抗凝血酶III（AT III）测定试剂盒在Sysmex CS5100的性能验证

陈德祥，李程程

（1.大方县中医医院 检验科，贵州 毕节 551600；2.贵州医科大学附属医院 产前诊断中心，贵州 贵阳 550001）

0 引言

抗凝血酶III（Antithrombin III，AT III）由肝细胞分泌产生，是机体中主要的抗凝血因子，监测抗凝血酶III的水平在临床上有着极为重要的意义。根据ISO15189和美国《临床实验室改进修正法案》（CLIA’88）的规定，需要在使用新诊断试剂盒前对其各项性能指标进行逐一验证[1]。故本试验将对Sysmex抗凝血酶III测定试剂盒在我院Sysmex CS5100的性能指标进行验证，以判断是否满足试剂说明书及相关法规的要求。

1 对象与方法

1.1 对象

根据WS/T406-2012[2]和CLSI EP文件制定性能验证方案。试剂与仪器:Sysmex抗凝血酶III测定试剂盒、Sysmex CS5100。

1.2 方法

（1）最低检测限测定:采用同一批号试剂，重复测定接近零浓度样本10次，计算变异系数（CV）值，以CV不大于10%为判断标准。

（2）精密度测定:参考CLSI EP5-A2文件[3]和WS/T406-2012文件要求，批内精密度测定采用同一批产品，测定两个浓度水平的血浆标本，要求其中一个标本检测结果在参考值范围，而另一个标本检测结果为异常值。每个标本连续重复测定11次，计算批内精密度CV，以正常水平不高于6%，异常水平不高于12%作为判断标准；批间精密度测定采用同一批产品，测定两个浓度水平的血浆样本，连续测定20天，每天测一次，计算批间变异系数CV，以正常水平不高于9%，异常水平不高于15%作为判断标准。

（3）正确度相对偏差:取10份参考区间内的标本，每个测2次，计算20次以上检测结果的均值，以通过ISO 15189实验室的测定均值为标准，计算偏差，以不高于10%作为判断标准。

（4）线性范围:选取一份接近预期上限的高浓度血浆（H），分别按100%、80%、60%、40%、20%和10%的比例进行稀释，每个稀释度重复测定2次，将实测值与理论值作比较，验证线性范围。以试剂说明书规定的R＞0.975，a=1±0.05为判断标准。

（5）参考区间:参考NCCLS C28-A2文件[4]，选择20个能够代表实验室的健康总体的样本进行测试，20个参考个体的检测值在验证参考区间之外的样本应不超过1例。

1.3 数据分析

应用Microsoft 2013及SPSS 20.0软件进行统计学分析。采用K-S正态分布检验来检查数据正态性，以P＞0.05表示数据呈正态分布，正态分布资料以（）表示。相关性分析采用Pearson相关分析，P＜0.05表示相关具有统计学意义。线性回归采用简单线性回归分析，P＜0.05表示回归具有统计学意义。

2 结果

2.1 最低检测限测定

重复检测接近零浓度的样本10次，结果分别为16%、14%、14.8%、14.9%、14.1%、14.7%、14.8%、13.7%、15.6%、14.5%，CV=4.78%，CV ≤10%，符合说明书规定，验证通过。

2.2 精密度测定

结果如表1所示，批内精密度测定两个浓度水平的CV分别为0.44%、0.89%，均分别小于6%和12%；批间精密度两个浓度水平的CV分别为为4.34%、6.14%，均分别小于9%和15%。以上结果说明精密度验证通过。

表1 精密度的测定

2.3 正确度相对偏差测定

如表2所示，以比对实验室结果作为标准，得出的相对偏差小于规定值10%，验证通过。

2.4 线性范围测定

如表3所示，在7.7-96.25%区间内，获得线性回归方程y=0.9585x+1.1552，相关系数r=0.9985，a=0.9585，均符合试剂说明书规定的r＞0.975，a=1±0.05。

2.5 参考区间

表2 正确度相对偏差测定

表3 线性范围验证

如表4所示，超出参考区间的样本数为1例（参考范围:75-125%），符合说明书规定，验证通过。

表4 参考区间验证

3 讨论

检测结果的准确性和可靠性是对所有临床检验实验室的基本要求，也是所有临床检验实验室所必须重视的。为了获得准确和可靠的检验结果，检验科在引入新的检测试剂时，即使试剂厂商已提供了符合国家标准的性能检测指标，也要在实验室对试剂进行性能验证[5]。

本试验对我检验科新引入的Sysmex AT III进行最低检测限、精密度、正确度、线性范围及参考区间进行验证，以判断该试剂是否满足要求。结果表明，该检测试剂盒各项性能指标均符合产品说明书和行业标准的相关要求。说明Sysmex AT III检测试剂在Sysmex CS5100全自动凝血分析仪上表现出较好的性能状态，能满足医院临床需求。