新冠肺炎疫情下结直肠癌标本采集和处理的对策

赵志东，秦贤举，郇金亮

·新型冠状病毒专栏·

新冠肺炎疫情下结直肠癌标本采集和处理的对策

赵志东，秦贤举，郇金亮

200235 上海市第八人民医院普外科

2019 年 12 月以来，新型冠状病毒肺炎（新冠肺炎，COVID-19/2019-nCoV）在我国武汉暴发，并迅速向全世界蔓延[1]。2020 年 1 月 20 日，国家卫生健康委员会将该疾病纳入乙类传染病并按照甲类传染病进行防治[2]。在疫情的影响下，我国的各行各业均受到很大影响，尤其是医疗卫生事业。相关卫生部门在疫情影响下制定了各种应对策略。

COVID-19 病毒对紫外线和热敏感（56 ℃ 30 min），乙醚、75% 乙醇和过氧乙酸等条件下均可有效灭活病毒[3]。COVID-19 的主要传播途径包括呼吸道飞沫和密切接触，在相对封闭的环境中长时间暴露于高浓度气溶胶情况下还可能存在气溶胶传播[4]。疫情期间，医院中患者来源结构复杂、人流密集，是新冠肺炎感染的高发地，加之结直肠癌患者本身免疫力较低，成为易感人群之一[5]。肿瘤患者一旦感染新型冠状病毒肺炎，病程进展会更快，病情加重。

肿瘤标本是最常见的外科病理标本之一，其中蕴含着大量可供开发与挖掘的科学信息，所以受到广泛重视。病理标本特别是肿瘤标本的取材是否准确，不仅关系到病理诊断的准确性，还会关系到患者的预后和治疗[6]。在过去的几十年里，世界各地结直肠癌的发病率和死亡率虽然稳步下降，但结直肠癌在胃肠道恶性肿瘤中仍居首位，是癌症相关死亡的第二大原因[7]。如何保护、保存并充分利用人类结直肠癌遗传资源，提高我国结直肠癌防治水平，已成为结直肠癌治疗的重中之重。结直肠癌研究组织标本在促进其研究进展过程中扮演了重要的角色。

在结直肠癌手术的样本采集和处理过程中，虽然会在术前进行流行病学接触史及 COVID-19 感染者排查。但是在疫情未结束之前，考虑到 COVID-19 感染潜伏期较长，为避免交叉感染，医护人员在样本采集和处理过程中应严格遵守标准预防措施和生物安全措施[8]。为了最大程度降低新冠疫情对结直肠癌样本采集和处理造成的影响，探讨疫情下结直肠癌样本采集和处理的开展方式及感染防控策略，本文基于新冠肺炎疫情，根据 COVID-19 病原学及流行病学资料，提出了个人和组织样本的生物安全防护原则以及若干建议。

1 新冠肺炎疫情下结直肠癌样本采集对策

1.1 样本采集人员的生物安全防护

1.1.1 样本采集人员要求 结直肠癌组织取样人员须具备相应工作资质、岗位能力认可。定期接受常规专业培训，包括相应技术规范、操作规程、生物安全防护等，并考核合格。近期应接受 COVID-19 相关微生物学、感染病学、流行病学、感染控制学等培训[8]。掌握正确的洗手时机，正确执行手卫生（七步洗手法）。不随意触摸个人面部皮肤、眼睛、鼻孔等黏膜部位。正确理性面对疫情，时刻保持良好的生物安全防护意识。

1.1.2 样本采集相关人员的个人生物安全防护 结直肠癌的取材包括活检标本、内镜下切除的腺瘤标本、手术标本等[9]。新冠时期，进行结直肠癌样品取样的人员应戴医用外科口罩、穿着清洁无菌的长袖袍服。术前预计会产生大量液体并可能渗透进袍服的操作时，相关人员应使用防水围裙或者防水长罩服[10]。取样时应使用护目镜、安全眼镜、面罩等以避免样本飞溅对眼部和面部造成的危害；佩戴前应先洗手，检查有无破损，有无松懈。此外疫情期间，需格外注意防护手套的使用与更换，确保有效遮盖，无漏损，完全遮盖住手及手腕部并覆盖外衣袖。另外，取样人员应穿着舒适、防滑、防水、防腐蚀和不露脚趾的鞋，避免碰撞和喷溅暴露[11]。

注意事项：医用外科口罩佩戴时，双手沿鼻压紧贴合，戴上后确认密封，摘下时不要触碰正面；手套佩戴前须确认气密性；防护服穿脱符合规范[12]；脱手套和防护服前全身喷雾消毒（有效氯浓度 500 ~ 1000 mg/L 消毒液，或 75% 乙醇），按标准流程依次脱去个人生物安全防护装备，污染面切勿接触内部衣物，手不接触外表面[2]。

1.2 采集过程中样本的生物安全防护

国家卫生健康委发布的《新型冠状病毒实验室生物安全指南（第二版）》将新型冠状病毒暂且按照病原微生物危害程度分类中第二类病原微生物进行管理。在疫情期间为确保安全，所有为实验室调查目的采集的样本均应视作具有潜在传染性[8]。故建议疫情期间的样本组织都以微生物危害程度二级进行管理。未经培养的感染性材料的操作（人体组织样本或者动物组织样本）都应该在生物安全二级实验室（BSL-2）中进行，同时采用生物安全三级实验室（BSL-3）的个人防护[11]。生物安全实验室规范如表 1 所示[2]。

表1 生物安全实验室规范

注：“√”表示在不同等级的生物安全实验室中应穿戴的防护用品；文字表示需加强防护等级；“-”表示可不穿戴的防护用品。

2 新冠肺炎疫情下结直肠癌样本转运中的对策

2.1 样本转运人员要求

确保所有运送标本的工作人员都接受过安全处置和溢出后去污程序的培训，并对相关风险知情同意[13]。人员在转运途中必须佩戴医用外科口罩。采取个人二级生物安全防护（采集组织样本需要：一次性工作帽、防护眼罩、防护口罩、防护服、双层手套）[2]。接收样本后用 75% 乙醇喷洒标本采集管用于消毒，放入密封袋中，再次采用 75% 乙醇消毒后放入转运箱（带有生物安全标识）前确认转运箱是否已消毒，如确定未消毒、不确定是否消毒、怀疑消毒不到位时，可于开箱瞬间用 75% 乙醇喷雾消毒。

2.2 样本的转运要求

同一患者 2 份以上的密封样本可以放在同一密封袋中，不同患者应采用不同密封袋放置并做好记号。密封袋外注明样本基本信息，建议附上样本转运清单随样本一起转运。转运箱要有统一的特殊标识，运输时要单独转运，不可与其他物品混杂[14]。包装符合感染性物质运输的三层包装系统，样本确认不会溢出，装入两层密封袋后置于样本盒内，消毒封闭后将样本盒正向放入转运箱，转运箱封闭前用紫外线消毒（非紧急状态时）、喷雾消毒、外表面用 75% 乙醇消毒进行[2]。若需航空运输，除转运箱外，样本包装材料也应符合防水、防破损、防外泄、耐高温、耐高压并应当印有卫生行政主管部门规定的 A 类生物安全包装要求，有生物危险标签、标识、运输登记表、警告用语和提示用语。运输过程中保持转运箱平稳，样本直立，避免剧烈振荡。中途不可自行打开转运箱，若发生意外情况，须到接收地点说明情况后与样本接收人员做好防护并共同处理，确保医疗机构的实验室根据处理的生物类型遵守适当的生物安全规定和运送要求[11]。

3 新冠肺炎疫情下结直肠癌样本的接收及处理的对策

疫情期间的样本组织都以微生物危害程度二级进行管理。接收人员需二级生物安全防护[8]，标本进行双签收后，接收人员用75% 乙醇对转运箱外部进行消毒，静置 3 ~5 min 后，小心打开转运箱后再次对箱子内部及密封袋消毒，检查标本运送过程中有无撒漏并核对病人信息，然后将标本放入储存盒中置于专用冰箱 4 ℃冷藏（不超过 24 h）保存，长期保存可置于–70 ℃或更低温度[14]。样本的接收及处理涉及到实验室操作，故以下为在疫情期间实验室的生物安全防范。

4 新冠肺炎疫情下实验室相应安全防护原则

4.1 实验室人员生物安全防护

针对不同性质的样本，有着相应的防护对策，结直肠癌肿瘤组织样本和未经培养的感染性材料的操作（人体组织样本或者动物组织样本）都应该在生物安全二级实验室（BSL-2）中进行，同时采用生物安全三级实验室（BSL-3）的个人防护[11]。

4.2 实验室生物安全防护

在开始操作前用 75% 乙醇对试剂准备区、标本制备区、生物安全柜以及台面进行消毒，并紫外照射 30 min，打开安全柜风机运行 15 ~ 30 min 后开始操作。生物安全柜中应配备利器盒，装 500 ~ 1000 mg/L 含氯消毒液用于丢弃标本、废液及与试剂、标本接触过的实验耗材（枪头、EP 管等）。实验结束后对实验室的每个区域进行消毒，依次用 75% 乙醇及 1% 含氯消毒剂对安全柜台面、移液器等用品和地面进行消毒，安全柜风机至少运行 10 min 后方可关机。用 75% 乙醇对空气进行消毒，10 min 后开启通风装置10 min，关闭通风装置后打开安全柜及实验室的紫外灯照射 30 min[14]，注意紫外灯距台面 0.9 m 以内，密闭 30 min 以上，人员离开。

所有样本检测活动要进行必要的动态生物安全风险评估，根据动态评估结果实施生物安全计划，既避免过度防护、过度消毒，又能确保无生物安全意外发生。

4.3 实验用品和消毒

4.3.1 样本转运箱 要求符合 A 级生物安全规范。疫情期间建议结直肠癌患者的手术样本在固定后（固定可防止细菌的腐蚀和组织的自溶）采用转运箱转运，特殊标本建议加特殊标识。转运箱需要定期采用有效氯浓度为500 mg/L的消毒液或 75% 乙醇进行清洁消毒。转运箱一般不能进入隔离病房，但若从隔离病房取出，须采用有效氯浓度为1000 mg/L 的消毒液或 75% 乙醇进行内部和外部清洁与消毒。如采用密封标本袋盛装样本，则密封标本袋需透明、并贴有生物安全标识[15]。

4.3.2 生物安全操作柜 生物安全二级实验室（BSL-2）必须要年检合格、通过性能验证。在运行期间性能指标要符合要求，需要每日进行功能监测、清洁消毒等。生物安全操作柜操作空间以 30 V 紫外线灯消毒 30 min 以上，紫外灯需定期进行性能监测、对监测数据进行记录，累计使用时间不超过规定时间。同时还要注意根据消毒空间大小合理应用紫外线灯管数量以及有效消毒距离。生物安全柜内标本分装用具使用专用移液枪，吸头带滤芯为佳。

4.3.3 标本袋 标本袋应有生物安全标识[15]。

4.3.4 标本分装工具 标本分装工具均需要灭菌。

4.3.5 消毒液 对实验室每天要进行消毒，实验前后使用500 mg/L 有效氯的消毒液（84 消毒液 100 倍稀释）或 75% 乙醇进行桌面、台面及地面消毒。消毒液应现配现用，使用时限≤24 小时[2]。

5 新冠肺炎疫情下实验室的医疗废物处理

样本采集和处理中需对相应的废弃物进行处理。潜在污染区和污染区产生的医疗废弃物达到垃圾袋或医疗利器盒3/4 时应该及时封口处理。先在垃圾袋外表面喷洒 1000 mg/L含氯消毒液，扎紧袋口，再次用 1000 mg/L 含氯消毒液喷洒袋外表面，出污染区放入第二层垃圾袋中扎紧袋口。垃圾袋和利器盒外粘贴红色高感染性废弃物标识及中文标签。标签内容包括：医疗废物产生单位、产生部门、产生日期、类别等。随后放入专用转运箱密闭转运，转运箱外也应粘贴红色高感染性废弃物标识及中文标签。

6 小结

新冠肺炎疫情下结直肠癌肿瘤样本的采集及其处理对实验室生物安全防控体系提出了更高的要求。实验室生物安全防护和个人生物安全防护都是避免院内感染的重要环节。每个医务工作者都应该提高生物安全防控意识，时时从工作中总结经验，吸取经验教训，及时发现和改善不足，不断完善实验室生物安全防控体系。

[1] National Health Commission of the People's Republin of China, National Administration of Traditional Chinese Medicine. Diagnosis and treatment of pneumonia caused by novel Coronavirus infection (trial fifth edition). 2020-02-04. http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7653p/ 202002/3b09b894ac9b4204a79db5b8912d4440/files/7260301a393845fc87fcf6dd52965ecb.pdf. (in Chinese)

中华人民共和国国家卫生健康委员会, 国家中医药管理局. 新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行第五版). 2020-02-04. http:// www.nhc.gov.cn/yzygj/s7653p/202002/3b09b894ac9b4204a79db5b8912d4440/files/7260301a393845fc87fcf6dd52965ecb.pdf.

[2] Chinese Society of Laboratory Medicine. Biosafety protection guidelines for clinical laboratory testing of 2019 novel coronavirus pneumonia (trial version 1). (2020-01-30) [2020-02-28]. http://www. cslm.org.cn/cn/news.asp?id=73.html (in Chinese)

中华医学会检验医学分会. 2019新型冠状病毒肺炎临床实验室检测的生物安全防护指南(试行第一版). (2020-01-30) [2020-02-28]. http://www.cslm.org.cn/cn/news.asp?id=73.html.

[3] Zhou P, Yang X, Wang XG, et al. A pneumonia outbreak associated with a new coronavirus of probable bat origin. Nature, 2020, 579(7798):270-273.

[4] Yang ZY, Tong Y, Tan K, et al. Emergency management and protective measures for liver cancer patients during the outbreak of new coronavirus infection. Chin J Hepat Surg (Electronic Edition), 2020, 9(2):97-100. (in Chinese)

杨振宇, 仝瑶, 谭凯, 等.新型冠状病毒感染疫情期间肝癌患者应急管理及防护措施. 中华肝脏外科手术学电子杂志, 2020, 9(2):97- 100.

[5] Siegel CA, Sands BE. Risk factors for colorectal cancer in Crohn's colitis: a case-control study. Inflamm Bowel Dis, 2006, 12(6):491- 496.

[6] Shuai ZF, Wu SQ. Experience of sampling methods of surgical pathological tumor specimens. J Qiqihar Univ Med, 2012, 33(16): 2216-2217. (in Chinese)

帅智峰, 吴淑琴. 外科病理肿瘤标本的取材方法体会. 齐齐哈尔医学院学报, 2012, 33(16):2216-2217.

[7] Huang C, Wang Y, Li X, et al. Clinical features of patients infected with 2019 novel coronavirus in Wuhan, China. Lancet, 2020, 395(10223):497-506.

[8] World Health Organization. Suspected outbreak of novel coronavirus infection when a medical institution for infection prevention and control-Interim guidance document. 2020-01-25. https://apps.who.int/ iris/bitstream/handle/10665/330674/9789240000957-chi.pdf. (in Chinese)

世界卫生组织. 怀疑发生新型冠状病毒感染时医疗机构的感染预防和控制-临时指导文件. 2020-01-25. https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/330674/9789240000957-chi.pdf.

[9] Wang KX, Wang J, Lei LR. Comparative analysis of high grade intraepithelial neoplasia by colorectal biopsy and pathological specimens by surgical excision. Contemp Med, 2013, 19(35):52-53. (in Chinese)

王开昕, 王晶, 雷立容. 结直肠活检高级别上皮内瘤变与手术切除病理标本对比分析. 当代医学, 2013, 19(35):52-53.

[10] World Health Organization. Infection prevention and control of epidemic- and pandemic-prone acute respiratory infections in health care. Geneva: World Health Organization, 2014. http://apps.who.int/ iris/10665/112656/.

[11] National Health Commission of the People’s Republic of China. Laboratory biosafety guide of novel Coronavirus (second edition). (2020-01-23) [2020-02-28]. http://www.nhc.gov.cn/qjjys/s7948/202001/ 0909555408d842a58828611dde2e6a26.shtml. (in Chinese)

中华人民共和国卫生健康委员会. 新型冠状病毒实验室生物安全指南(第二版). (2020-01-23) [2020-02-28]. http://www.nhc.gov.cn/ qjjys/s7948/202001/0909555408d842a58828611dde2e6a26.shtml.

[12] Regulation for prevention and control of healthcare associated infection of airborne transmission disease in healthcare facilities. Chin J Infect Control,2017, 16(5):490-492. (in Chinese)

经空气传播疾病医院感染预防与控制规范WS/T511-2016. 中国感染控制杂志, 2017, 16(5):490-492.

[13] Disease Control and Prevention, the Infection Control Africa Network. Best practices for environmental cleaning in healthcare facilities in resource-limited settings. 2019. https://www.cdc.gov/hai/pdfs/resource- limited/environmental-cleaning-508.pdf.

[14] Chinese Society of Laboratory Medicine. Expert consensus on nucleic acid detection of new coronavirus pneumonia virus. Natl Med J China, 2020, 100(00):E003-E003. (in Chinese)

中华医学会检验医学分会. 新型冠状病毒肺炎病毒核酸检测专家共识. 中华医学杂志, 2020, 100(00):E003-E003.http://rs.yiigle.com/yufabiao/1180140.htm

[15] Ministry of Health of the People's Republic of China. Regulations on the management of transportation of highly pathogenic pathogenic microorganisms (toxins) or samples that can infect humans. 2005-12-28.

中华人民共和国卫生部. 可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定. 2005-12-28.

上海市徐汇区科委重大项目（SHXH201794）

秦贤举，Email：qinxj@hotmail.com

2020-03-14

10.3969/j.issn.1673-713X.2020.02.005