盐炙对杜仲丸抗疲劳作用的影响研究

侯 惺 贾方真 李 娟 张 莉 赵 露 杜桂秋

（枣庄市立医院，山东 枣庄 277100）

随着经济发展，社会生活水平的提高，人们对健康的认识越来越深，同时亚健康威胁了我们的生活质量。世界卫生组织的调查显示，其余75%以上的人都处在亚健康状态。我们有必要对抗疲劳作用的中药饮片进行文献研究，抗疲劳作用研究多是单味药研究，如现代药理研究杜仲[1-2]有耐缺氧、抗氧化、提高免疫力、降血脂及增加体质量的作用，《本经》描述杜仲“主腰脊痛，补中益精气，坚筋骨”，续断[3]为川续断科植物川续断Dipsacus asper Wall.ex Henry的干燥根。此外还有对枸杞[4-5]、红景天[6-7]、黄精[8]、人参[9]等抗疲劳作用研究。复方药研究很少，杜仲和续断二者配伍，在骨伤科常做药对使用，也独立成方，等量配伍组成杜仲丸，始载于《校注妇人良方》卷十二。亦有抗疲劳、抗衰老、增强免疫作用，中医用其补肝肾、强筋骨、续折伤。盐炙后可引药入肾，增强补肝肾、强筋骨作用。故以抗疲劳作用做为药理指标，选择有促成骨细胞增强作用的60%乙醇提取物，通过测定老龄小鼠给药前后体质量的变化和血清中的乳酸、尿素氮及肝糖原的含量，观察杜仲丸的抗疲劳作用的影响。

1 实验材料

1.1 试剂：乳酸、尿素氮、肝糖原试剂盒购自南京建成生物制成生物制品有限公司，乳酸批号20070423、20070520，尿素氮批号20070423，肝糖元批号20070423、20090520，其他试剂为分析纯。

1.2 动物：昆明种小鼠，雌雄各半，体质量23～27 g，由山东中医药大学实验动物中心提供，批号SCXK（鲁）20050015。

1.3 仪器：数显恒温水浴锅，常州国华电器有限公司；FA10004电子天平，上海恒平科学仪器有限公司生产；LD24-0.8型离心机，北京医用离心机厂生产；754紫外分光光度计，上海市精密仪器公司生产。

1.4 杜仲丸醇提取物：取杜仲饮片剪成3 mm以下碎片，续断粉碎，过2号筛，精密称取，各22.73 g，粉末等量混合，分置1000 mL烧瓶中，加20倍60%的乙醇浸泡1 h，回流提取2 h，提取液减压浓缩，60 ℃干燥，得干粉。1 g干粉相当于3.94 g生药。

1.5 实验方法：取70只小鼠，随机分为7组：分别为对照组，生杜仲丸低、中、高剂量组。分别按0.023，0.045，0.091 mg/kg剂量，每天灌胃，称重，连续14 d，对照组以等体积蒸馏水灌胃。末次灌胃30 min后，各组小鼠分别在温度（30±1）℃深40 cm池中游泳120 min后[10-11]，取出小鼠，休息60 min，摘眼球取血，依照乳酸试剂盒及尿素氮试剂盒测定血清乳酸[12-13]及血清尿素氮含量[14-16]。摘眼球后立即处死老鼠，解剖取其肝脏，依照肝糖原试剂盒测定肝糖原含量。

2 结果

2.1 供试品对小鼠14日内体质量增加的影响：灌胃小鼠14 d内，生杜仲丸低、中、高剂量组和空白组小鼠体质量都增加，且生杜仲丸低、中、高剂量组均比空白组小鼠增长速度快，提示杜仲、续断配对，可增加对小鼠体质量增加的影响，雄性小鼠普遍比雌性小鼠体质量增长快。见表1。

表1 杜仲丸醇提物对小鼠每日体质量增量的影响（）

表1 杜仲丸醇提物对小鼠每日体质量增量的影响（）

2.2 供试品对小鼠运动后血清尿素氮、血清乳酸、肝糖原的影响：低、中、高剂量组小鼠运动后血清尿素氮、血清乳酸均低于空白组，经统计学处理，低剂量组与空白对照组及中剂量与高剂量组，组间比较均有显著性差异（P＜0.05）。低、中、高剂量组小鼠运动后肝糖原均高于空白组，经统计学处理，空白组与低剂量组、低剂量组与中剂量组及中剂量与高剂量组比较均有显著性差异（P＜0.01）。见表2。

表2 杜仲丸醇提物对小鼠体内血清尿素氮、血清乳酸、肝糖原的影响（）

表2 杜仲丸醇提物对小鼠体内血清尿素氮、血清乳酸、肝糖原的影响（）

3 讨 论

现在由于工作，学习压力日益加重，生活环境日益恶化，近年来，由于疲劳诱发突发性疾病，导致疾病病情加重，甚至导致死亡。根据《保健食品检验与评价技术规范》（2003 年版）“缓解体力疲劳功能检验方法”项下结果判定的标准：负重结果阳性，且血乳酸、血清尿素、肝糖原三项指标中任两项指标阳性，即可判定该受试样品具有缓解体力疲劳功能的作用。糖元是机体运动时能量的重要来源，有研究表明[17-18]中等强度和长时间的运动会使骨骼肌糖原和血糖水平减少，使大脑皮层和骨骼肌工作能力下降，是造成运动疲劳的直接原因。它的多少直接影响运动能力，提高糖元储备或减少运动时糖元的消耗对提高速度增强耐力有重要意义[19-20]。糖元在体内有肝糖原和肌糖原两种储备形式，是糖代谢的重要能源物质。可长时间维持运动时的血糖水平，延缓疲劳在运动着的肌肉中，当能量平衡遭到破坏时，蛋白质和含氮化合物的分解代谢加强并伴随着尿素的形成增加。机体运动负荷的适应性越低，这种分解代谢作用越强，形成的尿素也就越多[21]。本实验结果可知杜仲丸能有效降低血清尿素氮、血清乳酸的含量，增加肝糖原的含量，而且盐炙后有利于降低血清尿素氮、血清乳酸的含量，增加肝糖原的含量，增强机体对运动负荷的适应能力。证明杜仲丸有抗疲劳作用，盐炙后有增强作用的趋势。

《本草纲目》上记载杜仲“肝主筋，肾主骨，肾充则骨强，肝充则筋健，届伸利用，皆属于筋”。《别录》上记载续断“主崩中漏血，金疮血内漏，止痛，生肌肉，踠伤，恶血，腰痛，关节缓急”。在现代药理研究，杜仲与续断有增强免疫作用，通过对杜仲丸盐炙前后杜仲丸的抗疲劳的研究，为“咸入肾，肾入骨理论相关性研究”提供了部分科学依据。此外，随着人们对日常保健越来越重视。具有抗疲劳作用的中药饮片有助于提高人体免疫作用，将随着制剂科学技术的发展，对药食同源产品的开发会越来越多[22-23]，此研究也为杜仲、续断后续的抗疲劳作用产品的开发提供理论依据。