茶叶中γ-氨基丁酸的研究进展
2020-04-17周洁范静怡周倩倩崔继来
周洁 范静怡 周倩倩 崔继来
中国是茶叶的起源地,至今已有5000多年食用茶叶的历史。饮茶除生津止渴外,最早为劳动人民认知的就是其药用功能。“神农尝百草,日遇七十二毒,得荼而解之”,这是历史上现存最早有关茶叶的记录,体现了茶叶的药用价值。现如今,人们对茶叶功能成分的研究已经比较全面,如茶多酚、茶多糖、咖啡碱、茶皂苷等,但对茶叶中γ-氨基丁酸(γ-aminobutanoic acid, GABA)的研究还不够深入。γ-氨基丁酸又名4-氨基丁酸,是一种天然存在的非蛋白质氨基酸,它是哺乳动物中枢神经系统中最重要的抑制性神经递质,具有调节血压、抗焦虑、降低胆固醇、增强脑活力、促进乙醇代谢等多种生理功能,特别是GABA的降压效果明显,使其在心血管疾病(Cardiovascular Disease, CVD)研究领域得到广泛关注。根据《中国心血管疾病报告2017》介绍,中国目前的CVD患者约有2.9亿人,其中高血压占2.7亿人,并且CVD死亡占中国居民疾病死亡构成的40%以上,居首位。自从1973年Guertzenstein首次提出GABA作用于脑干,能观察到动脉血压降低以来,后续又有很多研究证实GABA作用于动物,有明显降低血压和减缓心率的作用。
茶叶作为日常饮品,天然含有GABA,但含量低于0.02%。本文就加工过程中如何提高茶叶GABA的含量,并对目前GABA茶的降血压效果研究进展作了系统综述。
一、GABA茶的加工研究现状
(一)厌氧处理
早在1987年,日本学者将茶叶置于充满N2的厌氧环境下观察6 h,茶叶中GABA含量显著升高,动物试验和临床试验结果都显示该茶具有显著的降血压效果,从此便将GABA含量在150 mg/100 g以上的茶叶命名为GABA茶。林智等研究厌氧处理对GABA含量影响,结果表明,时间和气体是对GABA影响最大的两个因素。研究发现,真空处理明显优于N2处理,鲜叶在25 ℃下真空8 h→微波杀青→80 ℃烘干,得到GABA含量为332.97 mg/100 g的GABA绿茶,其干茶色泽正常,茶多酚含量略低,氨基酸略有增加。郑红发等研究鲜叶在N2下厌氧处理12 h→炒青→揉捻→干燥,可得GABA含量为212 mg/100 g的GABA绿茶,其干茶条索紧细、匀齐、油润,汤色黄绿欠亮,带栗香,滋味较醇和。Nguyen等研究鲜叶在25~30 ℃下萎凋后→40 ℃下充N2处理9 h→杀青→揉捻→95 ℃干燥,得到GABA含量为202.77 mg/100 g的GABA绿茶。廖东兴等研究鲜叶室温萎凋3 h→充N2处理 3 h→通氧1 h→充N2 处理7 h后→杀青→揉捻→烘干,得到GABA含量为166.8 mg/100 g的GABA绿茶,其绿茶汤色黄绿,香气纯正,滋味醇和略带闷味。
有研究表明,厌氧通氧反复处理可以提高茶叶中的GABA含量。吴燕琴等通过脱氧剂除去氧气以达到厌氧效果,在脱氧剂密封3 h→通氧3 h→脱氧剂密封3 h→液N2预冷→-80 ℃保存,得到GABA含量为175 mg/100 g的GABA茶样。沈强等研究福鼎大白茶,在兼顾GABA含量、茶叶感官品质、技术的应用性和经济性条件下,结果表明,在26 ℃下真空处理3 h→通氧2 h→真空处理3 h,茶叶中的GABA含量可达到192.79 mg/100 g,干茶色绿,带青气,略有闷味。邹锋扬研究速溶茶粉,鲜叶在26 ℃下真空3 h→通氧3 h→真空3 h→通氧3 h→真空3 h,得到GABA含量为211.24 mg/100 g的GABA茶青,再经60 ℃提取→過滤→
浓缩→干燥,可得到GABA速溶茶粉。Zhao等研究GABA红茶,鲜叶经真空3 h→通氧2 h→真空3 h→通氧4 h→揉捻→发酵→110 ℃干燥,得到GABA含量为234 mg/100 g的GABA红茶。吴琴燕等通过鲜叶在真空3 h→通氧2 h→真空3 h→通氧2 h→真空3 h→通氧2 h→萎凋→揉捻→发酵→干燥,得到GABA含量为162 mg/100 g的GABA红茶,其干茶色泽乌褐,汤色红艳尚亮,带甜香,滋味醇厚尚甘爽,叶底红亮略花杂。杨四润通过充N2处理生产GABA普洱茶,萎凋时厌氧处理6 h以上,制得的普洱生茶GABA平均含量为202 mg/100 g,最高可达265 mg/100 g,且在生产后6个月内,仍能达到GABA茶标准,但是在采用酵母菌株进行固态发酵生产普洱熟茶时,未能成功,还需进一步研究。
(二)L-谷氨酸叶面处理
L-谷氨酸是GABA合成重要的前体,经L-谷氨酸脱羧酶的催化脱羧形成GABA,L-谷氨酸含量是影响GABA合成的重要因素。在厌氧处理的基础上,研究者比较施加不同叶面肥对GABA含量的影响。张定等研究施加0.5%的L-谷氨酸,5天后采摘,常温下真空处理8 h→蒸汽杀青→80 ℃烘干,制备的绿茶效果最佳,GABA含量高达462 mg/100 g,是制备GABA茶的理想方法,且茶叶中茶氨酸含量及氨基酸总量显著增加,感官品质得到有效改善。毛清黎等用2.5%谷氨酸钠溶液浸泡萎凋叶4 h→水洗→25 ℃下真空处理8 h→微波杀青→80 ℃烘干→粉碎,得到GABA含量为250.1 mg/100 g的绿茶。白茶加工中,王芳等研究鲜叶经0.05%谷氨酸钠溶液喷洒后,在25 ℃萎凋时,真空处理2 h→通氧6 h→真空处理2 h→通氧20 h,最后得到GABA含量为180.28 mg/100 g 的GABA白茶,其外形略带黑褐色尚自然,香气、滋味稍带异杂味,汤色明亮,叶底较匀、尚亮。郑红发等研究发现,浸泡时间0~15 h,GABA含量与浸泡时间呈正相关,采用1.5%谷氨酸钠溶液浸泡12 h,GABA含量达到285 mg/100 g,可作为加工GABA茶的新型实用、易推广的办法。邵文韵用10%谷氨酸钠喷洒鲜叶→真空处理12 h→杀青→匀浆→过滤离心→干燥,得到含量为380 mg/100 g的GABA速溶绿茶粉。研究证明,茶叶经过谷氨酸溶液处理后,GABA含量显著增加,比单独采用厌氧处理效果更佳。
(三)其他研究
日本学者采用微波和红外线照射,也能提高茶叶中GABA的含量。Yashiya采用波长为650~2500 nm的红外线照射鲜叶50 min,在45~46 ℃下,加工出来的茶叶中GABA含量比对照组增长25.4%。白木与志也研究发现春茶经0.4 kW微波照射后,GABA含量可达202 mg/100 g ,在兼顾GABA的含量和GABA茶品质时,夏茶以0.3~0.4 kW的微波照射20 min,GABA含量在86~114 mg/100 g,且茶叶品质较好。
此外,我们还应考虑到茶树品种的适制性及生物制法等来提高茶叶中GABA的含量。一些研究表明,选取安全性高的微生物,如乳酸菌、酵母菌、曲霉菌等在富集GABA时能取得较好的效果。Chen等通过代谢组学分析比较N2和CO2厌氧处理的代谢反应,结果表明,CO2处理更有益于GABA的富集。Liao等通過分流器和多胺降解途径研究茶叶GABA积累,发现缺氧可使谷氨酸脱羧酶和二胺氧化酶活性增加,GABA浓度显著增加。Mei等研究认为在茶叶加工过程中,缺氧胁迫和机械损伤胁迫是GABA高积累的必要条件,其机制与谷氨酸脱羧酶基因有关。
二、GABA茶降压效果研究
林智等通过14 C研究口服GABA茶后,GABA在白鼠体内的吸收与代谢,试验表明,GABA在白鼠体内的吸收顺序为胃—肝脏—肾脏—肠,舌下腺—腺—脑,为揭示GABA茶的降血压机制提供了理论依据。毛志方等研究口服灌胃GABA茶,可明显降低SHR大鼠血压,对体质量和心率无显著变化,认为GABA茶在动物试验中具有降血压作用,且对健康无影响。吴惠岭等研究不同剂量的GABA茶灌胃大鼠,从开始7 d到给药结束7 d,高剂量组SHR大鼠血压明显降低,而正常组大鼠无影响,说明GABA茶对SHR大鼠有辅助降血压作用。谭俊峰等利用不同剂量的GABA超微绿茶粉连续灌胃SHR大鼠30 d,结果表明,高剂量组对SHR大鼠血压有显著的降低作用,具有辅助降血压功能,且试验期间SHR大鼠的心率无明显变化。胡晴晴研究发现,GABA白茶对SHR大鼠的血压及动脉压力感受性反射功能均有改善作用,但是对血压波动性无改善,达不到稳定血压的作用。这些研究都证实口服GABA茶确实有减低血压的功效,但是并没有解释具体的降压机理,也缺乏口服GABA茶与降血压之间的计量关系的研究。
为了进一步探讨GABA的降血压机理,林智等通过大鼠离体试验和大鼠活体试验研究GABA对血管紧张素转换酶(angiotension·converting enzyme, ACE)活性的影响,发现离体试验中GABA浓度达到30 nmol时,ACE活性被完全抑制,活体试验中喂食3%的GABA,能明显抑制大鼠ACE活性升高,表明 GABA对ACE 活性的抑制是GABA茶降血压的主要机理之一。在大剂量注射GABA时,也有研究指出会产生急性耐受反应。周宏灏等对家犬静脉注射10 mg/kg 的GABA,当重复给药后,降压效果迅速减弱,直到不再出现降压反应。
三、展望
为了提高茶叶中的GABA含量,本文从厌氧处理、L-谷氨酸处理、微波处理、红外处理等途径,详细总结了目前国内外GABA茶的加工方法,探讨了GABA茶在降血压上的动物试验研究进展,但是关于GABA茶降血压的临床研究较少,对GABA与降血压间的剂量关系研究也较少,缺乏有说服力的科学依据。我国作为世界第一产茶大国,GABA茶的研究为我国茶产业发展打开了一扇门,既可以研究新产品,又可以扩大茶叶的销路,还可以作为提取制备GABA的原料。未来,GABA茶的加工研究及GABA茶在降血压方面的临床研究都需要进一步的深入,可作为未来的研究方向。
基金项目:河南省高等学校重点科研项目(20B210022),信阳师范学院青年骨干教师资助计划项目(2018 gGJS-13)。