IL35、HMGB1及CD5L对儿童哮喘病情及预后评估

高伟霞 秦小菀 张靖 朱永杰

[摘要] 目的 探討白细胞介素35（IL35）、高迁移率蛋白1（HMGB1）和CD5抗原样蛋白（CD5L）对儿童哮喘病情及预后的评估价值。方法 选取我院2016年5月—2018年4月收治的90例哮喘病儿作为观察对象，依据病情严重程度分为轻度组（n=29）、中度组（n=30）和重度组（n=31），另取30例同期健康体检者作为对照组，均行血清IL35、HMGB1和CD5L水平检测。比较观察组（轻度组、中度组、重度组）与对照组各血清指标水平，以及其与哮喘病情和预后相关性。结果 观察组IL35、CD5L水平低于对照组，血清HMGB1水平高于对照组（t=3.524～23.700，P<0.05）。各组间血清IL35、HMGB1和CD5L水平比较，差异有显著性（F=8.416～200.766，P<0.05）;且重度组、中度组及轻度组血清IL35、CD5L水平低于对照组，血清HMGB1水平高于对照组（P<0.05）;重度组及中度组血清IL35、CD5L水平低于轻度组，血清HMGB1水平高于轻度组（P<0.05）;重度组血清IL35、CD5L水平低于中度组，血清HMGB1水平高于中度组（P<0.05）。血清IL35、CD5L水平与哮喘病情呈负相关（r=-0.719、-0.706，P<0.05）;血清HMGB1水平与哮喘病情呈正相关（r=0.699，P<0.05）。经Logistic回归分析，血清HMGB1、CD5L及IL35均为病儿预后影响因素（OR=0.546～1.867，95%CI=0.371～2.841，P<0.05）。结论 相比于健康小儿，哮喘病儿血清HMGB1水平较高、血清IL35与CD5L水平较低，经对症治疗后其水平有相应改变，可用来评估病儿病情及预后。

[关键词] 哮喘;儿童;白细胞介素-35;HMGB1蛋白质;CD5抗原

[中图分类号] R562.25  [文献标志码] A  [文章编号] 2096-5532（2020）02-0233-04

doi：10.11712/jms.2096-5532.2020.56.039 [开放科学（资源服务）标识码（OSID）]

[网络出版] http：//kns.cnki.net/kcms/detail/37.1517.R.20200320.1506.002.html;2020-03-23 11：59：13

[ABSTRACT] Objective To investigate the value of interleukin-35 （IL-35）， high-mobility group box 1 （HMGB1）， and CD5 antigen-like protein （CD5L） in evaluating the condition and prognosis of children with asthma.  Methods A total of 90 children with asthma who were admitted to our hospital from May 2016 to April 2018 were enrolled as subjects， and according to di-sease severity， they were divided into mild group with 29 children， moderate group with 30 children， and severe group with 31 children. A total of 30 children who underwent physical examination were enrolled as control group. Serum levels of IL-35， HMGB1， and CD5L were measured for both groups. Serum indices were compared between the observation group （the mild group， the mo-derate group， and the severe group） and the control group， and their correlation with the condition and prognosis of asthma was analyzed.  Results Compared with the control group， the observation group had significantly lower levels of IL-35 and CD5L and a significantly higher level of HMGB1 （t=3.524-23.700，P<0.05）. There were significant differences in the serum levels of IL-35， HMGB1， and CD5L between groups （F=8.416-200.766，P<0.05）， and compared with the control group， the severe， mode-rate， and mild groups had significantly lower levels of IL-35 and CD5L and a significantly higher level of HMGB1 （P<0.05）; compared with the mild group， the severe and moderate groups had significantly lower levels of IL-35 and CD5L and a significantly higher level of HMGB1 （P<0.05）; the severe group had significantly lower levels of IL-35 and CD5L and a significantly higher le-vel of HMGB1 than the moderate group （P<0.05）. The serum levels of IL-35 and CD5L were negatively correlated with the condition of asthma （r=-0.719，-0.706;P<0.05）， and the serum level of HMGB1 was positively correlated with the condition of asthma （r=0.699，P<0.05）. The logistic regression analysis showed that serum HMGB1， CD5L， and IL-35 were influencing factors for the prognosis of children with asthma （OR=0.546-1.867，95%CI：0.371-2.841，P<0.05）.  Conclusion Compared with healthy children， children with asthma have a higher serum level of HMGB1 and lower serum levels of IL35 and CD5L， which tend to change after symptomatic treatment and can thus be used to assess the condition and prognosis of children with asthma.

[KEY WORDS] asthma; child; interleukin-35; HMGB1 protein; CD5 antigen

哮喘为小儿常见多发慢性呼吸系统疾患，相关报道显示全球范围内哮喘病人高达3億人之多，预测至2025年将升至4亿人，且每年约有25万人因哮喘而死亡，约有1 500万人因哮喘致伤残[1-5]。生物学标志物CD5抗原样蛋白（CD5L）是一种反映机体所处生物学进程的、可供客观评价及测定的血清标志物，有学者指出其水平与哮喘等呼吸道疾病病人的病情严重程度呈负相关，为评估病情进展的有效指标[6-7]。此外，有学者指出哮喘发作时白细胞介素35（IL35）、高迁移率蛋白1（HMGB1）等细胞因子调节失衡，亦在一定程度上促进了病情进展[8-11]。基于此本研究选取我院90例哮喘病儿及30例健康小儿，首次探讨了血清HMGB1、CD5L及IL35水平变化对儿童哮喘病情及预后的评估价值。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取我院2016年5月—2018年4月收治的90例哮喘病儿作为观察对象（观察组），依据朱碧君等[12]报道的病情严重程度分为3个亚组。轻度组29例，男17例，女12例;年龄2～12岁，平均年龄（6.50±2.10）岁;病程6～24个月，平均病程为（17.20±5.40）个月。中度组30例，男18例，女12例;年龄3～12岁，平均年龄为（6.90±2.05）岁;病程5～24个月，平均病程（18.02±5.60）个月。重度组31例，男19例，女12例;年龄2～12岁，平均年龄为（7.01±2.40）岁;病程6～25个月，平均病程为（17.12±5.10）个月。另取30例同期健康体检者作为对照组，男17例，女13例;年龄3～12岁，平均年龄（6.49±2.17）岁。各组基线资料比较，差异无统计学意义（P>0.05）。本研究经医院伦理委员会审查批准。

纳入标准：①观察组均符合《儿童支气管哮喘诊断与防治指南》中哮喘诊断标准[13];②所有受检者年龄范围均为2～12岁;③病儿或家属知晓本研究并自愿签署知情同意书。排除标准：①近期出现呼吸道感染者;②合并其他呼吸系统疾患;③心、肾、肝等重要脏器衰竭者;④先天畸形病儿;⑤病例之间存在血缘关系者;⑥近期使用免疫调节剂或糖皮质激素治疗者;⑦复发哮喘病儿;⑧伴有严重精神疾患或其他因素所致难以配合完成本研究者。

1.2 研究方法

1.2.1 检测指标及方法 所有受检者均采集4 mL空腹静脉血，以3 000 r/min离心15 min（离心半径为5.5 cm），分离血清置于-80 ℃冰箱中保存待检。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法分别测定各组血清IL35、HMGB1及CD5L水平，检测试剂盒均购自日本东京Shino-Test公司，所有操作严格按照试剂盒说明书进行。

1.2.2 治疗方法 对病儿病情进行评估后，采用吸入性糖皮质激素、白三烯受体拮抗剂或二者联合治疗。治疗3个月评估病儿病情控制情况，若未控制进行强化升级治疗（高剂量吸入性糖皮质激素、白三烯受体拮抗剂），若部分控制则进行升级治疗（中等剂量吸入性糖皮质激素、白三烯受体拮抗剂），若控制良好则降级治疗直至最低维持剂量。治疗3个月后对其进行预后评估。

1.3 统计学分析

采用SPSS 19.0统计软件对数据进行分析。计量资料以±s表示，观察组与对照组比较使用t检验;多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD-t检验;以Spearman相关分析法进行相关性分析;采用Logistic回归分析预后的影响因素。以P<0.05为差异有显著性。

2 结  果

2.1 观察组与对照组血清指标比较

观察组IL35、CD5L水平均明显低于对照组，血清HMGB1水平则明显高于对照组，差异均有显著性（t=3.524～23.700，P<0.05）。见表1。

2.2 不同病情组血清指标的比较

各组间血清IL35、HMGB1、CD5L水平比较，差异有显著性（F=8.416～200.766，P<0.001）。其中重度组、中度组及轻度组血清IL35、CD5L水平均较对照组低，而血清HMGB1水平较对照组高（P<0.05）;重度组及中度组病儿血清IL35、CD5L水平均较轻度组低，血清HMGB1水平较轻度组高（t=10.876～41.529，P<0.05）;重度组血清IL35、CD5L水平均较中度组低，而血清HMGB1水平较中度组高（t=7.867～40.291，P<0.05）。见表2。

2.3 血清指标与病情严重程度相关性

经Spearman相关分析表明，血清IL35、CD5L水平与哮喘病情呈负相关（r=-0.719、-0.706，P<0.05）;血清HMGB1水平与哮喘病情呈正相关（r=0.699，P<0.05）。

2.4 不同预后病儿血清指标水平比较

参照《哮喘病药物治疗学》的疗效标准[14]，本文90例哮喘病儿治疗2周后，治疗结果分为预后优良（n=80）及预后一般（n=10）。与预后一般病儿比较，预后优良病儿血清CD5L及IL35水平较高，血清HMGB1水平较低（t=2.004～3.752，P<0.05）。经Logistic回归分析显示，血清HMGB1、CD5L及IL35的水平均为哮喘病儿预后的影响因素（OR=0.546～1.867，95%CI=0.371～2.841，P<0.05）。见表3、4。

3 讨  论

哮喘反复发作不仅影响小儿正常的生长发育，且影响其日常生活及学习，加重病儿家庭及社会经济负担。有报道显示，哮喘占全球疾病负担的1%，需对其病情做出准确评估，并进行针对性治疗[14-18]。

生物靶标是具有某种特征、能够反映机体生物学状态，可用于辅助疾病鉴别诊断、进行病情监测及疗效评估的一类指标[2，19]。CD5L是适用于哮喘病变的生物靶标之一，可在脂肪细胞内吞作用下与胞浆脂肪酸合成酶结合，调控脂质合成，能够维持组织稳态，抵御细胞外病原体入侵，参与哮喘的发生、发展过程[20-21]。本研究结果显示，观察组及其不同病情亚组（重度组、中度组、轻度组）病儿血清CD5L水平低于对照组，重度组及中度组水平低于轻度组;血清IL35、CD5L水平与病情呈负相关;血清HMGB1水平与病情呈正相关，且重度组低于中度组、预后优良病儿高于预后一般病儿。说明血清CD5L水平与哮喘病儿病情严重程度及预后效果关系紧密，可以作为临床评估病儿病情及预后的有效指标。梁然等[22]研究显示，哮喘病儿血清IL35水平明显较健康小儿低，指出其参与了哮喘的发生发展。IL35是由调节性T细胞分泌、由EBI3及P35两个亚基构成的新型抗炎细胞因子，对细胞免疫稳态具有调控作用，当机体发生炎症反应时，其免疫功能受损，致使调节性T细胞数量减少，进而降低血清IL35水平[23-24]。本研究结果也显示，重度组、中度组及轻度组血清IL35水平均低于对照组，重度组及中度组水平低于轻度组，且重度组低于中度组，可见哮喘病儿血清IL35水平随病情加重不断降低，与病情进展关系密切。而经治疗后预后优良病儿血清IL35水平高于预后一般病儿，这可能与经药物或机械通气等相关治疗后，病儿机体炎症反应减轻，机体免疫功能增强，调节性T细胞增加有关。这与杨振朋等[25]研究结果相符。近年来也有临床研究指出，HMGB1在肺癌、慢性阻塞性肺疾病、肺炎等多种呼吸道疾病中过表达，其可能参与了呼吸系统疾病的病理生理过程[26-28]。戴贞照等[29]研究指出，HMGB1在支气管哮喘小儿淋巴细胞及外周血血浆中呈高表达状态，且随病情加重逐渐升高。本文结果表明，哮喘病儿血清中HMGB1水平较健康小儿高，且随病情加重不断升高。经Logistic回归分析，血清HMGB1、CD5L及IL35均为病儿预后影响因素，推测其不仅具有诱导小儿哮喘发作的作用，且参与了哮喘的病情进展过程。

综上所述，哮喘病儿血清IL35、CD5L水平较健康小儿低，随病情加重不断降低，与病情呈负相关，对症治疗后会有所升高;血清HMGB1水平较健康小儿高，且随病情进展不断升高，与病情呈正相关，经治疗其水平会有所下调。上述指标可作为儿童哮喘病情监测及预后评估的有效指标，可以在临床上推广应用。

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（本文编辑 于国艺）