氟啶胺对多种柑橘病原真菌的室内毒力作用

杜丹超 蒲占湑 胡秀荣 吕 佳 刘顺民 张利平 黄振东

（浙江省柑橘研究所 台州 318026）

柑橘栽种过程中，树体及柑橘果实在生长发育和采后贮存期易遭受多种病害的侵染，其中真菌性病害最为严重。主要的真菌性病害有生产期的柑橘黑点病、柑橘褐斑病、柑橘炭疽病等，储藏期真菌性病害有柑橘蒂腐病、柑橘青绿霉病、柑橘黑斑病等。真菌性病害不仅影响树势生长，对柑橘品质、外观也有较大影响，对柑橘产业造成巨大的损害。

目前，化学防治仍是柑橘真菌性病害最经济、有效的防治手段。代森锰锌、咪鲜胺等常规化学药剂的大量使用，在多个柑橘种植区已出现防效降低的现象，这可能与病原真菌抗药性增强有关[1，2]。因此筛选无交互抗性的新型高效药剂势在必行。氟啶胺是较为安全的保护型杀菌剂，属2，6-二硝基苯胺类化合物，是一种氧化磷酸化作用的解偶联剂，杀菌机制独特、杀菌谱广[3]，对草莓灰霉病、梨轮纹病、小麦赤霉病等真菌病害防治效果显著[4～6]。目前国内还未有氟啶胺防治柑橘真菌性病害的报道，本研究测定氟啶胺、咪鲜胺对柑橘炭疽病菌、柑橘黑点病菌、柑橘黑腐病菌等多种病原真菌的毒力作用，以期为柑橘真菌性病害低毒高效无抗性防治药剂的选择提供依据。

1 材料和方法

1.1 供试药剂和菌株

500g/L氟啶胺悬浮剂（先正达集团提供）；450g/L咪鲜胺（安道麦马克西姆有限公司提供）；柑橘炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides）、柑橘褐斑病菌（Alternaria alternate）、柑橘绿霉病菌（Penicillium digitatum）、柑橘褐色蒂腐病菌（phomopsis cytosporella）等 7种病原真菌，为2015～2019年分离并保存于浙江省柑橘研究所。

1.2 培养基

马铃薯琼脂培养基（PDA）：去皮马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g，无菌水1000ml。

1.3 带药培养基制备

将氟啶胺和咪鲜胺溶于无菌水，配成母液。采用倍半稀释法制备含药培养基平板，氟啶胺含药培养基平板中的最终质量浓度为0.0031， 0.0062， 0.0125， 0.025， 0.05mg/L。咪鲜胺的最终质量浓度为 0.0125， 0.025，0.05， 0.1， 0.2mg/L。以加无菌水制成的PDA平板作空白对照。

1.4 杀菌剂对柑橘病原真菌抑制率测定

采用菌丝生长速率法，将柑橘蒂腐病菌、柑橘青霉病菌等 7株病原真菌接种于PDA培养基上，培养 5 d后，于菌落边缘打取 5mm直径的菌饼，分别接种于带药PDA培养基平板上，以不含杀菌剂处理为对照，每个处理重复三次。

将接菌后的平板于28℃培养箱内倒置培养，当对照菌落直径长至培养皿 2/ 3时，采用十字交叉法测量菌落直径，根据公式计算杀菌剂对柑橘病原真菌的菌丝生长抑制率[7]。菌丝生长抑制率=[1-（处理菌落直径-菌饼直径）/（对照菌落直径-菌饼直径）]×100%。以抑制率概率值为纵坐标绘制毒力回归曲线，根据毒力回归方程求出杀菌剂的有效抑制中浓度EC50。

2 结果与分析

由表 1、表 2可知，在测试范围浓度内，氟啶胺、咪鲜胺对 7种柑橘病原真菌的菌丝生长均有较好的抑制作用。氟啶胺对柑橘黑腐病原菌、柑橘褐斑病原菌、柑橘蒂腐病原菌和柑橘黑点病原菌的抑制效果要高于咪鲜胺，其中对柑橘黑点病原菌、柑橘蒂腐病原菌的抑制效果最好，EC50分别为 0.004mg/L和 0.008mg/L，其次为柑橘黑腐病原菌和柑橘褐斑病菌。而咪鲜胺对柑橘黑斑病原菌和柑橘绿霉病原菌的菌丝生长抑制效果要高于氟啶胺。

表1 氟啶胺对多种柑橘病原真菌菌丝生长的毒力作用

表2 咪鲜胺对多种柑橘病真原菌菌丝生长的毒力作用

3 讨论

抑制植物组织内的菌丝生长是病害防治的一种重要方法，本文测定的 2种杀菌剂氟啶胺和咪鲜胺对 7种柑橘病原真菌菌丝生长抑制效果明显。从毒力数据来看，相较于咪鲜胺，氟啶胺对柑橘黑点病菌(Diaporthe citri)（采后柑橘褐色蒂腐病菌)室内毒力效果最为显著，对柑橘褐斑病菌(Alternaria alternate)(采后柑橘黑腐病菌)抑制效果较好。多年研究数据表明二硫代氨基甲酸盐酯类和铜制剂类保护性杀菌剂对柑橘黑点病菌室内菌丝生长抑制效果低于咪鲜胺、嘧菌酯等内吸性杀菌剂，但田间防效确却高于咪鲜胺等内吸性杀菌剂[8～-10]。氟啶胺是一种吡啶胺类保护性杀菌剂，作为线粒体氧化磷酸化解偶联剂，通过作用于ATP合成酶，在呼吸链的尾端解除氧化与磷酸化的关联，能最大程度消耗电子传递积累的电化学势能，较低浓度就能达到理想见效[11]，已有研究表明其具有持效期长、耐雨水冲刷、低抗药性风险、低环境风险且与多类杀菌剂无交互抗性等特性[12～14]。或可考虑将氟啶胺作为柑橘真菌性病害防治杀菌剂的候选药剂，特别是用于柑橘黑点病和柑橘褐斑病的防治，因此下一步可有选择的开展田间实际防效实验，进行防治效果、药剂使用剂量、间隔期、农药残留等研究。