率以及重复性等问题进行深入研究，通过研究结果可以看出，该方案在用于二甲胺残留检测时，具有较好分离度和灵敏度，且回收率、重复性以及定量等条件均可以满足临床检测需求，故而是一种高效的盐酸二甲双胍药物中二甲胺残留检测方案，适宜用于临床分析和实验研究，也为盐酸二甲双胍合成反应提供了有效的参考研究。