氟哌噻吨美利曲辛片改善脑卒中后抑郁患者相关血清细胞因子表达水平以及感戴倾向的效果分析

李华　李忠刚　吕丽梅　万志刚　吴春艳

【摘要】 目的 探究氟哌噻吨美利曲辛片改善脑卒中后抑郁患者相關血清细胞因子表达水平以及感戴倾向的效果。方法 选取115例脑卒中后抑郁患者作为观察组， 另选同期进行健康体检的100例健康者作为对照组。观察组患者采用口服氟哌噻吨美利曲辛片进行治疗。采集所有研究对象的血清样本， 分别采用实时定量聚合酶链式反应（PCR）检测研究对象血清微小核糖核酸（miR）21的水平， 使用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测研究对象血清白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。比较两组一般资料。比较观察组不同时间段与对照组血清miR21以及炎性细胞因子IL-6、IL-8和TNF-α水平;汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评分;感戴倾向。分析观察组不同时间段血清miR21与炎性细胞因子IL-6、IL-8和TNF-α水平的相关性、治疗效果。结果 治疗前， 观察组血清IL-6、IL-8、TNF-α水平均明显高于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）;治疗1个月后， 观察组血清IL-6、IL-8、TNF-α水平均有所下降， 但仍高于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）;治疗3个月后， 观察组TNF-α水平进一步下降， 但仍高于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）。初诊时， 观察组血清miR21水平高于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）;治疗1个月和3个月后， 血清miR21水平均明显降低， 但仍高于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）。观察组初诊时血清miR21与IL-6呈正相关（r=0.668， P<0.05）， miR21与TNF-α呈正相关（r=0.876， P<0.05）， miR21与IL-8无明显相关性（r=0.005， P>0.05）。治疗1个月后， 观察组血清miR21与IL-6和TNF-α均呈正相关（r=0.576、0.528， P<0.05）， miR21与IL-8无明显相关性（r=0.003， P>0.05）。治疗前、治疗1个月后， 观察组感戴深度、感戴密度、感戴频度、感戴广度评分均明显低于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）。治疗3个月后， 观察组感戴深度、感戴密度、感戴频度、感戴广度评分与对照组基本持平， 比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论 氟哌噻吨美利曲辛片能够改善脑卒中后抑郁情况， 降低炎症水平。

【关键词】 脑卒中;抑郁;细胞因子;氟哌噻吨美利曲辛片

【Abstract】 Objective   To investigate the effect of flupentixol and melitracen tablets on improving expression of depression related cytokines after stroke and the difference of sentiment tendency. Methods   There were 115 post-stroke depression patients selected as observation group， and another 100 healthy people who had physical examination in the same period were selected as the control group. The serum samples of all subjects were collected， and the miR21 content in the serum was detected by real-time quantitative polymerase chain reaction （PCR） and the concentrations of interleukin-6 （IL-6）， interleukin-8 （IL-8） and tumor necrosis factor-α （TNF-α） in the serum were detected by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）. The clinical data， serum miR21， levels of inflammatory cytokines IL-6， IL-8 and TNF-α， Hamilton depression scale （HAMD） score and sentiment tendency were compared between the two groups. Results   Before treatment， the levels of serum IL-6， IL-8 and TNF-α in the observation group were obviously higher than those in the control group， and their difference was statistically significant （P<0.05）. After 1 month of treatment， the levels of serum IL-6， IL-8 and TNF-α in the observation group were decreased， but still higher than those in the control group， and the difference was statistically significant （P<0.05）. After 3 months of treatment， the levels of TNF-α further decreased， but still higher than that in the control group， and the difference was statistically significant （P<0.05）. At the time of first consultation， the serum miR21 level in the observation group was higher than that in the control group， and the difference was statistically significant （P<0.05）. After 1 and 3 months of treatment， the serum miR21 level in the observation group was obviously declined， but still higher than those in the control group， and their difference was statistically significant （P<0.05）. In the observation group， serum miR21 was positively correlated with IL-6 at the the time of first consultation （r=0.668， P<0.05）， miR21 was positively correlated with TNF-α （r=0.876， P<0.05）， and there was no significant correlation between miR21 and IL-8. （r=0.005， P>0.05）. After 1 month of treatment， there was a positive correlation between serum miR21 and IL-6 and TNF-α in the observation group （r=0.576， 0.528， P<0.05）， and there was no significant correlation between miR21 and IL-8 （r=0.003， P>0.05）. Before treatment and after 1 month of treatment， the sensory depth， sensory density， sensory frequency， and sensory breadth scores in the observation group were obviously lower than those in the control group， and the difference was statistically significant （P<0.05）. After 3 months of treatment， the sensory depth， sensory density， sensory frequency， and sensory breadth score in the observation group were basically the same as those of the control group， and the difference was not statistically significant （P>0.05）.Conclusion   Flupentixomil and melitracen tablets can improve post-stroke depression and reduce the level of inflammation.

【Key words】 Stroke; Depression; Cytokine; Flupentixol and melitracen tablets

脑卒中包括缺血性脑卒中及出血性脑卒中， 在脑血管疾病中缺血性脑卒中的发病率一直居高不下， 有明显上升趋势， 脑卒中生理及病理机制复杂， 病情变化迅速， 后果严重。迄今为止， 缺乏有效的临床治疗手段。更重要的是， 脑卒中不仅发病率高、死亡率高， 而且有过脑卒中病史的人群， 再次发生心脑血管疾病的可能性相比较正常人也高[1， 2]。临床上多应用舍曲林、帕罗西汀、氟哌噻吨美利曲辛片治疗脑卒中抑郁， 但仍存在很多争议。氟哌噻吨美利曲辛片常用于缓解老年人抑郁和焦虑， 本文着重分析氟哌噻吨美利曲辛片治疗脑卒中后抑郁的生理变化以及心理变化。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取于本院就诊的115例脑卒中后抑郁症患者作为观察组， 其中男46例， 年龄48～76岁， 中位年龄63岁;女69例， 年龄46～79岁， 中位年龄58岁。另选同期进行健康体检的100例健康者作为对照组， 其中， 男50例， 年龄46～67岁， 中位年龄62岁;女50例， 年龄44～70岁， 中位年龄60岁。本研究所采用的标本均为检验科废弃标本， 经医院伦理委员会审查符合伦理规范。

1. 2 方法 观察组患者采用口服氟哌噻吨美利曲辛片进行治疗。采集所有研究对象的血清样本， 分别采用实时定量PCR检测研究对象血清中miR21的水平， 使用ELISA检测研究对象血清IL-6、IL-8、TNF-α水平。

1. 2. 1 实时定量PCR检测血清中miR21的水平 收集观察组患者脑卒中发病后12 h的静脉血3～5 ml， 放置于真空促凝管中， 放置在4℃冰箱里静置60 min， 2500 r/min， 离心10 min， 收集血清， 分装为2～4管， 约400～500 μl/管， 进行标记， 放置于-20℃的冰箱中进行保存。对照组抽取静脉血3～5 ml/次， 处理同观察组。提取血清microRNA， 之后采用试剂盒进行microRNA逆转录。miRNA逆转录， 实时定量PCR， U6引物、miR21引物（美国Genecopoeia公司）操作按照All-in-One miRNA 实时定量试剂盒（美国Genecopoeia公司）说明书进行， miR21/U6表示miR21的相对表达量。以正常体检者的miR21含量作为对照， 分析观察组的血清miR21的表达情况。

1. 2. 2 ELISA法检测血清IL-6、IL-8、TNF-α水平 本研究采用IL-6 Human ELISA Kit， High Sensitivity（美国Invitrogen公司， 货号BMS213HS）， IL-8 Human ELISA Kit， High Sensitivity（美国Invitrogen公司， 货号BMS258HS）， TNF alpha Human ELISA Kit， High Sensitivity（美国Invitrogen公司， 货号BMS223HS）， 步骤按照试剂盒要求进行。通过绘制标准曲线计算出样本的IL-6、IL-8、TNF-α水平。

1. 3 观察指标及判定标准 比较两组一般资料。比较观察组不同时间段与对照组血清miR21以及炎性细胞因子IL-6、IL-8和TNF-α水平;HAMD评分;感戴倾向。分析观察组不同时间段血清miR21与炎性细胞因子IL-6、IL-8和TNF-α水平的相关性、治疗效果。感戴倾向评估主要包括感戴深度、感戴密度、感戴频度、感戴广度4项， 均为评分越高越好。以汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评估患者的抑郁状态， HAMD评分标准能较好地反映病情的严重程度， 即病情越轻， 总分越低;病情越重， 总分越高。以HAMD评分减分率作为疗效的判定标准：痊愈：减分率>75%;显效：减分率50%～75%;好转：减分率25%～49%;无效：减分率<25%。

总有效率=（痊愈+显效+好转）/总例数×100%。

1. 4 统计学方法 采用 SPSS19.0 软件进行统计学分析。计量资料以K-S检验进行正态性检验， 正态分布计量资料用均数±标准差（ x-±s）表示， 多行多列计量资料采用方差分析;计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。IL-6、IL-8、TNF-α与miR21的相关性分析采用直线Spearman等级相关分析， 取α=0.05为显著性水平， P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 两组一般资料比较 两组性别比较， 差异无统计学意义（P>0.05）。两组男性、女性中位年龄基本一致。观察组男性体质量指数（BMI）水平高于女性， 但差异无统计学意义（P>0.05）;两组男性、女性BMI水平比较， 差异无统计学意义（P>0.05）。两组男性抽烟、饮酒所占比例大于女性， 但差异无统计学意义（P>0.05）;两组男性、女性抽烟、饮酒所占比例比较， 差异无统计学意义（P>0.05）。观察组男性、女性总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平均明显高于对照组， 高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平低于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）。两组男性、女性血肌酐（Scr）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平比较， 差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。

2. 2 观察组不同时间段与对照组血清IL-6、IL-8、TNF-α表达水平比较 治疗前， 观察组血清IL-6水平明显高于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）;治疗1个月后， 观察组血清IL-6水平有所下降， 但仍高于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）;治疗3个月后， 观察组血清IL-6水平与对照组基本持平， 比较差异无统计学意义（P>0.05）。治疗前， 观察组血清IL-8水平明顯高于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）;治疗1个月后， 观察组IL-8水平有所下降， 但仍高于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）;治疗3个月后， 观察组IL-8水平与对照组基本持平， 比较差异无统计学意义（P>0.05）。治疗前， 观察组血清TNF-α水平明显高于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）;治疗1个月后， 观察组TNF-α水平有所下降， 但仍高于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）;治疗3个月后， 观察组TNF-α水平进一步下降， 但仍高于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2. 3 观察组不同时间段与对照组血清miR21水平比较 初诊时， 观察组血清miR21水平（10.87±6.91）高于对照组的（3.62±

1.85）， 差异具有统计学意义（P<0.05）;治疗1个月和3个月后， 血清miR21水平分别为（5.46±3.27）、（4.74±1.69）， 均较初诊时明显降低， 但仍高于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）。见图1。

2. 4 观察组不同时间段血清miR21与IL-6、IL-8和TNF-α水平相关性分析 初诊时， 观察组血清miR21与IL-6呈正的相关（r=0.668， P<0.05）， miR21与TNF-α呈正相关（r=0.876， P<0.05）， miR21与IL-8无明显相关性（r=0.005， P>0.05）。治疗1个月后， 观察组血清miR21与IL-6和TNF-α均呈正相关（r=0.576、0.528， P<0.05）， miR21与IL-8无明显相关性（r=0.003， P>0.05）。见图2。

2. 5 观察组不同时间段与对照组HAMD评分比较 治疗前， 观察组HAMD评分明显高于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）。治疗1个月后， 观察组HAMD评分明显降低， 但仍高于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）;治疗3个月后， 观察组HAMD评分进一步降低， 与对照组基本持平， 比较差异无统计学意义（P>0.05）。见表3。

2. 6 观察组治疗效果分析 观察组治疗1个月后痊愈6例、显效15例、好转27例、无效67例， 治疗总有效率为41.74%（48/115）;治疗3个月后痊愈19例、显效24例、好转38例、无效34例， 治疗总有效率为70.43%（81/115）。

2. 7 观察组不同时间段与对照组感戴倾向比较 治疗前， 观察组感戴深度、感戴密度、感戴频度、感戴广度评分均明显低于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）。治疗1个月后， 观察组感戴深度、感戴密度、感戴频度、感戴广度评分较治疗前有所提高， 但仍低于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）。治疗3个月后， 观察组感戴深度、感戴密度、感戴频度、感戴广度评分与对照组基本持平， 比较差异无统计学意义（P>0.05）。见表4。

3 讨论

随着我国脑卒中后抑郁发病率呈现逐年升高趋势， 预防和治疗脑卒中后抑郁成为迫在眉睫的问题。脑卒中后抑郁患者通常在情绪方面比较低落， 常表现为闷闷不乐、郁郁寡欢、无欲无求;在生理方面， 通常表现为胸闷乏力、易疲劳、食欲下降、体重减轻;同时表现为记忆力差、失眠、多梦等不良生理反应;个别脑卒中后抑郁患者还会出现躁狂症状， 甚至产生幻觉、妄想、轻生等精神病性症状[1]。患者往往会产生许多负面行为， 严重影响正常生活， 甚至会产生很多自我伤害以及危害他人的问题。目前治疗抑郁症主要采取心理疏导、自信心训练、情绪调节、运动、配合药物等疗法[3]。在药物选择方面， 舍曲林、帕罗西汀、氟哌噻吨美利曲辛片在临床上应用较多， 但仍存在很多争议， 比如药物引起的肝肾功能损害、戒断困难等[4， 5]。本研究重点收集了临床上使用氟哌噻吨美利曲辛片患者的临床资料进行研究。

脑梗死时， 脑部的组织和细胞发生缺血缺氧反应， 而后细胞坏死、凋亡， 细胞膜及血脑屏障通透性增加， 导致细胞中的miRNAs释放入血液中并能在血液中存在一段时间。miR21在多种心血管疾病中的表达均增加， 并参与了细胞增殖和分化等过程[6]。研究发现脑卒中患者血清miR21的表达明显上调， 但miR21参与脑卒中的机制仍需进一步研究， 推测miR-21在脑卒中发展过程中发挥了至关重要的作用。miR-21的作用机制已经有了一定的研究， 研究发现miR21可通过下调PDCD4的表达来促进细胞增殖[7]。另外， miR21的过表达可以抑制正常细胞凋亡信号传导， 抑制miR21可促进细胞凋亡[8]。miR21可能作为一种预测患者病情发展和短时间复发的重要指标。通过文献学习， 发现miR21在一定程度上可以調控STAT3的表达[9]。进一步研究发现miR21和IL-6的峰值越高， 急性脑梗死（ACI）患者复发的比例越高， 两者趋向于一致， 这进一步证实miR21通过调控STAT3来作用于IL-6的表达， 两者与ACI患者的复发密切相关。血清中IL-6在患者炎症发生发展中起到了至关重要的作用， 通过对其的检测可以预测患者情况， 为制定诊疗方法提供了一定的依据， 同时miR21的检测可能为预后评估提供了参照。

脑卒中患者使用氟哌噻吨美利曲辛片可以有效减少炎症因子的分泌水平[5]。而炎症因子在抑郁症患者中可能发挥着重要作用， IL-6参与机体组织细胞的生长、分化和功能调节， 在免疫反应和炎症过程中具有重要作用。IL-6作用的靶细胞很多;其生物效应也十分复杂。IL-6可促进T细胞表面IL-2R的表达， 增强TNF-α促炎症作用， 同时可以加强其他细胞因子的效果。TNF-α是一种主要由单核-吞噬细胞产生的单核因子， 尚可刺激急性期蛋白分泌， 可能参与抑郁的发生发展过程[6]。

研究表明， 氟哌噻吨美利曲辛片可以有效治疗脑卒中后抑郁， 减少患者炎症因子分泌， 改善感戴倾向。对于脑卒中后抑郁的患者， 应该保持良好的生活习惯， 生活作息合理， 尽量避免酗酒、暴饮暴食， 充实生活[7]。沐浴阳光， 多做运动， 同时应该合理宣泄抑郁情绪， 如果自我调整没有办法彻底解决脑卒中后抑郁症状， 应该向心理医生咨询， 必要时服用药物治疗， 以免错过最佳治疗时期。

综上所述， 脑卒中后抑郁患者血清miR21和炎症因子分泌升高， miR21与IL-6和TNF-α呈正相关， 与IL-8无明显相关性。氟哌噻吨美利曲辛片可以有效改善脑卒中后抑郁， 降低miR21和炎症因子水平。

參考文献

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[收稿日期：2019-11-29]