红花黄色素注射液对老年急性脑梗死中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白、白细胞介素-18和单核细胞趋化蛋白-1的影响

裴良艳，易继龙，刘 芸，周静静，袁天琪，卢志刚*

0 引言

急性脑梗死(Acute cerebral infarction，ACI)是指动脉粥样硬化或血管内皮损伤等因素造成大脑血管局部狭窄，甚至闭塞、颅内血液供应不足、缺血缺氧等导致局部脑组织缺血、水肿坏死的临床脑血管疾病，具有致残率高、复发率高和死亡率高的特点，日益受到人们的关注[1]。目前研究表明，脑梗死发生后，颅内炎症反应分泌大量炎性介质是导致梗死区域以及缺血半暗带区域神经细胞损伤的重要病理机制之一[2]。其中，中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、白细胞介素-18(IL-18)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)血清中大量表达与老年ACI神经功能缺损之间存在密切的联系[3-5]。本研究使用红花黄色素注射液治疗老年ACI患者，并检测血清中NGAL、IL-18和MCP-1水平，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 110例老年ACI患者均为2017年7月至2019年5月在我院神经内科住院患者，男56例，女54例；年龄62～86岁，平均(65.1±7.6)岁。ACI均符合2018年中国急性缺血性脑卒中诊治指南的诊断标准；排除标准：①合并脑出血、脑肿瘤、心肌梗死、慢性感染、血液病等；②合并心肺功能不全、肝肾功能受损、风湿免疫疾病等;③精神行为异常、意识模糊;④患者和(或)患者家属不同意。按入院先后顺序随机分为对照组以及观察组。两组患者一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。见表1。

1.2 治疗方法 两组患者按神经内科常规治疗(时间窗内溶栓或者血管内介入治疗、抗血小板聚集、稳定斑块、控制血糖血压等)。其中对照组患者溶栓和血管内介入比例分别是10/55与2/55，治疗组是9/55和3/55。两组抗血小板药物的用量均为拜阿司匹林肠溶片100 mg/d及氯吡格雷片75 mg/d。观察组加用红花黄色素注射液(乐坦，浙江永宁药业股份有限公司，规格50 mg/瓶，国药准字Z20050146)100 ml/d溶入生理盐水250 ml中静脉滴注，14 d为1个疗程。

1.3 观察指标 ①炎症因子的检测：于治疗前(T0)、治疗后1 d(T1)、治疗后3 d(T3)、治疗后7 d(T7)及治疗后14 d(T14)空腹静卧抽取静脉血5 ml，分离出血清后检测NGAL、IL-18和MCP-1的表达，采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测，试剂盒均由深圳晶美生物工程有限公司提供。②CSS评分[6]：两组均于治疗前后按照中国脑卒中患者临床神经功能缺损程度评分标准(1995)进行评分(最高45分，最低0分)。

1.4 疗效标准[7]治愈：临床症状体征基本消失，神经功能缺损恢复到正常，日常活动能力恢复到正常；显效：临床症状体征明显改善，神经功能缺损显著好转，日常活动能力逐步恢复；进步：临床症状体征、日常活动能力和神经功能缺损等较治疗前均有改善；无效：病情无恢复或逐步恶化。好转为治愈+显效+进步。

2 结果

2.1 两组临床疗效比较 发病前，两组CSS评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。T3、T7、T14时，两组CSS评分降低(P<0.05或P<0.01)。T7、T14时观察组CSS评分低于对照组(P<0.05)。见表2。

2.2 两组患者炎症因子变化比较 T0时，两组血清中炎症因子NGAL、IL-18、MCP-1比较差异无统计学意义(P>0.05)。T14时，对照组上述指标降低(P<0.05)；T7、T14时，观察组上述指标降低(P<0.05或P<0.01)。T7、T14时，观察组NGAL低于对照组(P<0.05或P<0.01)；T14时，观察组IL-18、MCP-1低于对照组(P<0.05)。见表3。

表1 两组患者一般资料比较

表2 两组患者各时点CSS评分比较

注：与T0时比较，*P<0.05，**P<0.01；与对照组比较，#P<0.05

表3 两组患者MCP-1、IL-1β、NGAL表达水平比较

注：与T0时比较，*P<0.05，**P<0.01；与对照组比较，#P<0.05

2.3 两组临床疗效比较 观察组的临床治疗总有效率(92.73%)高于对照组(78.18%)，差异有统计学意义(P<0.05)。见表4。

表4 两组临床疗效比较[例(%)]

注：与对照组比较*χ2=4.68，P=0.03

2.4 不良反应 患者对红花黄色素注射液具有良好的依从性，治疗1个疗程后检测两组患者血常规、凝血功能等的异常变化，肝肾功能(丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、肌酐)未见明显损害。

3 讨论

炎症反应在急性缺血性脑损伤的发病机制发挥了重要作用，但其潜在机制尚不明确[8]。随着目前对脑梗死病理生理机制研究的深入，研究者已经认识到急性脑缺血早期导致的炎性反应是中心梗死区域和其周围缺血半暗带神经元损伤的重要机制之一。ACI发生后，炎症免疫反应随之被激活。参与炎症免疫反应的细胞主要是巨噬细胞、中性粒细胞、小胶质细胞和淋巴细胞等，其所释放的炎症介质主要包括白介素类(IL-1、IL-6、IL-10、IL-18)、IFN-γ和TNF-α等[9]。脑组织损伤后激活的免疫介质释放出大量的炎症信号引发一系列复杂的病理反应事件，是体内神经元细胞死亡的重要因素[10]。脑缺血后打破了体内炎症反应平衡,炎症因子的大量释放加重了缺血性脑损伤[11]。随后发生炎症级联免疫反应，继而导致脑组织损伤不断加重的恶性循环。因此，探讨如何减少ACI后炎症因子的发生，改善神经功能缺损，对ACI的早期治疗和预后康复评价均具有重要临床意义。

NGAL是新型的分泌型蛋白、lipocalin家族成员之一，又称为噬铁蛋白或脂质运载蛋白2，与炎症免疫反应、细胞凋亡、组织重构和细胞分化等密切相关[12]。其可诱导白细胞内颗粒如白细胞介素、趋化因子等一系列细胞因子的分泌有关。研究发现，血清中NGAL水平与冠状动脉狭窄、糖尿病、冠心病等心脑血管疾病关系密切[13]。IL-18多由内皮细胞和巨噬细胞等产生，是重要的促炎因子，在脑动脉粥样硬化的发生发展以及斑块的脱落、破裂等病理过程中发挥重要作用，对它的检测有助于判断ACI患者病情严重程度及预后情况[14-15]。MCP-1主要由白细胞和造血微环境中的基质细胞分泌，是一种前炎性因子，可在缺氧、损伤、感染、免疫反应等情况下趋化单核细胞，大量分泌释放各种炎性因子，导致大量炎性因子在脑组织的受损局部聚集和不断活化，进一步加重脑损伤[16]。因此，对于ACI患者，降低NGAL、IL-18、MCP-1水平将得到较好的临床效果。药理研究发现，红花黄色素注射液不同剂量均可改善急性脑缺血大鼠模型行为学评分，降低大鼠血清TNF-α、IL-6水平，通过抗炎减轻脑水肿、改善受损脑组织而发挥脑保护的作用[17]。研究表明，红花黄色素能起到抗炎、神经元保护作用[18-19]，其可显著抑制MCAO模型大鼠中 TLR4 的表达，有效上调大鼠海马区和皮质区神经元脑源性神经营养因子的表达[20]；另外，红花黄色素可在一定程度上通过抑制Toll样受体9通路以及p38 MAPK 通路起到抑制NF-κB激活的作用[21-22]。

本研究发现，应用红花黄色素注射液治疗1个疗程后，观察组CSS评分较对照组明显下降，说明红花黄色素可显著改善老年ACI患者神经功能缺损症状，有效改善患者的预后，且红花黄色素组的总治疗有效率高于常规治疗组。此外，应用红花黄色素注射液治疗后老年ACI患者的炎性因子NGAL、IL-18、MCP-1、CRP水平明显低于对照组，说明红花黄色素可能通过降低NGAL、IL-18和MCP-1等致炎因子水平，起到防治老年ACI的作用。本研究与动物实验研究结果类似。综上所述，红花黄色素注射液治疗老年ACI的作用机制可能是通过降低NGAL、IL-18和MCP-1等致炎因子水平，减轻炎性反应，改善神经功能缺损，促进患者神经功能的恢复而起到脑保护作用，有较高的临床价值。