空气湿度对注射用重组人干扰素α2b水分测定的影响

冯雪，李帅，李野，曹宇，杨红育

（长春生物制品研究所有限责任公司，吉林长春 130012）

注射用重组人干扰素α2b是由高效表达该干扰素基因的大肠杆菌经发酵、分离和高度纯化后获得的重组人干扰素α2b冻干制成，含适宜稳定剂，不含防腐剂和抗生素[1]。水分是注射用重组人干扰素α2b的一项重要指标，需要对其进行准确测定。测定水分的方法有很多，卡尔·费休法自Karl Fischer于1935年发明后，已成为世界公认的水分测定的经典方法之一[2-5]。有文献表明[6-8]，卡尔·费休容量滴定法的影响因素较多，其中环境湿度是导致费休氏法滴定出现误差的常见因素之一。当实验环境中空气相对湿度低于40%时，水分测定仪漂移值基本稳定，但随着实验环境中空气湿度的不断增大，测定结果也随之增大。注射用重组人干扰素α2b为水溶性冻干制剂，在测定水分过程中，样品的前处理过程也会受到环境湿度的影响。本文通过称量法和卡尔·费休容量滴定法测定该药品在不同相对湿度下增的水分含量，对该药品水分测定过程中空气相对湿度的影响进行研究。

1 材料与方法

1.1 材料和仪器

乙酸钾（分析纯；含量≥92.0%）、氯化镁（分析纯；含量≥98.0%）、碳酸钾（分析纯；含量≥99.0%）、溴化钠（分析纯；含量≥99.0%）、氯化钠（分析纯；含量≥99.5%）均购自国药集团化学试剂有限公司。

XS205型电子天平、V30水分测定仪和Stromboli卡氏干燥炉均购自梅特勒-托利多。

1.2 实验样品

注射用重组人干扰素α2b由长春生物制品研究所有限责任公司生产，批号为B20190501、B20190502、B20190503。

1.3 实验方法

1.3.1 称量法

取5个玻璃干燥器，配制5种无机盐的饱和溶液[9-10]，盐的种类及其在25 ℃和30 ℃下的湿度见表1。为避免卡氏样品瓶在实验过程中吸湿对测定产生影响，放置样品前先将卡氏样品瓶分别放入干燥器中干燥至恒重。

将样品捣碎，倒入已恒重的卡氏样品瓶中，精密称量（精确至0.01 mg），记录样品和卡氏样品瓶的总质量。再将其分别放置于上述干燥器中10 min，精密称定（精确至0.01mg），记录总质量。两次称量之差即为样品增加的水含量。

表1 饱和无机盐溶液湿度对照表

1.3.2 卡尔·费休容量滴定法

1.3.2.1 操作条件

卡氏干燥炉加热温度：（150±2）℃；卡氏干燥炉加热时间：10 min；费休氏试液滴定度：1 mg/mL；载气：高纯氮。

1.3.2.2 测定方法

分别在环境湿度为27%及42%条件下测定样品，每批样品连续测定6次。

2 结果与分析

2.1 不同湿度下称量法测定样品增加水含量的差异

如图1所示，通过测定不同相对湿度下样品增加的水含量，观察到样品在饱和溴化钠溶液（55.6%～58.0%）和饱和氯化钠溶液（74.9%～75.5%）中水含量增加较多，在饱和乙酸钾溶液（21.0%～22.9%）中增加最少，在饱和氯化镁溶液（32.2%～33.0%）及饱和碳酸钾溶液（42.7%～43.6%）中增加量几乎相同。样品水分含量随着空气湿度的增大而增大。

图1 不同相对湿度下称量法测定样品增加的水含量

2.2 不同湿度下卡尔·费休容量滴定法测定样品水分的差异

如表2所示，通过平均值比较，同一批号的样品采用卡尔·费休容量滴定法在环境湿度为27%及42%条件下，测得水分含量无显著差异，这说明环境湿度对卡尔·费休容量滴定法测定样品水分没有明显影响。

3 结论

采用称量法和卡尔·费休法测定不同湿度条件下注射用重组人干扰素α2b样品中的水分含量。发现使用称量法时，随着空气湿度的增大，样品含水量也随之增大，空气湿度对水分含量的影响较大；使用卡尔·费休法时，不同湿度条件下测得的水分含量无明显差别。说明卡尔·费休法可以更为准确地测定重组人干扰素α2b样品中的水分含量。

表2 不同环境湿度下卡尔·费休容量法测定样品水分含量