来宾地区雌性克氏原螯虾卵巢发育分析

赵文彬 ，钟一治 ，王大鹏 ，陆专灵 ，郑惠芳

（1.广西大学，广西 南宁 530004；2.广西壮族自治区水产科学研究院，广西 南宁 530021；3.南宁研乐上生物技术有限公司，广西 南宁 530004）

克氏原螯虾俗称小龙虾、淡水龙虾，属于甲壳纲，十足目，蝲蛄科，螯虾亚科和原螯虾属[1]。原产于美国，后传入日本，在第2次世界大战期间由日本传入中国，开始在南京一带繁殖[2]。广西的克氏原螯虾养殖开始于2016年[3]，最先在南宁市和柳州市等地由企业引进试养，来宾市部分地区于2017年也开始了对克氏原螯虾的养殖。由于来宾地区气候[4]、地理环境与湖北等克氏原螯虾主产地有较大的差距，为了解克氏原螯虾在来宾地区的繁殖发育情况，创造更适宜当地的养殖模式，对来宾地区克氏原螯虾的卵巢发育时期进行了研究。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验用克氏原螯虾的养殖地点为来宾市五山镇养殖基地，于2019年4月下旬引体质量为20 g左右的种虾放入新建虾田中进行养殖，按照稻虾综合种养模式[5]养殖，于2019年5—8月每月进行1次样品采集，用地笼捕捞，从3个独立的虾田中分别采集10个样品，每次共采集样品30个，共计4次。

1.2 试验方法

对采集的克氏原螯虾进行体指标测量，包括体长、头胸甲长、钳长、臂长及体质量。

克氏原螯虾卵巢发育时期可以从性腺的外观颜色进行判断[6]，在采集过程中挑选出典型时期的卵巢，装到盛有4%多聚甲醛的2 mL EP管中，放入4℃冰箱保存，用于性腺切片制作以便判断卵巢发育时期。采用包埋法进行切片制作，将保存的卵巢切成约长×宽×高为 0.5 cm×0.5 cm×0.5 cm[2]大小，经洗涤、脱水、透明、浸蜡包埋和切片，HE染色后，用中性树胶封片，组织切片在Nikon显微镜下观察分析并拍照。

2 结果

2.1 卵巢外观形态分类特征

克氏原螯虾的卵巢发育时期可以直接从性腺的外观形态和颜色进行判断，通过解剖可以快速确定其发育时期，根据李胜等[7]对克氏原螯虾卵巢发育时期的研究，该次试验按照卵巢的外观形态将其分为 I期、II期、III期和 IV 期（表 1）（图 1～图 4）。

2.2 卵巢时期分布情况

根据5—8月每月下旬对克氏原螯虾体指标的测量及卵巢发育时期的鉴定，对测量和鉴定结果进行汇总（表2）。

表1 克氏原螯虾的卵巢发育分期

表2 克氏原螯虾5—8月外观测量数据及卵巢发育情况

从表2可以看出，随着养殖时间的推移，克氏原螯虾的各项外观指标具有明显的变化，卵巢的发育从5月下旬开始，直到6月下旬其卵巢发育缓慢，卵巢发育时期以I期为主，有部分发育到II期；7月开始卵巢快速发育，发育呈现不同步性，开始出现IV期成熟卵巢，在8月已有大量的IV期成熟卵巢，9月中旬在基地的观察中发现已有大量的抱卵虾。

2.3 克氏原螯虾卵巢发育时期组织特征

对克氏原螯虾外观颜色较为典型的卵巢进行切片观察（图 5～图 8），对 I期、II期、III期和 IV 期卵巢进行组织学方面的特点研究（表3），与戴颖等[8]对武汉地区的克氏原螯虾性腺切片的研究结果基本一致。

3 讨论

来宾地区克氏原螯虾4月底投放的20 g左右种虾在5月下旬其卵巢已经开始发育，基本处于I期，卵巢细小为透明或者白色，卵粒为小米粒状，切片组织结构观察卵细胞直径为100～200 μm，细胞近似圆形，细胞质中的卵黄物质含量很少，因此没有被伊红染成红色，而被苏木精染成蓝色。6月卵巢发育缓慢，依然以I期卵巢为主，部分可以发育到II期，II期卵巢为淡黄色或黄色，卵巢相较于I期有所增大并向后延伸，卵粒明显，组织切片观察到卵细胞直径为200～500 μm，细胞近似圆形或椭圆形，细胞质增多，质内卵黄物质开始出现，能被伊红染成红色，不过还是能沾染苏木精变微蓝。7月下旬卵巢发育不同步性明显，III期、IV期卵巢开始出现，4个时期的卵巢同时存在，卵巢发育迅速，III期卵巢颜色为深橙色或棕色，卵巢进一步增大并继续向后延伸，卵粒变大明显，卵直径在 500～1 000 μm，卵细胞和细胞核明显增大，卵细胞质中卵黄物质明显增多，细胞质被伊红染成明显的红色。IV期卵巢颜色为褐色或黑色，卵巢极度膨胀，卵巢被膜很薄且易破，卵细胞呈游离状态，随时可以排卵，切片下观察其卵细胞直径＞1 000 μm，细胞质中有大量卵黄物质，观察到有能被伊红染成红色的大块颗粒，卵细胞之间已分离。8月下旬，卵巢发育迅速，大部分已经发育到IV期，多数克氏原螯虾已经具备排卵的能力，开始进入繁殖的高峰期。9月初已经开始出现抱卵虾，至中旬开始大规模抱卵。

表3 克氏原螯虾的卵巢发育分期组织特征

来宾地区属亚热带气候，降水充沛、日照充足，雨热同季，克氏原螯虾卵巢整体发育时期相较于北方要提前1～2个月。对其体长，头胸甲长、体重的测量与卵巢发育进行比较，没有发现其存在明显相关性。卵巢的发育与气候和时间有很大的关系，5—6月卵巢发育缓慢，但体指标增长明显，7—8月卵巢发育迅速，8月下旬已有大量成熟卵巢，但其体指标增长不如5—6月明显，且体指标大的虾其性腺发育也未必快于体指标小的虾，这与朱端亚等[9]的研究相符合。

来宾地区克氏原螯虾养殖刚刚起步，可以利用气候优势，合理规划养殖周期，通过冬闲田养殖模式开发，解决克氏原螯虾上市过于集中的问题，给当地养殖户带来良好的收益。