注射用阿莫西林钠克拉维酸钾在0.9%氯化钠注射液中有关物质的考察

张红梅，王桂英，魏永涛

(济南市食品药品检验检测中心，济南 250021)

注射用阿莫西林钠克拉维酸钾为阿莫西林钠和克拉维酸钾(5∶1)的复方制剂。阿莫西林为广谱β-内酰胺类抗生素；克拉维酸钾仅有微弱的抗菌活性，但具有较强广谱β-内酰胺酶抑制作用，可保护阿莫西林免遭β-内酰胺酶水解。该复方制剂拓宽了抗菌谱，增加了抗菌活性，临床上使用广泛。但其溶液稳定性较差，极易变色[1-2]。虽然对于使用过程中的安全性影响尚没有数据支持，但其活性成分含量快速下降可影响其有效性。本实验结合临床实际应用情况，通过测定安全性重要指标——有关物质的变化，来探讨在有效性下降的同时，其存在的安全性风险。

1 材料和方法

1.1 仪器

1.2 试药

阿莫西林克拉维酸系统适用性对照品(批号：130588-201603，来源：中国食品药品检定研究院)；注射用阿莫西林钠克拉维酸钾(编号1、2、3、4，规格：1.2 g；批号分别为：22190409、190302、608190101、19040942，来源：山东省4个不同厂家)；阿莫西林钠(批号：3201904306，来源：珠海联邦制药股份有限公司)；克拉维酸钾(批号：3561906620，来源：珠海联邦制药股份有限公司)；0.9%氯化钠注射液(NS，批号：C180501041，来源：山东科伦药业有限公司)；乙腈(色谱纯，国药集团化学试剂有限公司)；其他试剂均为市售分析纯。

1.3 色谱条件[3]

色谱柱：Agilent Zorbax SB C18(150 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相A：0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液(用2 mol/L 氢氧化钠溶液调节pH值至6.0)，流动相B：0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液(用2 mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.0)-乙腈(20∶80)；检测波长：230 nm；流速：1.0 ml/min；进样量：20 μl；柱温：30 ℃。

1.4 溶液的制备

系统适用性溶液：取阿莫西林克拉维酸系统适用性对照品约10 mg，加4 ml流动相A溶解。

供试品溶液：4个厂家样品，各取2瓶。1瓶加20 ml NS溶解，1瓶加10 ml NS溶解，在0 h、0.17 h(10 min)、0.5 h、1 h、2 h、3 h时间点，分别精密量取适量，用流动相A稀释成每1 ml中约含阿莫西林 2 mg 的溶液。精密称取阿莫西林钠原料药1.0 g和克拉维酸钾原料药0.2 g置同一西林瓶中，一瓶加20 ml NS，另一瓶加10 ml NS，在0 h、0.17 h(10 min)、0.5 h、1 h、2 h、3 h时间点，分别精密量取适量，用流动相A稀释成每1 ml中约含阿莫西林 2 mg 的溶液。精密称取阿莫西林钠原料药1.0 g、克拉维酸钾原料药0.2 g，按上述操作分别单独制备相应供试品溶液。

对照溶液：精密量取供试品溶液2 ml，置100 ml量瓶中，用流动相A稀释至刻度。药典标准规定：单个杂质不得过对照溶液两个主峰面积和的2.5%，各杂质的和不得过对照溶液两个主峰面积和的7.0%。

2 结果

按“1.3”色谱条件测定的有关物质结果见表1和表2。从结果中看出：① 单一克拉维酸钾原料药用NS溶解后，随时间延长峰面积几乎无变化，无杂质峰产生。② 4个样品及阿莫西林钠与克拉维酸钾混合物变化趋势一致，随时间延长，杂质个数增多，单个最大杂质含量增加，并趋于稳定，杂质总和含量不断增加。③ 单一阿莫西林钠原料药随时间延长，杂质个数增多，单个最大杂质含量增加，杂质总和含量不断增加，但杂质个数明显比样品及其与克拉维酸钾的混合物少。④ 第一步用10 ml NS溶解，随时间延长，在相同时间点杂质个数、单个最大杂质、杂质总和明显比用20 ml NS溶解多。

表1 不同企业产品在不同时间的有关物质结果

续表1

*: 最大杂质分离，所以含量较2 h低

表2 不同时间克拉维酸钾原料药结果

通过与系统适用性溶液的标准图谱叠加比较(见图1)，几个典型杂质的含量如下(见表3)：① 阿莫西林钠原料药中最大杂质是阿莫西林闭环二聚体，占杂质总量的50%以上，且随时间延长一直在增大。② 4个样品及阿莫西林钠与克拉维酸钾混合物最大杂质是阿莫西林闭环三聚体，随时间延长增大并趋于平稳，但阿莫西林闭环二聚体的含量随时间延长一直在增加，两者之和占杂质总量的50%左右。

A: 系统适用性溶液的标准图谱；B：阿莫西林钠原料药0 h、3 h与标准图谱的叠加图1 高效液相色谱图

表3 不同企业产品在不同时间各杂质的变化

续表3

3 讨论

从实验数据看出，用NS溶解后，各样品随着时间延长，阿莫西林二聚体及三聚体的含量增加非常明显。高分子聚合物杂质是引起速发型过敏反应的主要因素[4-8]，这就增加了药物的安全性风险；而且溶解液体积越小，溶液浓度越高，杂质变化越明显，提示第一步溶解时尽可能用较大体积NS。在 0 h 和0.17 h(10 min)时，单个最大杂质(<2.5%)、杂质总和(<7.0%)均符合2015年版《中国药典》的规定[3]，但0.5 h后，各样品的数据均超出了限度范围，所以建议配制的第一步溶液应在10 min内使用，最好临用现配。

经查询，全国范围内注射用阿莫西林钠克拉维酸钾共有32家生产企业，61个药品批准文号，其中山东省有5家企业、8个批准文号。而国内提供原料药的厂家只有3家。前期我们检测了9个厂家35批样品，单个最大杂质含量在0.2%～0.6%之间，各杂质和含量在0.4%～0.9%之间。可见从目前现有的工艺水平、技术手段、严格的贮存条件来控制杂质的含量降低是困难且有限的。基于现实情况，如能在临床使用过程中抓住细节、规范操作，减少杂质尤其是高分子聚合物的产生，则可以直接快速地提高药品的安全性和有效性。

综上，为保证药品的安全有效，建议药典标准增设聚合物项目的检查。临床使用时，要临用现配；第一步溶解时尽可能用大体积溶剂，溶解后立即注入输液瓶中并尽快使用，不可放置，一旦变色不可再用。