抗核抗体谱联合抗核抗体在自身免疫性疾病诊断中的应用效果

赵海平 李俊琦 赵文华

[摘要] 目的 观察分析抗核抗体谱联合抗核抗体在自身免疫性疾病诊断中的应用效果。方法 方便选取该院在2016年1月—2019年3月收治的110例自身免疫性疾病患者作为实验组，再选取同期该院搜集的43名健康体检者一般资料作为对照组，两组研究对象均进行核抗体谱（采用免疫印迹法）联合抗核抗体（采用间接荧光免疫法）检测。 结果 系统性红斑狼疮抗核抗体阳性检出率为93.6%（44/47）、混合性结缔组织病抗核抗体阳性检出率为60.0%（6/10）、干燥综合征者抗核抗体阳性检出率为62.5%（5/8）、类风湿性关节炎抗核抗体阳性检出率为21.2%（7/33）、特发性血小板减少性紫癜抗核抗体阳性检出率为37.5%（3/8）、系统性硬化病抗核抗体阳性检出率为33.3%（1/3），系统性红斑狼疮阳性检出率显著高于其他疾病阳性检出率，对照组抗核抗体检出率为0.0%（0/43），数据比较差异有统计学意义（χ2=1.556，P<0.05）。结论 抗核抗体谱联合抗核抗体在自身免疫性疾病诊断中的应用效果显著。

[关键词] 抗核抗体谱;抗核抗体;自身免疫性疾病;诊断;应用效果

[Abstract] Objective To observe and analyze the application effect of anti-nuclear antibody spectrum combined with anti-nuclear antibody in the diagnosis of autoimmune diseases. Methods 110 patients with autoimmune diseases admitted to the hospital from January 2016 to March 2019 were convenient selected as the experimental group， and 43 healthy persons collected in the hospital during the same period were selected as the control group. The nuclear antibody spectrum （using immunoblotting） and anti-nuclear antibody （using indirect fluorescence immunoassay） were tested in both groups. Results The positive rate of anti-nuclear antibody in systemic lupus erythematosus was 93.6% （44/47）， mixed connective tissue disease was 60.0% （6/10）， sjogren's syndrome was 62.5%（5/8）， rheumatoid arthritis was 21.2%（7/33）， idiopathic thrombocytopenic purpura was 37.5%（3/8） and 33.3%（1/3） of the patients with systemic sclerosis were positive for anti-nuclear antibodies. The positive rate of systemic lupus erythematosus was significantly higher than that of other diseases. The positive rate of anti-nuclear antibodies in the control group was 0.0% （0/43）， and the difference was statistically significant（χ2=1.556，P<0.05）. The application effect is remarkable. Conclusion The application of antinuclear antibody spectrum combined with antinuclear antibody in the diagnosis of autoimmune diseases is significant.

[Key words] Anti-nuclear antibody spectrum; Anti-nuclear antibodies; Autoimmune diseases; Diagnosis; Application effect

自身免疫性疾病的重要诊断标志是：自身抗体[1]。随着现代分子生物学的广泛发展和进步，自身免疫性疾病相关特异性抗体日益被发现，继而使得自身免疫性疾病的正确诊断率日渐提高。相关资料显示，间接荧光法是检测抗核抗体的首选方法，目前被认为是抗核抗体检测的金标准[2-3]。从理论上来看，如果抗核抗体为阴性，那么抗核抗体谱也为阴性[4]。事实上，临床工作发现部分检测标本出现间接荧光法检测抗核抗体为阴性结果，而免疫印迹法检测抗核抗体谱为阳性结果[5]。将抗核抗体谱联合抗核抗体诊断自身免疫性疾病中具有更高价值，因此该文将对比分析自身免疫性疾病患者与健康体检者的阳性检出率。该文方便选取该院在2016年1月—2019年3月收治的110例自身免疫性疾病患者，现报道如下。

1  资料与方法

1.1  一般资料

方便选取该院收治的110例自身免疫性疾病患者（47例系统性红斑狼疮者、33例类风湿性关节炎者、8例特发性血小板减少性紫癜者、10例混合性结缔组织病者、8例干燥综合征者、3例系统性硬化病者、1例肌炎患者）作为实验组，再选取同期该院搜集的43名健康体检者一般资料作为对照组。实验组中有女72名、男38名;平均年龄为（40.5±7.8）岁。对照组中有女30名、男13名;平均年龄为（41.8±7.2）岁。两组基本資料对比差异无统计学意义（P>0.05）。

1.2  方法

取两组研究对象空腹血，加入肝素抗凝剂，在室温下防置0.5 h，离心后，制备血清。核抗体谱采用免疫印迹法（试剂盒购买于深圳亚辉龙公司）加以检测，检测过程中严格按照试剂盒说明书加以进行。抗核抗体采用间接荧光免疫法（试剂盒购买于杭州医学实验诊断有限公司）加以检测，检测过程中严格按照试剂盒说明书加以进行（测量4个滴度：1∶100/1∶320/1∶1000/1∶3200，抗体滴度≥1∶100为阳性）。

1.3  观察指标

分析抗核抗体、抗核抗体谱（主要包括抗dsDNA、抗核小体、抗组蛋白、抗SmD1、抗U1-snRNP、抗核糖体P蛋白、抗PCNA、抗SS-A/Ro60kD、抗SS-A/Ro52kD、抗SS-B、抗CenpB、抗SCL-70、抗 JO-1、抗PM -Scl、抗AMA-M2、Mi-2和Ku）检测结果。

1.4  统计方法

采用SPSS 21.0统计学软件对数据进行分析，计数资料采用[n（%）]表示，进行χ2检验，P<0.05 为差异有统计学意义。

2  结果

2.1  兩组研究对象的抗核抗体阳性检出率比较

系统性红斑狼疮抗核抗体阳性检出率为93.6%（44/47）、混合性结缔组织病抗核抗体阳性检出率为60.0%（6/10）、干燥综合征者抗核抗体阳性检出率为62.5%（5/8）、类风湿性关节炎抗核抗体阳性检出率为21.2%（7/33）、特发性血小板减少性紫癜抗核抗体阳性检出率为37.5%（3/8）、系统性硬化病抗核抗体阳性检出率为33.3%（1/3），系统性红斑狼疮阳性检出率显著高于其他疾病阳性检出率，对照组抗核抗体检出率为0.0%（0/43），数据比较差异有统计学意义（χ2=1.556，P<0.05），见表1。

2.2  两组研究对象的抗核抗体谱阳性检出率比较

47例系统性红斑狼疮者抗nRNP、抗sm、抗SS-A、抗SS-B、抗SCL-70 、抗PM -Scl、抗 JO-1、抗CENPB、抗PCNA、抗dsDNA、抗核小体、抗组蛋白、抗糖体P蛋白、抗U1-snRNP、抗SS-A/Ro60kD、抗SS-A/Ro52kD以及抗AMA-M2、Mi-2和Ku检出率分别为17.0%（8/47）、34.0%（16/47）、29.8%（14/47）、12.8%（6/47）、0.0%（0/47）、0.0%（0/47）、0.0%（0/47）、2.1%（1/47）、2.1%（1/47）、63.8%（30/47）、70.2%（33/47）、48.9%（23/47）、12.8%（6/47）、0.0%（0/47）、0.0%（0/47）、0.0%（0/47）、0.0%（0/47），33例类风湿性关节炎者抗核抗体谱分别为0.0%（0/33）、0.0%（0/33）、12.1%（4/33）、0.0%（0/33）、0.0%（0/33）、0.0%（0/33）、0.0%（0/33）、0.0%（0/33）、0.0%（0/33）、15.2%（5/33）、0.0%（0/33）、0.0%（0/33）、0.0%（0/33）、0.0%（0/33）、0.0%（0/33）、0.0%（0/33）、0.0%（0/33），8例特发性血小板减少性紫癜者抗核抗体谱分别为75.0%（6/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、37.5%（31/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8），10例混合性结缔组织病者抗核抗体谱分别为80.0%（8/10）、40.0%（4/10）、0.0%（0/10）、0.0%（0/10）、30.0%（3/10）、40.0%（4/10）、0.0%（0/10）、0.0%（0/10）、0.0%（0/10）、0.0%（0/10）、20.0%（2/10）、0.0%（0/10）、0.0%（0/10）、10.0%（1/10）、0.0%（0/10）、0.0%（0/10）、10.0%（1/10），8例干燥综合征者抗核抗体谱分别为87.5%（7/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、50.0%（4/8）、37.5%（3/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、50.0%（4/8）、0.0%（0/8）、0.0%（0/8）、50.0%（4/8）、0.0%（0/8），3例系统性硬化病者抗核抗体谱分别为33.3%（1/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、66.7%（2/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3）、0.0%（0/3），对照组抗核抗体谱均为0.0%（0/43），数据比较差异有统计学意义（χ2=12.366、15.365、1.226、9.366、19.115、 26.366，P<0.05），见表2。

3  讨论

抗核抗体在自身免疫性疾病诊断中具有较高阳性检出率，抗核抗体阳性结果意味着患者处于自身免疫性疾病高危群体[6-8]。联合抗核抗体与抗核抗体谱诊断自身免疫性疾病患者能够显著提高诊断敏感度，与此同时避免漏检[9-10]。该文研究结果显示系统性红斑狼疮阳性检出率显著高于其他疾病阳性检出率，对照组抗核抗体检出率为0.0%（0/43），数据比较差异有统计学意义（P<0.05）。该文研究结果显示系统性红斑狼疮抗核抗体阳性检出率为93.6%（44/47）、混合性结缔组织病抗核抗体阳性检出率为60.0%（6/10）、干燥综合征者抗核抗体阳性检出率为62.5%（5/8）、类风湿性关节炎抗核抗体阳性检出率为21.2%（7/33）、特发性血小板减少性紫癜抗核抗体阳性检出率为37.5%（3/8）、系统性硬化病抗核抗体阳性检出率为33.3%（1/3），系统性红斑狼疮阳性检出率显著高于其他疾病阳性检出率，对照组抗核抗体检出率为0.0%（0/43），数据比较差异有统计学意义（χ2=1.556，P<0.05）。据Rana等[11]学者在相关文献研究显示，使用抗核抗体谱联合抗核抗体检测方法检测137例自身免疫性疾病患者中，系统性红斑狼疮阳性检出率为94.5%（52/55）、干燥综合征为58.3%（7/12）、混合性结缔组织病为60.8%（14/23）、类风湿关节炎为22.5%（9/40）、特发性血小板减少性紫癜抗核抗体阳性检出率为37.5%（3/8）、系统性硬化病抗核抗体阳性检出率为33.3%（1/3）。上述结果与该文研究结果保持高度一致。有学者认为，抗核抗体谱中的不同自身抗体在不同种类的自身免疫性疾病患者中表现出不同检出率。该文研究结果显示47例系统性红斑狼疮者抗nRNP、抗sm、抗SS-A、抗SS-B、抗SCL-70 、抗PM -Scl、抗 JO-1、抗CENPB、抗PCNA、抗dsDNA、抗核小体、抗组蛋白、抗糖体P蛋白、抗U1-snRNP、抗SS-A/Ro60kD、抗SS-A/Ro52kD以及抗AMA-M2、Mi-2和Ku检出率与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。有关研究表明，抗核抗体与自身免疫性疾病有着密切关系，敏感性比较强，因此可提高临床诊断价值。也有学者认为，抗核抗体的特异性差，因此在临床诊断中往往用于初筛试验，研究结果显示，在系统性红斑狼疮患者中抗核抗体表现出较高阳性检出率，继而对系统性红斑狼疮患者的诊断具有一定参考价值。

综上所述，抗核抗体谱联合抗核抗体在自身免疫性疾病诊断中的应用效果显著。

[参考文献]

[1]  卢伟，刘斌剑，梁艳等.抗核抗体阴性病例的抗核抗体谱的检测分析与疾病风险的评估[J].中国实验诊断学，2016，20（4）：597-602.

[2]  姜清明.ANA、抗ds-DNA 抗体及抗 ENA 抗体在自身免疫性疾病诊断中的应用[J].国际检验医学杂志，2016，37（14）：2011-2013.

[3]  黄燕华，王偉佳，马京京，等.不同检测技术检测抗核抗体对自身免疫性疾病诊断价值研究[J].国际检验医学杂志，2018， 39（4）：461-464.

[4]  陆媛，陆艳.抗核抗体联合抗核抗体谱诊断自身免疫性疾病的临床准确率[J].临床医学研究与实践，2019，4（16）：91-92，95.

[5]  陈向华，王建吉，耿学丽，等.抗核糖体P0蛋白抗体、抗dsDNA抗体等自身抗体在自身免疫性疾病诊断中的意义[J].河北医药，2017，39（17）：2617-2619，2622.

[6]  廖桂周.抗核抗体和抗核抗体谱联合检测在自身免疫性疾病诊断和筛查中的应用价值[J].中国医学创新，2016，13（24）：63-66.

[7]  张乃丹.ANA 抗 ds-DNA 抗体及抗 ENA 抗体联合检测在自身免疫性疾病诊断中的应用价值[J].基层医学论坛，2017， 21（1）：8-9.

[8]  International consensus on antinuclear antibody patterns： definition of the AC-29 pattern associated with antibodies to DNA topoisomerase I[J].Clinical Chemistry and Laboratory Medicine （CCLM），2018，56（10）：1783-1788.

[9]  May Y Choi，Ann E Clarke，Yvan St Pierre， et al.Antinuclear Antibody–Negative Systemic Lupus Erythematosus in an International Inception Cohort[J].Arthritis Care & Research，2019，71（7）：893-902.

[10]  Chan Wang，XiaodongZheng，Peng Jiang， et al.Genome-wide Association Studies of Specific Antinuclear Autoant ibody Subphenotypes in Primary Biliary Cholangitis[J].Hepatology，2019，70（1）：294-307.

[11]  Rana Kadiru，Spandana Hegde，Manjunath Shenoy.An observ ational cross-sectional study of varied clinical manifes tations of connective tissue disorders and their association with antinuclear antibodies in a tertiary care center[J].Indian Dermatology Online Journal，2019，10（4）：413-417.

（收稿日期：2019-11-21）