28种杀菌剂对大麦条纹病菌活性的室内测定

潘 登，马甜甜，许江岩，王 宁，张军民，束华平

（1.句容市希望农业科技咨询服务中心，江苏句容212400；2.句容市农业农村局，江苏句容212400）

由禾内脐蠕孢 [Drechslera graminea(Rabenh.)Shoem.]引起的大麦条纹病是大麦生产上重要的种传病害[1]，在我国春麦区、冬麦区和青藏高原裸大麦区普遍发生，一般病株率为30%～40%，产量损失超过30%[2]。大麦条纹病是以种子内寄藏病原菌作为重要的初次侵染来源[3-4]。因此，用物理方法、农业方法和化学方法处理大麦种子是防治该病菌有效的方法，且目前最常用、最有效的方法是对种子进行化学处理。许多研究表明，戊唑醇、三唑酮、二硫氰基甲烷、丙环唑、烯唑醇、苯醚甲环唑等拌种或包衣种子对大麦条纹病均有较好的防治效果[5-8]。近年来，新杀菌剂不断出现，且这些药剂对大麦条纹病菌的活性也未见报道。为了筛选对大麦条纹病高效的药剂，笔者在室内测定了28种杀菌剂对大麦条纹病菌的活性，以便为选择高效、安全的大麦种子处理剂奠定基础。

1 材料与方法

1.1 供试菌株

供试大麦条纹病菌菌株采自江苏省句容市白兔镇行香村大麦病株，将病株在保温培养箱中培养，挑取病株组织上的单孢子，在马铃薯蔗糖培养基上纯化培养，获得B-12菌株，将该菌株用作供试菌株。

1.2 供试培养基

马铃薯蔗糖培养基（PSA培养基）：马铃薯（去皮）200g，蔗糖 20g，琼脂 14g，水 1000mL，pH 值 7.0。

AEA 培养基：酵母浸膏 5 g，Na2SO36 g，KH2PO41.5 g，KCl 0.5 g，MgSO40.25 g，丙三醇 20 mL，琼脂粉15 g，水 1 000 mL，pH 值 7.0。

Chapeland培养基（CL培养基）：葡萄糖10 g，琼脂 13 g，KH2PO42 g，MgSO4·7H2O 5 g，（NH4)2SO41 g，水1 000 mL。

1.3 供试药剂和浓度设定

供试杀菌剂及其测定时所用培养基、浓度范围见表1。

1.4 药剂配制

在表1所列的供试药剂中，34%多抗霉素TC用灭菌水稀释原药，98%多菌灵用0.1 mol/L HCl溶液稀释药剂至10 000 mg/L的母液，其他药剂均用丙酮和 N，N-二甲基甲酰胺混合液溶解原药至10 000 mg/L的母液，在母液中加入1%吐温80作湿润剂。用灭菌水稀释各母液至表1所设定浓度范围的7个浓度的系列药液。

1.5 测定方法

所用药剂对病菌活性测定均采用含药平皿法[9]。在7 cm的培养皿中加入1 mL稀释好的药液，迅速加入50℃左右所选择的培养基9 mL，充分摇匀制成含系列浓度的平板（表1）；将预培养4 d的B-12菌落边缘打出4 mm菌片，菌丝面向下移到含药平板上。各浓度重复3次。在25℃培养箱中黑暗条件培养5 d后，以十字交叉法测量菌落直径，计算抑菌率。

表1 供试杀菌剂及其试验设计

1.6 数据处理

用各药剂浓度处理和对照处理的平均菌落直径计算抑菌率。

用抑菌率机率值和药剂浓度对数，计算药剂的毒力回归方程与相关系数r，并求出EC50、EC90值。所有计算均用DPS7.05数据分析软件进行。

2 结果与分析

采用平皿法测定了28种杀菌剂原药对大麦条纹病菌菌丝生长的抑制活性，计算得各药剂对大麦条纹病菌的EC50和EC90值，列于表2。

表2 大麦条纹病菌对杀菌剂的敏感性测定结果

测定的28种杀菌剂的EC50值，以95%环丙唑醇 TC活性最低，EC50值为 140.040 2 mg/L；以99.4%咯菌腈TC的活性最高，EC50值为0.001 2mg/L。以EC90值比较，仍以95%环丙唑醇TC活性最低，低到无法计算，99.4%咯菌腈TC的活性最高，EC90值为 0.448 8 mg/L。

将28种杀菌剂按其作用机理进行分类比较，在测定的抑制麦角甾醇生物合成的11种杀菌剂中，以95%环丙唑醇TC的活性最低，其EC50值高达140.040 2 mg/L，95%三唑酮TC的活性也偏低，其EC50值为6.725 1 mg/L；以95.3%戊唑醇TC、93%氟硅唑TC和97.37%咪鲜胺TC这3个杀菌剂的活性较高，其EC50值分别为0.001 9、0.005 7、0.001 6 mg/L，EC90值分别为 0.534 4、0.904 0、0.921 1 mg/L；这类杀菌剂的其他品种的EC50值居中。

苯胺嘧啶类杀菌剂主要是抑制琥珀酸脱氢酶活性而达到抑菌活性，在测定的3种这类杀菌剂中，其抑制大麦条纹病菌活性（EC50值）排序是84.39%啶酰菌胺TC＞96.8%嘧霉胺TC＞99%嘧菌环胺TC。

苯氧丙烯酸酯类杀菌剂以抑制病菌呼吸系统的电子传递而抑制病菌生长，以95%吡唑醚菌酯TC对大麦条纹病菌的抑菌活性最高（EC50=0.025 4mg/L），其次是95%氯啶菌酯TC（EC50=0.055 5 mg/L）、97.4%嘧菌酯 TC（EC50=0.1246mg/L）和 94.8%醚菌酯 TC（EC50=0.576 0 mg/L）。

苯并咪唑类杀菌剂98%多菌灵TC和97.6%甲基硫菌灵TC抑制大麦条纹病菌生长的EC50值分别2.312 9、48.120 9 mg/L，前者抑菌活性高于后者。

3种保护性杀菌剂99.4%咯菌腈TC、96%代森锰锌TC和97%福美双TC，其对大麦条纹病菌菌丝生长的 EC50值分别为 0.001 2、0.008 0、0.304 8 mg/L，EC90值分别为 0.448 8、3.260 1、3.412 1 mg/L；可见99.4%咯菌腈TC的抑菌活性最高。

二甲酰亚胺类杀菌剂97.19%异菌脲TC和98%腐霉利TC对大麦条纹病菌的抑菌活性相近，EC50值分别为 0.204 7、0.323 0 mg/L，EC90值分别为8.106 2、8.950 2 mg/L。

二硫氰基甲烷、多抗霉素和溴菌腈这3个杀菌剂的作用机理不同，对大麦条纹病菌的抑菌活性也是98%二硫氰基甲烷TC＞34%多抗霉素TC＞95%溴菌腈TC。

3 讨论与结论

关于大麦条纹病菌室内抑制药剂的筛选研究报道比较少。杨瑞测定了9种杀菌剂的制剂对大麦条纹病菌菌丝生长的抑制活性，发现不同药剂之间差异明显，10%浸种灵乳油（二硫氰基甲烷）具有最好的抑菌效果（EC50=1.397 0 μg/mL），其次是 40%金力士（Colex）乳油、10%世高（Score）水分散粒剂（苯醚甲环唑）、12.5%禾果利（diniconazole）乳油和3%敌萎丹（Dividend）悬浮种衣剂，EC50值分别为5.125 0、2.050 0、2.563 0、8.607 2 μg/mL，多菌灵、代森锰锌的抑菌活性较低[1]。本研究中相同药剂对大麦条纹病菌防治和抑菌活性显著高于上述报道结果，如98%二硫氰基甲烷TC的抑制菌丝生长的EC50值为0.039 0 mg/L，这个差异可能与所用药剂分别是原药和制剂存在差异有关。

杀菌剂室内抑菌测定结果可能与田间的防病效果并不一致。董泽成等比较了几种杀菌剂对大麦条纹病的防治效果，发现福美双的防治效果优于咯菌腈和敌萎丹[7]。本研究结果显示，97%福美双TC抑制大麦条纹病菌菌丝生长的EC50值为0.304 8 mg/L，而99.4%咯菌腈TC的EC50值为0.001 2 mg/L。闫佳会等比较了3%苯醚甲环唑SF、2.5%咯菌腈SF、4.8%苯醚·咯菌腈SF、400 g/L萎锈灵·咯菌腈SF对大麦条纹病的防治效果，发现3%苯醚甲环唑SF以2 mL/kg进行拌种的防治效果最好[8]。本研究发现99.4%咯菌腈TC的抑菌活性高于94.8%苯醚甲环唑TC。这种差异可能是因为不同药剂在田间的用药量不同及室内测定所存在差异。

本研究测定的28种杀菌剂中，对大麦条纹病菌菌丝生长抑菌活性较高的有95.3%戊唑醇TC、97.37%咪鲜胺TC、95%吡唑醚菌酯TC、98%二硫氰基甲烷TC、93%氟硅唑TC、99.4%咯菌腈TC、96.8%嘧霉胺TC、98%丙硫唑TC和84.39%啶酰菌胺TC。其中，戊唑醇、二硫氰基甲烷、咯菌腈已有所报道用于大麦条纹病的防治[1-6]，但对其他杀菌剂在大田中对大麦条纹病的防治效果，还有待于进一步研究确认。