乙型肝炎病毒PreS1抗原及e抗原表达与血清乙型肝炎病毒DNA表达载量的关系

戴 平

湖南省常德市澧县人民医院检验科，湖南常德 415500

目前，我国乙型肝炎病毒(HBV)携带者超过1.3亿人，其中孕产妇HBV感染尤其值得临床关注[1]。有资料显示，与非孕期女性相比，孕产妇的HBV感染率明显升高[2]。母婴传播是我国HBV感染的主要传播途径，而引起HBV感染率较高的原因则与缺乏有效的母婴诊疗手段有关。临床通常将HBV e抗原(HBeAg)阳性检出作为HBV感染和复制的金标准。随着医疗技术水平的提高，有研究指出，HBV前S1抗原(PreS1-Ag)可与HBV-DNA、HBV血清标志物联合诊断HBV感染情况[3]。基于此，本研究探讨血清PreS1-Ag及HBeAg与HBV-DNA载量的关系，以期为临床控制HBV感染提供指导，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2017年3月至2019年3月于本院诊治的乙型肝炎(以下简称乙肝)产妇132例，均经临床诊断确诊为乙肝，年龄22～35岁，平均(26.28±3.57)岁。本研究经医院医学伦理委员会批准。诊断标准：参考2000年全国病毒性肝炎学术会修订的《病毒性肝炎防治方案》诊断标准。纳入标准：(1)符合病毒性肝炎诊断标准；(2)年龄18～44岁；(3)既往均未接受抗病毒治疗；(4)家属签署知情同意书。排除标准：(1)不符合病毒性肝炎诊断标准；(2)肝功能异常、肝硬化产妇；(3)合并心血管疾病史；(4)有甲状腺疾病史；(5)有精神疾病史。

1.2方法 采用ELISA检测HBeAg、PreS1-Ag；采用实时荧光定量PCR技术定量检测HBV-DNA，HBV-DNA载量<1.00×103copy/mL时判断为阴性，反之判断为阳性。MKs酶标仪由广州达安生物试剂有限公司生产提供，采用ELISA检测乙肝血清学标志物，试剂由上海科华实业有限公司提供，HBV-DNA采用ABI-7500荧光定量PCR仪定量检测，由中山医科大学达安基因诊断中心提供技术支持及试剂盒。根据HBV-DNA载量分组，比较各组HBeAg、PreS1-Ag检出率，计算HBeAg、PreS1-Ag检测的灵敏度及特异度。

2 结 果

2.1HBV-DNA载量分布 132例患者中HBV-DNA载量<103copy/mL有73例，占55.30%；HBV-DNA载量在103～105copy/mL有21例，占15.91%；HBV-DNA载量>105～108copy/mL有33例，占比25.00%；HBV-DNA载量>108copy/mL有5例，占比3.79%。

2.2PreS1-Ag和HBeAg与血清HBV-DNA载量关系 依据不同HBV-DNA载量将患者分成<103copy/mL、103～105copy/mL、>105～108copy/mL、>108copy/mL 4个等级，各等级PreS1-Ag阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)；HBV-DNA载量在>105～108copy/mL时的HBeAg阳性率、PreS1-Ag阳性率均高于HBV-DNA载量<103copy/mL、103～105copy/mL时的阳性率，差异均有统计学意义(P<0.05)。HBV-DNA载量>108copy/mL的PreS1-Ag和HBeAg的检出率均为100.00%。见表1。

表1 PreS1-Ag和HBeAg与血清HBV-DNA载量关系[n(%)]

2.3PreS1-Ag和HBeAg的诊断特异度及灵敏度 HBV-DNA载量<103copy/mL为阴性，共73例；≥103copy/mL为阳性，共59例，见表2。PreS1-Ag和HBeAg的特异度分别为69.39%、72.34%；灵敏度分别为53.01%、86.84%；阴性预测值分别为46.58%、93.15%；阳性预测值为74.48%、55.93%。

表2 PreS1-Ag和HBeAg阳性检出率[n(%)]

3 讨 论

乙肝是由HBV引起的传染病，可通过血液、体液等传播[4]。相关文献显示，我国约10%以上的人口感染HBV，阳性率高达9.09%，主要通过接种疫苗预防母婴传播[5]。HBeAg阳性是能够判断HBV复制与传染强弱的指标[6-7]。有研究结果显示，患者体内的HBeAg阴性不能判断是否存在传染性，而HBeAg阴性患者体内仍可存在HBV复制，并可引发肝硬化[8-9]。

血液与母婴传播是HBV的主要传播途径，含有HBV的母乳喂养新生儿时，极易把HBV传染给新生儿[10]。若产妇血清HBV-DNA载量和乳汁HBV-DNA载量均比较低，可进行母乳喂养，不会引起母乳喂养新生儿出现HBV传播的现象[11]。虽然HBV在消化道内不能传播，但当新生儿口腔内出现溃疡或消化道的黏膜破损时，HBV则通过破损部位渗入新生儿体内从而导致感染[12]。 因此，在母乳喂养新生儿期间，有出血或新生儿口腔黏膜破损时，应及时停止母乳再次喂养，以免HBV在母婴之间传播[13]。

HBV衣壳蛋白包括S蛋白、PreS1蛋白等，其中，PreS1蛋白具有调节病毒在肝细胞膜受体附着和反映病毒感染复制的作用[14-15]。且PreS1-Ag可参与免疫识别病毒，在HBV感染时刺激相应抗体产生[16]。PreS1-Ag作为HBV的包膜蛋白，多在HBV颗粒上表达，与HBeAg相比，更能反映肝细胞被病毒感染的情况，并可区分由病毒变异或者其他原因而造成的HBeAg假阴性[17]。有学者认为PreS1蛋白中去除26～30氨基酸，则会导致HBV无法感染肝细胞[16]。本研究结果显示，在132例乙型肝炎患者血清的检测结果中，HBV-DNA阳性73例，阴性59例，以此为金标准，计算出PreS1-Ag和HBeAg的特异度分别为69.39%、72.34%；灵敏度分别为53.01%、86.84%；阴性预测值分别为46.58%、93.15%；阳性预测值为74.48%、55.93%。而国内研究曾指出，PreS1-Ag与HBeAg诊断HBV感染的符合率为85.13%[14]。这与本研究结果存在差异的原因可能与检测方法及纳入的研究标本不同有关。PreS1-Ag在HBV处于低水平复制时期的检出率不高；随着HBV-DNA载量的升高，PreS1-Ag、HBeAg的检出率大幅提高。国内研究曾指出，PreS1-Ag、PreS2-Ag阳性率可随着HBV-DNA拷贝数增加而升高，两者与HBV-DNA拷贝数呈正相关[18]。HBV-DNA载量>108copy/mL的5例中，PreS1-Ag和HBeAg的检出率均为100.00%，与<103copy/mL、103～105copy/mL相比，病毒载量在>105～108copy/mL时HBeAg检出率显著提高。由上述可见，随着HBV-DNA载量的升高，PreS1-Ag、HBeAg的检出率均大幅提高。

综上所述，随着HBV-DNA载量的升高，PreS1-Ag和HBeAg的检出率均有大幅提高，以HBV-DNA载量≥103copy/mL为阳性标准，发现PreS1-Ag的诊断灵敏度较高，而HBeAg的诊断特异度较高，提示临床可通过联合检测PreS1-Ag、HBeAg等判断HBV感染情况。