桂西地区壮族男性不育畸形精子症的临床特征分析

刘中林 杨凤莲 韦玉霞 庞晓霞 廖碧云 陈兴鸿 王俊利

【摘要】目的探討桂西地区壮族不育男性畸形精子症的特点。

方法收集2019年1月至8月就诊的2275例桂西壮族男性不育患者，采用Diff-Quik染色对精子形态进行研究;使用计算机辅助精液分析（CASA）技术检测精子前向运动力、浓度、总活力等;采用固相BAPNA法分析精子顶体酶活性。对比畸形和正常精子患者的精液常规参数、顶体酶活性。分析精子正常形态百分率与精液常规参数、精子顶体酶活性的相关性。

结果精液形态检测发现畸形精子症患者占47.47%，在畸形精子症患者中，中度畸形占49.35%，比重最大;在精子畸形部位中，以头部畸形为主，占69.83%;在精子头部畸形类型中，锥形头比例最高，占48.00%。畸形组患者的精子前向运动力、浓度、总活力、顶体酶活性均低于正常组，差异有统计学意义（P均<0.01）。精子正常形态百分率与精子前向运动力、浓度、总活力、顶体酶活性呈正相关（P均<0.01）。

结论桂西地区壮族不育男性人群中患畸形精子症较多，其中中度畸形比例最大，精子畸形部位以头部异常为主，在头部异常类型中锥形头常见。精子正常形态百分率与精子前向运动力、浓度、总活力、顶体酶活性呈正向关联。

【关键词】男性不育;精液质量;精液参数;桂西;壮族

中图分类号：R698.2文献标志码：ADOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2020.04.012

AnalysisofclinicalcharacteristicsofinfertilemenwithteratozoospermiaofZhuangnationalityinwesternregionofGuangxi

LIUZhonglin1，3，YANGFenglian2，WEIYuxia1，PANGXiaoxia3，LIAOBiyun1，CHENXinghong1，WANGJunli1

（1.CenterofReproductiveMedicineofAffiliatedHospital，2.SchoolofPharmacy，3.GraduateSchool，YoujiangMedicalUniversityforNationalities，Baise533000，Guangxi，China）

【Abstract】ObjectiveToinvestigatethecharacteristicsofinfertilemenwithteratozoospermiaofZhuangnationalityinwesternGuangxi.

MethodsFromJanuarytoAugust2019，2275maleinfertilepatientsofZhuangnationalityinwesternGuangxiwerecollected.Diff-Quikstainingwasusedtostudythemorphologyofsperm.Computeraidedsemenanalysis（CASA）technologywasusedtotestforwardmotility，concentrationandtotalmotilityofsperm.AndsolidphaseBAPNAmethodwasusedtoanalyzespermacrosinactivity.Thesemenroutineparametersandacrosinactivityofabnormalandnormalspermatozoawerecompared.Andthecorrelationbetweenthepercentageofnormalspermmorphologyandthenormalsemenparametersandacrosinactivitywasanalyzed.

ResultsSemenmorphologytestshowedthatpatientswithteratozoospermiaaccountedfor47.47%，andamongthem，moderateteratozoospermiaaccountedfor49.35%，whichhadthehighestproportion.Headdeformitywasthemainpartofspermdeformity，accountingfor69.83%，andinthetypeofspermheaddeformity，theproportionofcone-shapedheadwasthehighest，accountingfor48.00%.Thespermforwardmotility，concentration，totalactivityandacrosinactivityintheabnormalspermgroupwerelowerthanthoseinthenormalspermgroup，differencewasstatisticallysignificant（allP<0.01）.Therewasapositivecorrelationbetweenthepercentageofnormalspermmorphologyandspermforwardmotility，concentration，totalactivityandacrosinactivity（allP<0.01）.

ConclusionTherearemanyabnormalspermatozoaintheinfertilemalepopulationofZhuangnationalityinwesternGuangxi，amongwhichtheproportionofmoderatedeformityisthelargest，andtheabnormalpositionofspermatozoaismainlyheadabnormality，andcone-shapedheadiscommoninthetypeofheadabnormality.Thepercentageofnormalspermmorphologyispositivelycorrelatedwithforwardmotility，concentration，totalactivityandacrosinactivity.

【Keywords】maleinfertility;semenquality;semenparameters;westernGuangxi;Zhuangnationality

近年来，多国流行病学实验数据提示人类的生育力普遍降低，特别是男性生育力下降明显，单纯男方因素导致不育超过1/3[1]。所以精子质量与男性不育之间的关联性研究，是临床领域的重点课题，而精子形态学又是其中的重要理论之一。精子形态正常才能保证精子各项功能都正常，精子形态出现异常也会导致相应的功能受到影响，进而降低精子活力，与受精卵结合的概率下降，出现不育症[2]。不同区域人群，由于民族遗传性、环境因素等不同，精液质量的情况和特征也不同[3]，而桂西地区壮族大样本的报道比较少，本研究旨在观察桂西地区壮族不育男性畸形精子症的特点，以了解目前桂西地区壮族不育男性精子形态学特征。

1对象与方法

1.1研究对象

选取2019年1月至8月在右江民族医学院附属医院男科就诊的2275例壮族不育男性为研究对象，年龄21～55岁，平均（33.58±6.42）岁，所有患者都需进行精液常规检查，其中进行精子顶体酶活性检查的患者有289例。

1.2纳入和排除标准

纳入标准：（1）户籍为百色、河池，患者常住户籍地5年及以上，且未离开;（2）身体状态良好，无肝、肾、心脑血管等严重疾病;（3）夫妻性生活正常且未采取避孕措施1年以上，而妻子未受孕者;（4）不存在生殖器畸形、睾丸萎缩、隐睾等影响男性不育的疾病。排除标准：（1）精液存在黏稠度超过2cm、不液化或液化程度低等情况;（2）精液不完整。

1.3研究方法

1.3.1精液标本采集及处理

在精液采集前患者禁欲2～7天，通过手淫法获得精液，将其装入一次性无菌尿杯中，调整水浴箱温度到37℃，将装有精液的尿杯置入其中进行30分钟液化处理。

1.3.2精液常规检查

参考第五版《世界卫生组织人类精液检查与处理实验室手册》的方法，对精子活力、精子前向运动力、精子浓度进行检测。采用西班牙CASA全自动精子质量分析系统来分析精液。分正常形态组（正常精子形态百分率≥4%，共1195例）和畸形组（正常精子形态百分率<4%，共1080例），其中畸形组又可分为轻度畸形组（3%≤正常精子形态百分率<4%，共360例）、中度畸形组（2%≤正常精子形态百分率<3%，共533例）、重度组（1%≤正常精子形态百分率<2%，共184例）和极重度畸形组（正常精子形态百分率<1%，共3例）。

1.3.3精子顶体酶活性检测

采用固相BAPNA法进行检测，检测工具为深圳博锐德生物公司精子顶体酶活性定量测定试剂盒，参与检测的患者共有289例。根据精子正常百分率进行分组：正常形态组（正常精子形态百分率≥4%，共172例）和畸形组（正常精子形态百分率<4%，共117例）。

1.3.4精子形态分析

采用Diff-Quik染色进行分析。按WHO标准，将头部长宽比>1.8称为锥形异常，头部长宽比<1.3称为圆形异常，长宽分别大于4.7μm和3.2μm为大头异常，长宽分别小于3.7μm和2.5μm为小头精子，总共分类100个样本。

1.4统计学方法

研究数据利用SPSS22.0统计学软件进行分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，对数据进行正态性及方差齐性检验，不符合正态性及方差齐性的数据，采用非参数秩和检验，相关分析采取Spearman秩相关检验，用r表示相关系数，检验水准：α=0.05，双侧检验。

2结果

2.1精子形态学构成分析

精子形态学检测发现畸形精子症患者1080例，占47.47%。在畸形精子症患者中，中度畸形533例，占比最高，为49.35%;在精子畸形部位中，头部畸形最多，为418135个，占69.83%;100例头部畸形精子症患者，以头部锥形异常为主，占48.00%。见表1～表3。

2.2畸形和正常精子的精液常规参数、顶体酶活性比较

畸形组患者的精子前向运动力、浓度、總活力、顶体酶活性均低于正常组，差异有统计学意义（P<0.01）。见表4、表5。

2.3精子正常形态百分率与精液常规参数、精子顶体酶活性的相关性

精子正常形态百分率与精子前向运动力、浓度、总活力、顶体酶活性呈正相关（P均<0.01）。见表6。

3讨论

本研究通过Diff-Quik染色展开精子形态分析，发现52.53%的精子形态正常，而畸形精子症占47.47%，与其他地区相比，桂西地区壮族不育男性患者中畸形精子症的发生率较高[4～6]。而刘兰民[7]认为，少数民族精液质量低于汉族可能由于民族遗传性、环境因素、宗教信仰、生活方式等因素造成，例如回族由于宗教信仰在餐饮场所中工作较多，长期处于厨房高温环境下，阴囊温度相对较高，严重干扰生精细胞的功能，造成生精障碍，影响精子质量，这可能是少数民族男性精子畸形率高于汉族的重要原因。桂西地区壮族不育男性畸形精子症发病率较高可能还有一个重要原因，即桂西地区地域辽阔，多山地，山路崎岖，与广东、江苏等发达地区相比，就医不便，生殖健康知识普及不广，一些疾病如精索静脉曲张、隐睾等得不到及时诊治，同时卫生条件较差，增加了生殖道感染的可能，而且壮族男性多数喜欢饮酒和食用腌制类食品，这些因素都可能导致精子畸形率升高。

男子的生育能力与精子形态直接相关，精子形态在精液参数中占据重要地位，对精子形态的分析有助于不育症的诊断。AMBE等[8]发现，精子头部出现畸形的概率较大，不仅IVF受精能处于较低水平，而且更容易出现流产，由此可知精子形态直接决定了最终的受精结局。国内外诸多的文献报道小头精子、锥形精子、圆头精子对自然受孕和辅助生殖技术存在明显影响[9～13]。结合本文报告可知，精子头部是出现异常的主要部位，在精子头部各结构畸形中，除了小头精子以外，最容易产生畸形的精子还包括锥形精子。而本研究发现桂西地区壮族不育男性畸形精子症的各种类型比例，与其他区域群体研究结果相符[14]。

本研究还发现，除了精子前向运动和密度以外，精子形态学还和活动率之间存在紧密关联。精子形态不仅会影响精子运动曲线性，还直接波及精子前向运动速度，在降低精子总活力的同时，还将削弱前向运动力[15]。当正常形态精子满足既定比例时，方能将活力维系在正常标准。由于畸形精子运动能力下降，难以在女性生殖道内有效运动，最终降低精子受精能力，无法生育。部分学者指出，精子畸形直接影响了精子顶体酶活性，一旦精子顶体酶出现异常势必导致畸形精子缺少顶体或是顶体较薄[16]，如小头精子，顶体区几乎没有。因此，随着精子正常形态百分率下降，精子顶体酶活性也同步降低。

本研究初步明确了桂西地区壮族不育男性畸形精子症发病较其他区域群体偏高;畸形特点特征与其他少数民族地区相似;且精子顶体酶、前向运动力、密度及总活力与畸形精子比例相关，有助于畸形精子特征更好地用于临床实验诊断。下一步，将进一步研究壮族男性不育群体中遗传环境因素对男性畸形精子症的影响。

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（收稿日期：2019-10-15修回日期：2020-03-04）

（编辑：梁明佩）

基金项目：广西自然科学基金（2018GXNSFAA050034，2019GXNSFBA245034）;广西教育厅高校中青年教师基础能力提升项目（2018KY0437）

作者简介：刘中林，男，检验技师，医学学士，研究方向：不孕不育的分子遗传学研究。E-mail：437579736@qq.com

通信作者：王俊利。E-mail：13907768146@163.com

[本文引用格式]刘中林，杨凤莲，韦玉霞，等.桂西地区壮族男性不育畸形精子症的临床特征分析[J].右江医学，2020，48（4）：296-299.