2018—2019 年山东省小反刍兽疫专项流行病学调查

陈 峰，党安坤，盖小君，赵 亭，李秀喆，兰邹然

（1.山东省动物疫病预防与控制中心，山东济南 250022；2.烟台市动物疫病预防与控制中心，山东烟台 264003；3.曹县畜牧服务中心，山东曹县 274400；4.海阳市动物疫病预防与控制中心，山东海阳 265100）

小反刍兽疫（peste des petits ruminants，PPR） 是由小反刍兽疫病毒（peste des petits ruminants virus，PPRV）感染小反刍兽引起的一种严重的急性、烈性、接触性传染病，以高热、口炎、胃炎、腹泻和肺炎等为主要特征。PPR 主要通过直接、间接接触传染和呼吸道飞沫传播，潜伏期为4～5 d。世界动物卫生组织（OIE）将其列为须通报动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。山羊感染PPRV 后的症状较绵羊明显[1]。本病一般可分为急性型、亚急性型和慢性型3 种。其中：慢性型症状轻微，主要为体温升高，类似感冒；亚急性型症状为体温升高到40～41 ℃，高热不退，口腔炎症明显，有的出现严重腹泻等；急性型临床比较少见，发病迅速，往往发病后2 d 内死亡[2]。

2007 年PPR 由境外首次传入我国西藏阿里地区，随后疫情迅速得到控制。2013 年底，PPR 再次传入我国，并波及多个省（区、市）。为有效控制和根除PPR 疫情，山东省根据《全国小反刍兽疫消灭计划（2016—2020 年）》及《山东省小反刍兽疫消灭计划（2016—2020 年）实施方案》的具体要求，对全省（青岛市除外）羊只采取全覆盖强制免疫政策。为准确掌握2018—2019 年山东省境内的PPR 免疫效果以及病原感染情况，分别于2018 年11 月和2019 年11 月，在全省开展了PPR专项流行病学调查，以期为山东省的PPR 防控提供适用、科学、有效的防控措施。

1 材料与方法

1.1 相关定义

免疫合格样品是指经PPR 阻断ELISA 检测为抗体合格的血清样品，反之为免疫不合格样品；免疫合格群体是指免疫样品合格率≥70%的群体，反之为不合格群体；病原学阳性样品是指经PPR荧光RT-PCR 检测为阳性的样品，反之为病原学阴性样品。

1.2 研究群和抽样单元

1.2.1 研究群 全省所有羊存栏量≥50 只的规模饲养场以及有羊散养户的自然村，其中1 个规模饲养场或1 个自然村内所有散养户存栏羊作为1 个群体。

1.2.2 抽样单元 群体层选择每个规模场和有羊散养户的自然村，群体内选择所有免疫PPR 疫苗的羊。

1.3 抗体样品抽样量计算

根据全省养殖情况，采用两阶段抽样方法。

第1 阶段，先计算全省专项流行病学调查所需的总抽样场数，用估计流行率方法，按 95%的置信水平、90%的预期免疫合格率（根据往年的测量结果确定预期免疫合格率）、5%的可接受误差[3]、无穷大场群，利用公式（1）计算出的抽样场群数为139 个，根据各市规模化羊饲养场和自然村的群体实际情况，按照比例分配到各地市。

其中p为预期合格率，z为置信水平，e为可接受误差。

第2 阶段，计算所需的抽样羊只数量。仍采用估计流行率方法，按 95%的置信水平、90%的预期免疫合格率（根据以往的测量结果确定预期免疫合格率）、10%的可接受误差、群体数量无穷大，计算得出场群内需抽取不少于35 只羊的全血。场内随机选羊，按系统随机方法抽样，如全群数量小于35 只，则全部采样。

1.4 病原样品抽样量计算

根据全省规模场和自然村的养殖情况，采用两阶段抽样方法。

第1 阶段，计算全省所需的总抽样场数，采用证明无疫的方法，按照估计场点流行率1%，置信水平95%，依据公式（2）计算出调查的场点数不少于299 个，根据各地市规模化羊饲养场和自然村的群体实际情况，按比例分配。

其中n为抽样个数，CL 为置信水平，D为群内个体数与预定流行率的乘积，即群中的阳性动物数，N为群内个体数，Se 为检测方法的敏感性。

第2 阶段，计算所需的抽样羊只数量。仍用证明无疫的方法，按95%的置信水平、3%的预期流行率[5]、群体数量无穷大计算，则场群内需抽取不少于99 只羊的鼻拭子。场内随机选羊，按系统随机方法抽样，如全群数量小于99 只，则全部采集。

1.5 调查方式与内容

采用现场询问、查阅档案记录、填写调查表和采样检测等方式，主要调查养殖场（户）的基本信息、养殖情况、防疫措施、无害化处理和PPR发病情况等。

采集样品按照NY/T 541—2016 标准中的相关要求，妥善保存和运输。PPRV 抗体检测，采用ELISA 方法；病原学检测，采用荧光RT-PCR 方法。

2 结果与分析

2.1 采样及现场调查

2018 年共采样检测畜场1 481 个，包括规模羊场763 个、散养户716 个、市场2 个，共采集免疫血清样品30 688 份、病原学样品8 703 份；2019年共采样监测畜场2 284 个，包括规模羊场1 380个、散养户904 个、市场59 个，共采集血清样品31 769 份、病原学样品13 867 份。2018—2019 年各地市采样检测场群数量见表1。

问卷统计结果显示：疫病方面，养羊场以细菌性疾病为主，没有发现PPR 疫情；调运检疫方面，饲养场（户）对外调羊只基本能做到隔离观察，确保健康后合群饲养，隔离期一般为3～5 d；卫生方面，饲养场（户）基本能做到定期消毒，规模场措施更为得当，一般能做到每日消毒，散养户消毒时间间隔稍长。

表1 2018—2019 年采样检测场群数量分布 单位：个

2.2 实验室检测

2.2.1 抗体检测 2018 年共检测羊免疫血清样品30 688 份，抗体合格28 826 份，平均抗体合格率为93.09%；2019 年共检测羊免疫血清样品31 769 份，抗体合格29 666 份，平均抗体合格率为92.90%（表2）。整体来看，山东省PPR 免疫效果较好，各市免疫抗体合格率基本都在90%以上，远超过了国家和省级的最低要求，可以确保免疫动物处于有效保护状态。2018 年与2019 年免疫抗体合格率卡方检验显示无显著差异（χ²=0.003，P=0.956 32，P＞0.05），表明全省PPR 免疫措施得当，抗体水平平稳。但个别地市PPR 抗体水平有待提高，比如济宁市2018 和2019 年的样品合格率仅为83.15%和79.19%，需要进一步加强免疫。

2.2.2 病原学检测 2018—2019 年所有病原学样品检测全部为阴性。

表2 2018—2019 年各地市PPR 抗体检测结果

3 讨论

本次调查发现，大多数养殖场（户）比较重视PPR 防控，对PPR 免疫持乐观态度，从流行病学调查的总体情况看，全省PPR 免疫状况良好，未检出病原，也未发现临床病例，说明全省PPR防控形势较好，疫情发生风险较低。但本次调查中的场内抽样采用证明无疫方式计算样本量，设定的预期流行率为3%，相对较高，导致样本量稍低，即使未检测到病原学阳性，也无法确定全省不存在病原感染。

虽然山东省的PPR 防控形势较好，但随着活羊及其产品的全国流通，PPR的传入风险依然存在，因此PPR 防控工作不可松懈，需要增强防控意识，尤其是散养户，要严防从疫区引入羊只，从外地引入的羊只要严格隔离、检疫。今后还需持续开展PPR 专项流行病学调查，以便为PPR 免疫政策的制定和将来PPR 强制免疫退出提供更加有力的数据支撑。

4 结论

调查认为，山东省PPR 强制免疫效果较好，免疫抗体水平远超过国家和省级的最低要求，养殖场（户）防控意识较强，防控形势比较理想，PPR发生风险较低。但仍需继续加强免疫和调入羊群的隔离检疫，持续开展流行病学调查，从而为全省尽快消灭PPR 奠定基础。